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1.
目的 分析微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的核酸检测结果,比较两种方法检测各类样本的差异性,为改进新型冠状病毒核酸检测方案提供数据支持。 方法 利用ddPCR和qPCR技术对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者发病不同时间的全血、尿液、粪便共22份标本进行新型冠状病毒核酸检测。 结果 两种方法对人保守区域基因扩增结果一致:全血标本信号最强,尿液次之,粪便最少;ddPCR在1份全血,1份尿液,5份粪便中检出ORF-1ab和N基因的阳性微滴,qPCR仅在3份粪便中检出上述基因,漏检的3个标本基因拷贝数平均浓度为128 copies/ml;ddPCR在发病<5、5~15、>15 d的各类标本中都有检出,qPCR检出以中晚期为主;重症病例用ddPCR均可测到阳性微滴,qPCR检测的各类标本均为阴性;轻症病例的各类标本中qPCR只有粪便核酸检测阳性,ddPCR检出率高于qPCR。 结论 ddPCR可以有效克服qPCR 灵敏度不足的难题,是对qPCR 的有益补充,尤其是针对病毒载量比较低的血液、尿液和可疑的粪便或肛拭子标本,适用于早期感染的判断及患者治愈后出院诊断。 相似文献
2.
3.
目的探讨极速实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光PCR、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和胶体金免疫层析法(gold immunochromatography assay,GICA)4种方法检测新型布尼亚病毒的特异度和灵敏度,为发热伴血小板减少综合征的早期诊断提供依据。方法采集2017年6月1日至9月30日山东大学附属济南市传染病医院86例临床诊断为发热伴血小板减少综合征患者的血清样本,分别应用极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、ELISA和GICA 4种方法进行检测。统计学分析采用χ^2检验。结果86份患者血清标本中,极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、IgM-ELISA、IgG-ELISA、IgM-GICA、IgG-GICA的新型布尼亚病毒阳性分别为82份(95.34%)、79份(91.86%)、41份(47.67%)、8份(9.3%)、19份(22.09%)和3份(3.49%)。极速实时荧光PCR特异度为100%,灵敏度达到1×103拷贝/mL,3次重复扩增试验显示其Ct值变异系数均<2%。在发热伴血小板减少综合征进展的1期、2期、3期病程中,极速实时荧光PCR的阳性检出率为41份(97.62%)、34份(94.44%)、7份(87.50%),实时荧光PCR的阳性检出率为39份(92.86%)、33份(91.67%)、7份(87.50%),在1期和2期两个病程,极速实时荧光PCR阳性检出率略高;IgM-ELISA阳性检出率从1期(28.57%)到3期(87.50%)显著增高,2期、3期与1期相比,差异均有统计学意义(χ^2=8.347、7.561,均P<0.01);IgM-GICA的阳性检出率从1期(14.29%)到2期(33.33%)也有增高,差异有统计学意义(χ^2=3.962,P<0.05),但与其他方法相比,其检出率偏低。1期,实时荧光PCR阳性检出率显著高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG),差异均有统计学意义(χ^2=33.740、55.080、49.010、64.340,均P<0.01)。2期,实时荧光PCR的阳性检出率高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG),差异均有统计学意义(χ^2=7.700、46.720、23.700、50.630,均P<0.01)。3期,极速实时荧光PCR、实时荧光PCR和IgM-ELISA表现出同样高的阳性检出率,远高于IgG-ELISA和GICA(IgM和IgG)。实时荧光PCR阳性检出率和IgG-ELISA、IgM-GICA、IgG-GICA之间差异均有统计学意义(均χ^2=6.250,P<0.05)。结论极速实时荧光PCR在新型布尼亚病毒的早期检测中有更高的灵敏度和特异度,且重复性好、稳定度高,与传统实时荧光PCR相比大大缩短了扩增时间,对发热伴血小板减少综合征的早期快速诊断具有重要价值。 相似文献
4.
根据医学摄影不同拍摄对象,结合各种光源特点,介绍了用光的一般方法和掌握的基本原则,对物体的反光控制、透明物体内部结构与质感的表现等难点问题进行了研讨,并对荧光摄影作了简要介绍。 相似文献
5.
The effects of aging on diencephalic (A-11, A-12, A-13, A-14) catecholamine neurons in the F344 male rat were examined with Falck-Hill?rp histofluorescence. In contrast to the age-related increase in A-12 perikaryal fluorescence intensity previously reported (Hoffman and Sladek: Neurobiol. Aging 1:27-37, '80), incertohypothalamic perikarya showed decreased (A-13) or unchanged (A-11, A-14) fluorescence intensity with age. Cell counts of fluorescent A-12 perikarya disclosed a 47% increase in the number of fluorescent A-12 neurons in 30-month-old F344 rats relative to the 3-month-old controls; numbers of A-11 and A-13 fluorescent perikarya decreased with age, but the declines were not statistically significant. It is unlikely that the age-related increase in number of fluorescent A-12 perikarya is the result of proliferation of neurons in the aged F344 rat. Rather, the greater number of fluorescent A-12 perikarya in 30-month-old F344 rats indicates that some A-12 neurons in 3-month-old F344 rats contain levels of dopamine that are subthreshold for detection with the Falck-Hill?rp fluorescence technique, whereas virtually all A-12 perikarya in 30-month-old F344 rats contain detectable quantities of dopamine. These findings suggest that diencephalic catecholamine neurons exhibit divergent changes in transmitter content and cell number that may reflect varying degrees of functional integrity during brain aging. 相似文献
6.
