胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU的建立及其耐药机制的初步探讨

目的构建耐5-FU的胃癌耐药细胞株,初步探讨细胞发生5-FU耐药的可能机制.方法 通过药物耐药间歇冲击并浓度梯度递增法诱导建立胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU.应用MTT法检测亲代细胞对4种化疗药物的IC50并计算耐药指数(RI).通过MTT法绘制细胞的生长曲线计算细胞倍增时间.流式细胞仪分析细胞周期分布.RT-PCR检测抑癌基因P53、癌基因Bcl-2、促凋亡基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)、死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase,DAPK)家族成员(DAPK-1、DAPK-2、DAPK-3)、多药耐药蛋白(multidrug resistance proteins,MRP)亚家族中的MRP-6、多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)、切除交叉互补修复基因(excision repair cross-complementing 1,ERCC-1)的表达.Western Blot检测MDR1 编码的P糖蛋白(P-gp)的表达水平.结果SGC-7901/5-FU对5-FU、顺铂、环磷酰胺的耐药指数分别为6.26、3.71、5.25.SGC-7901与SGC-7901/5-FU细胞倍增时间分别为(30.82±1.46)h和(46.01±4.15)h,SGC-7901/5-FU细胞增殖速率显著变缓(P＜0.05).与亲代细胞比较,耐药子株S期细胞显著减少,G0/G1期细胞则显著增高(P＜0.01),而G2/M期细胞无显著差异(P＞0.05).耐药子株SGC-7901/5-FU细胞MDR-1、MRP-6、DAPK-3和P-gp表达显著上调(P＜0.01),而ERCC-1、caspase-3、P53、DAPK-1、DAPK-2、Bcl-2的表达均无显著变化(P＞0.05). 结论成功构建胃癌耐5-FU细胞株SGC-7901/5-FU,其对顺铂、环磷酰胺具有交叉耐药,耐药机制与细胞周期S期细胞比例减少、G0/G1期细胞比例升高有关,可能与MDR-1、MRP-6、DAPK-3基因及P-gp蛋白表达上调有关.     

3种消化道重建对胃癌合并2型糖尿病患者血糖及并发症的影响

目的：观察3种不同消化道重建方式对胃癌合并2型糖尿病患者术后血糖的影响及并发症的发生情况。方法：回顾性分析2003年1月至2012年10月本院收治的47例行开腹胃癌根治术的胃癌合并2型糖尿病患者的临床资料;分别记录并比较毕Ⅰ（A组,12例）、毕Ⅱ（B组,20例）、Roux-en-Y 吻合术（C组,15例）3组患者术前、术后1周、术后2周、术后1个月、术后3个月的空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）及餐后2 h血糖（2-hour post-meal blood glucose,2hPG）水平,同时观察患者住院期间术后并发症的发生情况。结果：与术前相比,术后2周、1月、3月与术前FPG比较,差异均有统计学意义（P＜0.001）;术后1周、2周、1月、3月与术前2hPG比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）;3组患者术后3个月糖尿病改善的有效率分别为30.00%、77.78%、84.62%。3组患者术后并发症的发生率分别为41.67%、50.00%、33.33%;总体并发症的发生率为42.55%,其中肺部感染以发生率为19.15%居于首位。结论：毕Ⅱ与Roux-en-Y 吻合术对胃癌合并2 型糖尿病患者的血糖改善作用优于毕Ⅰ吻合术,其中以Roux-en-Y 吻合术疗效最为显著。