麻风病

20060098 建立巢式PCR和异源双链法检测石蜡标本麻风菌DDS耐药株；20060099 新发和复发麻风患中麻风菌的氨苯砜、利福平耐药基因的检测；20060100 甘肃省麻风病人血缘性与非血缘性亲属家庭发病的对比研究；……[编按]     

慢性乙型肝炎患者基因型以及其病毒载量前C区突变的研究

乙型肝炎病毒是引起慢性病毒性肝炎的重要病原之一，并可导致肝硬化和肝癌发生，严重危害人类健康。根据HBV基因组DNA序列差异〉8％为判断标准，HBV被分为A-G八个基因型，而且其分布有地域性差异。基因型是影响病毒复制，抗病毒治疗疗效以及病毒变异的重要因素，基因型且与疾病的预后、治疗药物的选择等均有一定关系。作通过实时荧光定量PCT、多引物对巢式PCR技术和DNA序列分析，分别测定142例慢性乙肝患血清中HBV DNA的病毒载量、乙肝病毒的基因型以及其前C区（G1896A）突变，旨在探讨浙江部分地区的HBV基因型的分布情况以及各基因型之间的病毒及前C区的突变的差异。为以后选择抗病毒药物治疗打下理论基础；现报告如下。     

螺旋体传染病

莱姆病临床实验室诊断的研究现状（综述）,梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd基因的克隆、表达及其免疫活性研究,广州市番禹区钩端螺旋体病流行病学特征分析,梅毒螺旋体的巢式PCR检测与基因分型,承德地区莱姆病自然疫源性特征分析,     

SARS病毒基因检测结果与患者病情、病程和体液免疫的关系研究

目的:研究严重急性呼吸综合征患者的病情、病程和特异性抗体产生对SARS病毒基因阳性检出率的影响.方法:采用巢式反转录PCR检测健康人,发烧非SARS患者,不同时期和不同病情SARS患者以及存不存在特异性抗体的SARS患者痰标本中的SARS病毒核酸即RNA.结果:巢式RT-PCR检测SARS患者痰标本中的SARS病毒RNA的敏感度为60.0 %.6 d～10 d组阳性检出率最高,为100 %,高于11 d～25 d组,而11 d～25 d组的阳性检出率又高于＞25 d组(P＜0.01);病情轻组比病情重组的阳性检出率高(P＜0.05);抗体阴性组比抗体阳性组检出率高(P＜0.05).结论:SARS病毒基因检测阳性率在轻病情组比重病情组高,住院时间短组比住院时间长组高,血清特异性抗体阴性组比阳性组高.     

原发性肝癌患者外周血GPC-3mRNA的表达与微转移的关系

目的探讨原发性肝细胞癌（HCC）患者外周血的Glypican-3（GPC-3）mRNA检测用于诊断HCC早期微转移的可行性。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测39例原发性肝细胞癌（HCC）、19例肝炎和肝硬化、10例转移性肝癌、10例肝血管瘤患者、19例健康献血员外周血GPC-3mRNA水平。结果HCC患者外周血中，GPC-3mRNA的检出率为62％（24／39），GPC-3mRNA的检出率与肿瘤直径77％（17／22）、癌结节数目67％（19／24）、临床TNM分期76％（19／25）、门静脉癌栓90％（9／10）、远处转移100％（6／6）等临床参数密切相关。GPC-3mRNA在转移性肝癌、肝炎和肝硬化、肝血管瘤患者及健康献血员外周血中均未检出。结论巢式RT—PCR检测HCC患者外周血单核细胞GPC-3mRNA是一种早期发现原发性肝细胞癌血道播散的可靠而又敏感的实验方法。     

半巢式PCR技术检测牙菌斑唾液及胃黏膜中幽门螺杆菌

本文通过半巢式PCR对 82例慢性胃炎和十二指肠溃疡患者的牙菌斑、唾液及胃黏膜中的幽门螺杆菌 (Hp)进行了检测。 82例患者中活动期十二指肠溃疡患者 2 4例 ,慢性浅表性胃炎 2 7例 ,慢性萎缩性胃炎 31例 ,其中男性 4 2例 ,女性 4 0例 ,平均年龄 4 2 .3岁。半巢式PCR首先以 1对引物扩增出磷酸葡萄糖胺变位酶基因 (phosphogluco saminemu tasegene ,glmM) 75 6bp的片段作为模板 ,再以半巢式引物扩增出 4 96bp的最终产物。引物 0 :5′ CGCGAGCCACAACCCTTTTGAAG 3′ ;引物 1:5′ CGCGCTCACTTGCAAAGCGCACAC 3′;引物 2 :5′…     