E. Drakaki E. Borisova M. Makropoulou L. Avramov A. A. Serafetinides I. Angelov 《Skin research and technology》2007,13(4):350-359
BACKGROUND/PURPOSE: Laser-induced autofluorescence spectroscopy provides excellent possibilities for medical diagnostics of different tissue pathologies including cancer. However, to create the whole picture of pathological changes, investigators collect spectral information from patients in vivo or they study different tumor models to obtain objective information for fluorescent properties of every kind of healthy and diseased tissue. Therefore, it is very important to find the most appropriate, and close to the human skin, animal samples from the fluorescence point of view, which will allow the extrapolation of the animal data to human spectroscopic diagnostics. METHODS: In the present work, we examined the autofluorescence properties of different animal skin tissues, which are considered as the most common skin models. A nitrogen laser was used as an excitation source. Samples of healthy mouse, chicken and pig skin in vivo and/or ex vivo were studied and were compared with results obtained from investigations of healthy human skin in vivo. RESULTS AND CONCLUSION: Specific features of the recorded spectra are discussed and the possible origin of the obtained fluorescence signals is proposed. Quantitative evaluation of data extrapolation for each skin type is also depicted. 相似文献
7.
荧光分光光度法检测半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在大鼠体内分布的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察由半乳糖化白蛋白磁性纳米粒运载的阿霉素经舌静脉给药后在大鼠体内的的分布状况.方法全部大鼠随机分为四组,经舌静脉,按分组分别注射相应药物,剂量均为阿霉素2.5 mg/kg体重.取全血、心、肺、肝、脾、肾.全血制成血浆,器官组织制成匀浆,盐酸乙醇法提取阿霉素,用荧光光度计测量.结果静脉注射同等剂量、不同剂型的阿霉素药物后,阿霉素在器官中的蓄积程度从高到低:肝:D靶肝>D非靶肝、C>B>A;心脏、肾、血浆:A>B>D、C;脾:B>A、C、D;肺:B>A>C、D.磁性阿霉素白蛋白纳米粒注入体内后,在心、肺、肝、脾、肾中的药物浓度在15~30min达峰值,而半乳糖化后,阿霉素的药物峰值提前到5 min或之前.外加磁场和未加磁场的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒组的药物靶向指数和药物选择指数是均高于磁性白蛋白纳米粒.结论磁性阿霉素白蛋白纳米粒经半乳糖化后,可显著增强阿霉素对肝脏的靶向性,并显著降低心、肺、脾、肾、血浆肝外器官的组织阿霉素浓度.利用外加磁场,可提高阿霉素在肝脏特定部位蓄积的能力.因此,静脉注射半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒是可行的. 相似文献
8.
Cytosine deaminases (CDs) in bacteria andfungi are found to deaminate prodrug 5 - FC intocytotoxic agent 5 - FU .Yeast CD (YCD) is clonedfrom Saccharomyces cerevisiae.It has been shownpreviously that YCD was more efficient inconversing5 - FC than bacterial CD(b CD) [1-3 ] .As anovel suicide gene therapy system,YCD/ 5 - Fcsystem may be promising in cancer therapy andprevention of graft versus host disease.In thepresent study,we established a P388/ DBA murineleukemia model by infusin… 相似文献
9.
Sabrina Benedetto Roberta Pulito Simonetta Geninatti Crich Guido Tarone Silvio Aime Lorenzo Silengo Jrg Hamm 《Magnetic resonance in medicine》2006,56(4):711-716
Targeted imaging requires site-specific accumulation of a contrast agent (CA), and the properties of that agent must be selected according to the abundance of the target to obtain a signal above the detection limit of the instrument. However, numerical estimates of receptors per cell are rarely found in the literature. Integrin receptors would be particularly promising targets because of their accessibility from the blood stream and expression on activated neovascular endothelial cells. We systematically estimated the number of integrin receptors of cell lines and primary cells by flow cytometry analysis. Since integrin receptors are heterodimeric molecules, and alpha(v) forms complexes with various beta subunits, the numbers of alpha(v) and beta(3) subunits are therefore dissimilar. The observed values are 3 . 10(3)-1.4 . 10(4)/cell for alpha(v), and 5.3 . 10(2)-1.1 . 10(4)/cell for beta(3). Despite the low number of exposed receptors, we show that up to single-cell MR visualization can be achieved with the use of iron oxide beads complexed with antibodies as CAs. 相似文献
10.
特异性荧光偏振免疫法监测521例肾移植后环孢素A全血浓度3275次 总被引:2,自引:0,他引:2
目的通过监测肾移植后病人环孢素A(CsA)全血浓度 ,提出CsA在三联免疫抑制用药方案中的理想治疗窗。方法用特异性荧光偏振免疫法测定CsA全血浓度 ,对521例病人监测3275次 ,按术后时间及临床表现分组比较。结果肾移植后<1 ,、1~3、3~6、6~12个月、1~2和>2年的CsA全血谷浓度的理想治疗窗应分别为250~450、200~400、150~300、100~250、100~200和100~180μg/L。结论CsA全血浓度在上述范围内 ,中毒反应和排异反应明显减少 相似文献