氯芬黄敏片中人工牛黄测定方法的改进

将氯芬黄敏片(感冒通片)人工牛黄测定过程中的加氯仿研磨改成加氯仿超声,改进前后测定结果对比表明此方法可行,为以后质量标准的修订提供了有益参考     

Pneumocystis-carinii- Pneumonie bei HIV-infizierten Kindern Umfrage an deutschen Kinderkliniken*

Zusammenfassung Fragestellung: Retrospektive Auswertung der Erkrankungen HIV-infizierter Kinder (<18 Jahre) an einer Pneumocystis-carinii-Pneumonie. Erfa?t wurden Prophylaxesituation, Krankheitsverlauf und Prognose. Methode: Ein Fragebogen wurde an alle 16 p?diatrischen Zentren in Deutschland, die HIV-infizierte Kinder betreuen, verschickt und deskriptiv ausgewertet. Ergebnisse: Von Januar 1989 bis Dezember 1995 wurden aus 6 klinischen Zentren 21 Patienten mit Pneumocystis-carinii-Pneumonie mitgeteilt (1–5 Erkrankungen pro Jahr). In den übrigen 10 Zentren wurden in diesem Zeitraum keine Patienten mit Pneumocystis-carinii-Pneumonie behandelt. 17 Kinder erwarben die HIV-Infektion pr?- und perinatal, 4 Kinder durch Blut oder Blutprodukte. Das Alter der vertikal infizierten Kinder betrug im Median 5 Monate. 15/21 Kindern erhielten keine Pneumocystis-carinii-Prophylaxe. Davon wurden 10 Patienten zum Zeitpunkt der Diagnosestellung nicht durch die aktuell geltenden Prophylaxerichtlinien der Centers for disease control erfa?t, und bei 5 Kindern wurde die HIV-Exposition erst mit Diagnosestellung der Pneumocystis-carinii-Pneumonie bekannt. Die akute Letalit?t betrug 29%, die Letalit?t der beatmeten Kinder 71%. Bis Juni 1996 betrug die mittlere überlebenszeit aller Patienten 20,3±19,1 Monate. Die überlebenszeit der bereits im 1. Lebensjahr erkrankten Kinder war mit 14,8±18,4 Monaten deutlich, aber nicht signifikant kürzer als diejenige der sp?ter erkrankten Kinder (27,6±18,5 Monate). Die nach Kaplan-Meier gesch?tzte 1-Jahres-überlebenszeit betrug 66%. Schlu?folgerungen: Die Pneumocystis-carinii-Pneumonie bei HIV-infizierten Kindern ist in Deutschland eine seltene Erkrankung mit ernster Prognose. Obwohl eine effektive Prophylaxe zur Verfügung steht, treten immer wieder Pneumocystis-carinii-Pneumonien auf, insbesondere bei Kindern, deren HIV-Exposition nicht rechtzeitig erkannt wurde. Die in dieser Umfrage ermittelten überlebenszeiten sind im internationalen Vergleich eher günstig.      

