幽门螺杆菌cagA、oipA、iceA1基因的检测及其意义

〔目的〕检测分离自胃炎、胃溃疡患者的幽门螺杆菌 (Hp)cagA、oipA、iceA1基因 ,了解这些基因与消化性疾病的关系。〔方法〕取 163份临床胃活检标本 ,用布氏平板分离培养Hp ,分离培养出来的细菌 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增cagA、oipA、iceA1基因片段 ,用卡方检验进行统计学分析。〔结果〕163份标本中检出Hp 5 8株 ,检出率为 3 5 .6%。ca gA基因的阳性率为 75 .9%(4 4 5 8) ,其中胃炎 66.7%(2 8 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;oipA基因的阳性率为 46.6%(2 7 5 8) ,其中胃炎 2 6.2 %(11 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;iceA1基因的阳性率为 3 1.0 %(18 5 8) ,其中胃炎 2 1.4%(9 42 ) ,胃溃疡 3 3 .3 %(9 16)。卡方检验分析表明胃溃疡患者HpcagA、oipA、iceA1阳性率均显著高于胃炎患者。〔结论〕HpcagA、oipA、iceA1毒力基因在胃溃疡患者的检出显著高于胃炎患者。     

儿童幽门螺杆菌iceA1、babA2基因分布及其细胞免疫功能研究

目的探讨儿童幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)iceA1、babA2基因分布特征及其细胞免疫功能。方法对152例有消化道症状患儿行胃镜检查,并在胃窦部取粘膜作Hp的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出的Hp菌株的iceA1、babA2基因,并采用生物素-链霉亲和素(biotin-sreptavidin,BSA)系统检测患者外周血T细胞亚型,ELISA法检测其细胞因子。结果152例中,检出Hp菌株98例,其中iceA1阳性菌株65例,轻度胃炎、中至重度胃炎iceA1阳性率分别为43.59%(17/39)、79.25%(42/53),差异有统计学意义(P<0.01);babA2阳性菌株71例,轻度胃炎、中重度胃炎babA2阳性率分别为48.72%(19/39)、86.79%(46/53),差异有统计学意义(P<0.05);6例活动性胃炎均为iceA1、babA2阳性;iceA1 、babA2 患儿的CD3 、CD4 、CD4 /CD8 和IL-2下降,IL-6、IL-8水平升高(P均<0.001)。结论儿童Hp感染多为iceA1 、babA2 菌株。iceA1 、babA2 Hp菌株为高毒力菌株,易引起较严重的慢性胃炎,使患者细胞免疫功能下降,引起以Th1细胞为主的炎症浸润反应。     

幽门螺杆菌上皮接触诱导基因iceA1的克隆及序列特征

目的:克隆和分析镇江地区来源于不同疾病的(胃癌、溃疡和胃炎)幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的表皮接触诱导基因iceA1.方法:从胃十二指肠疾病患者胃黏膜组织中分离培养获得H.pylori,PCR扩增检测iceA1基因,并克隆至pMD18-T载体上,进行测序和序列分析.结果:克隆和测序了镇江地区来源于不同疾病的(胃癌、溃疡和胃炎)共12株H.pylori的i c e A1基因片段,并与标准菌株60190比对,结果显示镇江地区的H.pylori的iceA1基因中存在着3处框内缺失突变热点(780del6、809del5、914del7),这些缺失突变在溃疡和胃炎中均存在,但是胃癌株只存在809del5.对缺失片段周围的序列进行分析,这些缺失序列的两端基本都与同向重复序列相连,这可能与复制过程中滑动错配的小片段缺失模型有关.结论:iceA1序列的变异性有可能作为分析H.pylori群体遗传学的有用工具.     

广州地区儿童感染幽门螺杆菌iceA基因亚型与胃炎的相关性研究

目的 探讨广州地区儿童感染幽门螺杆菌(H.pylori)的iceA基因亚型与胃炎的关系.方法 105例胃、十二指肠疾病患儿的胃窦处取3块胃黏膜,分别进行快速尿素酶反应、病理检查和聚合酶链反应(PCR).抽提胃黏膜基因组DNA,用3对引物检测H.pylori ureA和iceA基因,分析H.pylori iceA基因亚型与胃炎的关系.结果 105例样本中,快速尿素酶反应、病理检测和聚合酶链反应(PCR)三者均阳性的标本52例,H.pylori iceA1亚型菌株单独检出率78.84%(41/52),H.pylori iceA2亚型菌株单独检出率1.92%(1/52),H.pylori iceA1和iceA2亚型均阳性的检出率3.84%(2/52),iceA1和iceA2亚型均阴性的比率15.38%(8/52),H.pylori iceA1亚型阳性率与其它基因亚型相比较,差异有显著性;感染H.pylori iceA1亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎3例,中度慢性胃炎15例,重度慢性胃炎25例;未感染H.pylori iceA1亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎2例,中度慢性胃炎4例,重度慢性胃炎3例,感染H.pylori iceA1亚型菌株患儿与未感染H.pylori iceA1亚型菌株患儿的胃黏膜病变程度差异有显著性(P＜0.05).结论 H.pylori iceA1亚型是广州地区儿童感染H.pylori的优势基因亚型,H.pylori iceA1菌株容易引起较严重慢性胃炎.     