巢式PCR检测龈下菌斑中HCMV、EBV、HSV-1与慢性牙周炎活动性的关系

目的　建立临床检测龈下菌斑标本中人巨细胞病毒 (HCMV)、Epstein Barr病毒 (EBV)、单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1 )巢式PCR方法 ,研究这 3种病毒与慢性牙周炎活动性的关系。方法　收集6 2例慢性牙周炎患者 (男性 2 7例、女性 35例 ,平均年龄 5 3岁 )的牙周炎活动部位、牙周炎静止部位的龈下菌斑 ,提取DNA后使用巢式PCR检测HCMV、EBV、HSV 1 ,比较分析其在同一病人不同部位的检出率。结果　牙周炎活动部位的HCMV检出率为 38.7%,EBV的检出率为 5 8%,HSV 1的检出率为30 .6 %,两种以上病毒合并感染的检出率为 4 0 .3%;牙周炎静止部位的HCMV检出率为 1 4 .5 %,EBV为 2 2 .6 %,HSV 1为 1 1 .3%,两种以上病毒合并感染的检出率为 1 1 .3%。这 3种病毒及其合并感染在牙周炎活动部位的检出率均高于牙周炎静止部位 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　提示HC MV、EBV、HSV 1与慢性牙周炎的活动性相关。     

人类睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG3的克隆

目的：克隆人类睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG3。方法：从已获得的小鼠稳睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的表达序列标签片段（BE644537）入手，构建人同源表达序列标签重叠群，应用基因特异性引物和载体特异性引物，在睾丸cDNA文库的DN或进行巢式PCR扩增、测序，对测序结果进行生物信息学分析。结果：从睾丸cDNA文库中分离出人类睾丸凋亡相关基因的5’末端而获得全长cDNA,命名为TSARG3，GenBank登录号为AF419291（保密期为1年），同时应用相同方法克隆了该基因在小鼠中的同源基因，GenBank登录号为AF419292。结论：获得人类睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG3，该基因可能与人类睾丸生精细胞凋亡有关。     

THE POTENTIAL USES OF GENOTYPING OF PLASMODIUMFALCIPARUMISOLATESBYTHENESTEDPOLYMERASECHAINREACTION

巢式ＰＣＲ方法被应用于泰国疟区（Ｂｏｒａｉ）恶性疟原虫的基因分型。应用特异的等位基因引物扩增了恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１（ＭＳＰ１）基因的１、４变异多态区。以凝胶电泳分析扩增的目的基因片段。结果表明：共分别检测出恶性疟原虫６个ＭＡＤ２０等位基因型、４个Ｋ１和１个ＲＯ３３等位基因型。在９个月的流行季节，上述虫株的等位基因频率没有明显的改变，关存在较高程度的恶性疟原虫不同等位基因株的混合感染。本文进一步阐明了巢式ＰＣＲ技术在疟疾流行病学上的应用前景及优点。     

免疫-PCR法检测儿童尿中生长激素水平

目的 :建立超灵敏度的免疫 PCR法检测尿中生长激素的水平。方法 :在经戊二醛处理的PCR管中完成双抗夹心酶免疫反应 ,通过PCR扩增连接在抗原 抗体复合物上的DNA分子 ,琼脂糖电泳及扫描判断结果。结果 :处理后的PCR管完全能够进行免疫反应 ,其灵敏度可达 0 1pg ml左右。琼脂糖电泳及扫描结果表明 ,30例正常青春发育期前儿童与 1 0例经常规生长激素激发试验诊断为生长激素缺乏 (growthhormone deficient,GHD)的儿童 ,1 2h夜尿生长激素 (GH)水平有明显差异。结论 :此法的敏感度比酶标法高 1 0 3 ～ 1 0 4倍 ,适于儿童尿中微量GH水平的检测