玻璃体内注射辅酶Q10对NaIO3诱导的AMD模型小鼠的保护作用

目的　探讨玻璃体内注射水溶性CoQ10对NaIO₃诱导的年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）的保护作用。方法　66只昆明小鼠分为3组:对照组、NaIO₃诱导组（小鼠尾静脉注射NaIO₃）和CoQ10修复组，小鼠尾静脉注射NaIO₃后玻璃体内分别注射高浓度（2.0 g·L^-1）和低浓度（0.1 g·L^-1）的CoQ10，注射平衡液做假处理组。在建模后第7天取材，行常规组织切片、HE染色、GFAP染色、Iba1染色，检测NaIO₃诱导的视网膜病变和CoQ10对该种病变的修复效果。结果　注射NaIO₃ 7 d后，HE染色结果显示，NaIO₃诱导组小鼠视网膜外核层每10 μm 长度的细胞数由正常水平（29.13±3.97）个减少至（17.50±4.03）个，差异有统计学意义（P<0.01）；GFAP染色结果显示，Müller细胞发生反应性胶质化，与对照组相比每250 μm×250 μm面积的细胞数由（21.17±4.26）个增加至（28.67±2.80）个，差异有统计学意义（P<0.01）；Iba1染色结果显示，小胶质细胞呈现出“阿米巴状”的激活形态，每250 μm×250 μm面积的细胞数由（6.71±2.29）个增加至（22.14±3.76）个，差异有统计学意义（P<0.01）。分别对NaIO₃诱导组小鼠玻璃体内注射高、低浓度的CoQ10（2.0 g·L^-1和0.1 g·L^-1）后，与假处理组相比，其中注射高浓度CoQ10（2.0 g·L^-1）组外核层细胞数目显著增加（P<0.05），而低浓度CoQ10（0.1 g·L^-1）组没有显著差异（P>0.05）。并且，Müller细胞反应性胶质化程度减弱，GFAP阳性细胞数恢复至（23.83±3.87）个；小胶质细胞分枝增多，Iba1阳性细胞数恢复至（16.86±3.29）个，与NaIO₃诱导组相比，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　玻璃体内注射CoQ10可通过减轻Müller细胞的反应性胶质化和抑制小胶质细胞的激活而减缓视网膜感光细胞退化，对AMD起到保护作用。     

Krüppel 样因子4 在神经母细胞瘤中的表达及其与细胞 增殖和侵袭的关系

目的观察Krüppel样因子4(KLF4)在神经母细胞瘤中的表达及其对神经母细胞瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法RT-PCR和免疫组织化学法检测神经母细胞瘤组织及癌旁组织中KLF4的表达。采用电穿孔转染法将KLF4 siRNA转入神经母细胞瘤SK-N-MC细胞中,MTT检测KLF4对神经母细胞瘤SK-N-MC细胞增殖的影响,Boyden小室检测KLF4对神经母细胞瘤SK-N-MC细胞侵袭的影响。结果与癌旁组织相比,神经母细胞瘤组织中KLF4表达水平显著降低,并随病理分期的升高而降低(P<0.05)。转染KLF4 siRNA可显著下调神经母细胞瘤SK-N-MC细胞中KLF4的表达,而KLF4表达下调可显著促进SK-N-MC细胞的增殖和迁移(P<0.01)。结论KLF4可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖和侵袭,KLF4低表达可能与神经母细胞瘤的发生和发展密切相关。     

3种术式治疗重睑术后及甲状腺眼病并发上睑退缩的疗效分析

目的探讨3种术式上睑退缩的疗效。方法重睑术后及甲状腺眼病并发上睑退缩患者15例分为A、B、C组,A组5例9只眼采用A型肉毒杆菌毒素注射治疗,B组5例10只眼采用上睑提肌中央腱膜切断术矫正,C组5例9只眼采用上睑提肌和MOiler肌（穆勒氏肌）延长术矫正上睑退缩,观察3种术式的疗效。结果A组注射A型肉毒杆菌毒素72h后,5例（9眼）上睑退缩外观明显改善,维持4～6个月后恢复至以前未注射时状态;B组上睑提肌中央腱膜切断术,术后睑外形自然,睑闭合自然,其中有2例复发;C组上睑提肌一穆勒氏肌延长术,术后随访3～24个月效果满意,术后无复发和并发症。结论3种治疗上睑退缩的方法对静止期上睑退缩均有效。采用A型肉毒杆菌毒素方法简便,疗效可靠,但持续时间较短,需反复注射;采用上睑提肌中央腱膜切断术操作简单,但不易正确量化且回缩略多;上睑提肌-穆勒氏肌延长术方法较简便,疗效可靠,并发症少。     

锌指样转录因子2与动脉粥样硬化

锌指样转录因子2与动脉粥样硬化密切相关,近年来发现锌指样转录因子2具有抗炎、抗凝、抗增殖的作用。作为细胞内重要的核转录因子,在基因水平调节内源性一氧化氮合酶、黏附分子、细胞/趋化因子、凝血相关因子、血小板源生成因子和成脂相关转录因子等,通过多条途径下调炎症因子,抑制血管平滑肌细胞增殖迁移和脂肪细胞的形成,维持免疫细胞的静止和血液的抗凝状态。现分别从内皮细胞、单核/巨噬细胞、T淋巴细胞、脂肪细胞、平滑肌细胞的角度总结锌指样转录因子2的抗动脉粥样硬化的相关作用及分子机制。     