内蒙古地区幽门螺杆菌iceA基因型的分布

目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)iceA基因型与胃十二指肠疾病的关系,旨在寻找内蒙古地区Hp iceA基因型的分布特点。方法:从164例胃十二指肠疾病(包括CSG 32例,CAG 70例,PUD32例,GC 30例)患者的胃黏膜活检组织中分离培养并经系统鉴定确认为Hp者,传代培养2 d扩增细菌。用标准方法提取Hp基因组DNA,进行PCR扩增检测Hp iceA基因的表达情况。iceA基因与疾病关系的分析采用χ2检验,P<0.05认为有统计学意义。结果:在164例临床分离的Hp菌株中,iceA基因的检出率为56.71%,iceA 1基因的检出率为39.63%(65/164),iceA 2基因的检出率为30.49%(50/164),iceA1的检出率高于iceA 2,差异有统计学意义(P<0.05)。在各疾病组中,iceA 1检出率分别为CSG 40.63%,CAG37.14%,PUD 43.75%,GC 40.00%,iceA 2检出率分别为CSG28.13%,CAG28.57%,PUD31.25%,GC33.33%,iceA 1和iceA 2基因在各组疾病中的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Hp临床分离株的基因型以iceA 1为主,Hp感染后其iceA基因型不能预示感染的个体将更有可能发生何种胃十二指肠疾病,iceA基因不能作为Hp毒力强弱的指标。     

幽门螺杆菌iceA基因对SGC7901细胞生长的影响

目的 观察幽门螺杆菌(Hp)野生株与iceA基因插入失活突变株对人胃上皮细胞株SGC7901细胞生长的影响,研究Hp毒力基因iceA相关的细胞毒性效应.方法 分别将幽门螺杆菌野生株与iceA基因插入失活突变株与SGC7901细胞共培养48 h,观察比较细胞形态学变化;用MTT法检测分析共培养12～36 h细胞增殖活性;流式细胞仪分析48 h细胞周期和24、48 h细胞凋亡.结果 Hp野生株组和突变株组引起相似的细胞形态学改变;30 h和36 h时各组细胞的增殖活性表现出明显差异(P<0.05),培养30 h时突变株组(0.745±0.006)的细胞增殖活性高于野生株组(0.728±0.017)(P<0.05);细胞周期结果显示,野生株组G2期阻滞,而突变株组为S期阻滞;培养24、48 h野生株组[(33.04±10 69)%、(52.28±3.41)%]和突变株组[(44.23±11.34)%、(57.32±0.88)%]均可以诱导细胞产生明显凋亡(P<0.05),但二者在诱导细胞凋亡的能力方面差异无统计学意义(P>0.05).结论 幽门螺杆菌对于SGC7901细胞生长状态产生明显的影响,iceA基因的插入失活突变对于SGC细胞的形态变化和凋亡的影响无明显差异,对细胞增殖和细胞周期影响差异较明显.     

上海地区幽门螺杆菌菌株iceA、babA2基因型与临床的关系

目的检测上海地区幽门螺杆菌(Hp)感染患者中Hp菌株iceA、babA2的分布特征，探讨与Hp临床感染结局相关的菌株基因型。方法141株Hp菌株分离自43例慢性胃炎(CG)、47例十二指肠球部溃疡(DU)、30例胃溃疡(GU)和21例非贲门部胃癌患者的胃镜活检标本。采用PCR方法检测Hp菌株的iceA、babA2、cagA和vacA基因型。结果141株Hp菌株中，iceA1、iceA2和babA2的总检出率分别为74．5％(105／141)、15．6％(22／141)和63．8％(90／141)，其中2例(1．4％)为iceA1、iceA2均阳性，16例(11．3％)为iceA1、iceA2均阴性。DU组的babA2检出率显著高于GU组(74．5％比50．0％。P=0．028)，DU组的cagA^ ／babA2^ 检出率亦显著高于GU组(70．2％比46．7％，P=0．039)。其余疾病组之间的babA2检出率差异无显著性。未发现不同临床疾病与iceA基因型的相关性。结论上海地区Hp感染者的菌株基因型主要是iceA1^ ／babA2^ ，babA2在DU和GU的发病机制中起不同作用。未发现iceA亚型与Hp临床感染结局有相关性。     

Distribution of Helicobacter pylori in north China

AIM: To compare the distribution of virulence-associated genotypes of Helicobacter pylori (H pylori) in two areas of north China with different gastric cancer risk and furthermore probe into the pathogenicity of the bacterium. METHODS: Gastric biopsies were taken from 355 subjects from Zhuanghe, a high risk area of gastric cancer, and 136 subjects from Shenyang, a low risk area of gastric cancer. A total of 149 H pylori strains isolated from these patients were studied by PCR for differences in the genotypes of cagA, vacA, and iceA. RESULTS: In patients with high risk for gastric cancer, higher frequencies of vacA s1 or s1m1b genotypes were found as compared to those from the low risk area. CONCLUSION: There is significantly different distribution of H pylori genotypes between Zhuanghe and Shenyang areas in north China.