长链非编码RNA 母系表达基因3调控miR-34a对糖尿病视网膜病变Müller细胞活化及炎症因子分泌的影响

目的　探讨母系表达基因3（maternally expressed gene 3,MEG3）对糖尿病视网膜病变（DR）Müller细胞的活化及炎症因子分泌的影响及机制。方法　高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射构建小鼠DR体内模型。高糖刺激人视网膜Müller细胞株MIO-M1构建DR体外模型。免疫荧光化学染色及Western blot检测小鼠视网膜及Müller细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。Western blot及酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠视网膜及细胞培养基上清中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达。ELISA检测小鼠视网膜及细胞培养基上清中IL-1β蛋白的表达。分别或同时向Müller细胞中转染pcDNA-MEG3及miR-34a mimic对其表达进行干预。qRT-PCR检测MEG3 mRNA及miR-34a表达。结果　与正常对照组小鼠比较,DR组小鼠视网膜中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均增多（均为P<0.05）,MEG3 mRNA表达降低(P<0.01)。与对照组比较,高糖组Müller细胞中MEG3 mRNA表达降低(P<0.01),而GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均升高（均为P<0.05）。与高糖组比较,高糖+pcDNA-MEG3组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均降低（均为P<0.05）。与正常对照组比较,DR组小鼠视网膜及高糖刺激的Müller细胞中miR-34a表达均升高(均为P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-MEG3组中miR-34a表达减少(P<0.01)。与pcDNA+NC mimic组比较,pcDNA+miR-34a mimic组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均升高（均为P<0.05）,而pcDNA-MEG3+NC mimic组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均减少（均为P<0.05）。与pcDNA-MEG3+miR-34a mimic组比较,GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达水平均升高（均为P<0.05）。结论　MEG3在DR小鼠视网膜及高糖刺激的Müller细胞中表达均降低,其可通过负向调控miR-34a抑制Müller细胞活化及炎症因子的分泌。过表达MEG3可能成为DR治疗的新靶点。     

抗苗勒管激素在预测卵泡发育与卵母细胞质量的研究进展

抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)由自分泌、旁分泌产生,主要通过II型跨膜丝氨酸/苏氨酸激酶受体发挥作用,可以抑制原始卵泡募集,阻碍卵泡生长发育,并参与调节颗粒细胞类固醇生成。卵泡液AMH不仅在小窦卵泡中表达,在排卵前大窦卵泡中仍持续表达,通过直接调节各种细胞因子的表达,参与调控卵母细胞成熟的最后阶段,即AMH表达量逐渐减少是卵泡优势化的必备条件,从而影响卵母细胞的质量,在预测卵巢储备方面发挥重要作用,也是预测卵泡发育和卵母细胞质量的重要指标。而血清AMH与卵母细胞质量之间的关系仍存在争议。     

抗苗勒氏管激素评估卵巢储备功能的临床应用现状

卵巢储备功能指卵巢内存留卵泡的数量和质量,其能间接地反映女性的生育能力。抗苗勒氏管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)作为卵巢特异性的生长因子,由颗粒细胞分泌,是预测卵巢储备功能的一个有效指标。血清AMH的水平可以预测卵泡池的大小、卵巢的反应性及女性的绝经年龄,同时可以评估癌症患者的卵巢储备功能。但AMH的测定值受到多种因素的影响,存在一定的局限性。     

抗苗勒氏管激素与卵巢储备及反应性相关研究进展

抗苗勒氏管激素(AMH)的水平对卵巢中的卵泡发育与类固醇激素的产生具有重要意义。体循环中AMH水平受性别和年龄等因素影响,在性腺发育和生殖系统疾病的评价中至关重要。AMH可预测卵巢在辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)中的反应性及女性绝经时间等,并反映卵巢手术或损伤后的卵巢储备能力。本文对近年来关于AMH评价卵巢储备及ART中卵巢反应性的相关研究成果进行综述。