来源于骨髓和脐带血的基质细胞基本特性的比较

目的比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性,为基质细胞的选择应用提供依据.方法用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞,以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区(CAFC),长期培养起始细胞(LTC-IC)为指标,比较两者的生长特性、成分及功能.结果①细胞生长特性:出现贴壁细胞时间,骨髓细胞为培养3d,脐带血细胞为培养5～6d;细胞融合成片时间,骨髓细胞为培养10～14d,脐带血细胞为培养12～18d;第21天细胞增殖数,骨髓比脐带血细胞增殖少;②细胞成分:21d培养后细胞成分,骨髓来源者以成纤维细胞为主,其次是巨噬细胞与内皮细胞,脂肪细胞最少;脐带血细胞来源者,以巨噬细胞为主,其次是内皮细胞、成纤维细胞,偶见脂肪细胞;细胞化学与上述结果基本一致;细胞表面抗原检测,CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞;③细胞功能:骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的CAFC和LTC-IC明显多.结论①生长特征:形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短,骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短;②细胞成分特性:骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主,脐带血来源者以巨噬细胞为主;③细胞功能特性:骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于CAFC、LTC-IC生长.     

胎肌条件培养液对白血病细胞的体外效应

以髓系(HL-60)与淋系(Molt-4)细胞为观察对象,用细胞计数、细胞集落培养、台酚蓝拒染及溴化二甲噻唑二苯四唑试验为观察手段,研究胎肌条件培养液(FMCM)对白血病细胞的影响.实验标本分为4组:①对照组.②20%FMCM处理组.③阿糖胞苷(Ara-C,1×10~(-7)M/L)处理组.④混合处理组(经FMCM与Ara-C二者的处理).发现:①FMCM对两个细胞株均无明显的直接作用.②当HL-60细胞经FMCM预处理或在用Ara-C处理同时加入FMCM,Ara-C对其抑制作用可为FMCM加强,已受Ara-C抑制的HL-60细胞则无此现象.③Ara-C对Molt-4的抑制作用不受FMCM的影响.由此而初步认为:①FMCM对白血病细胞似无明显直接作用.②某些(非全部)白血病细胞对Ara-C的敏感性可为FMCM加强.③在己受抑制的细胞中不呈现这种致敏现象.①提示FMCM有可能用于白血病临床治疗.     

胎肌条件培养液对粒细胞活性的效应

胎肌条件培养液对粒细胞活性的效应汪声恒，黄友章胎肌条件培养液（ＦＭＣＭ）主要用在粒单系祖细胞体外培养中提供集落刺激活性，国内也有人试用于临床。我们在体外测试了ＦＭＣＭ对成熟粒细胞的效应，介绍如下。取健康人肝素化血，用淋巴细胞分离液去血浆与单个核细胞，...     

氩氦靶向治疗肺癌的基础研究与临床实践

目的：研究体内，外氩氦靶向治疗对肺癌的灭活作用。方法：观察体外细胞培养，动物实验及肺癌患者经氩氦刀治疗前后病理等方面的变化。结果：氩氦刀在空气及水中有快速降温及升温作用，距刀尖越近，温度变化幅度越大。且在水中能快速形成冰球。氩氦刀对体外培养的肺癌细胞有明显的破坏作用，在人体中也证实能灭活肿瘤细胞，部分小病灶能完全消失。在动物实验中可见，氩氦刀在肝组织中快速形成冰球，但对颈动脉无明显影响，在肺癌患者中也可见对上腔静脉，主动脉等大血管无严重副作用。结论：氩氦刀有快速升，降温作用，体内，外均能灭活肺癌细胞。     

异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病

目的观察异基因造血干细胞移植对儿童血液病的治疗效果。方法采用异基因造血干细胞移植治疗15例儿童血液病,其中非血缘脐血移植9例,同胞脐血移植3例,同胞外周血干细胞移植2例,同胞骨髓移植1例。采用马利兰/环磷酰胺(BU/CY)或环磷酰胺/全身照射(CY/TBI)为基础的预处理的方案。结果14例患儿植入成功,白细胞的植入时间各组间差异无统计学意义;脐血移植血小板的植入时间较骨髓或外周血延迟(P<0.05)。主要并发症为CMV感染和复发,11例患儿生存,其中10例无病存活(占66.7%),存活最长时间为6年。Kaplan-meier生存曲线提示:1年生存率为76.6%,预计5年生存率为57.4%。结论脐血移植具有GVHD轻且较容易控制、搜寻时间短等优点,对儿童患者具有广泛的应用前景。     

经CD34+纯化的自体外周造血干细胞移植治疗小儿皮肌炎1例报告

目的探讨经CD34^＋纯化的自体外周造血干细胞移植治疗小儿皮肌炎的疗效。方法1例3岁皮肌炎患儿接受经CD34^＋纯化的自体外周造血干细胞移植。采用环磷酰胺（CTX）＋粒细胞集落刺激因子（G-CSF）方案动员外周血干细胞后,通过CliniMACS细胞分选仪分选CD34＋细胞,预处理选用CTX、兔抗人T淋巴免疫球蛋白（ATG）和马法兰（MeL）。0天回输CD34^＋细胞数9.45×10^6/kg。观察症状体征变化、造血重建及免疫恢复情况。结果动员获得单核细胞数为1.04×10^7/kg,经纯化获得CD34^＋细胞占94%,CD34^＋细胞回收率达67%,去除3个对数级CD3^＋。＋9d粒系植入,＋14d巨核系植入。＋19d皮损恢复正常,四肢肌力由移植前Ⅱ级或Ⅲ级转为Ⅳ级。＋180d免疫恢复,＋210d肌力恢复Ⅴ级。结论对常规治疗无效的小儿皮肌炎,可选择CD34^＋纯化自体外周造血干细胞移植。     

预激态补骨脂素对白血病原代细胞杀伤作用的研究

目的:体外观察预激态补骨脂素(PAP)对白血病原代细胞的杀伤作用。方法:6例临床确诊为白血病的血标本采用体外细胞培养方法,在白血病原代细胞培养板中加入PAP,使其浓度保持在0.05g/L。短期用药PAP浓度维持24h,7天时终止实验;长期用药PAP浓度维持5天,并分别在第7天、第10天、第14天时终止实验。以细胞总数、台盼蓝拒染率和台盼蓝拒染细胞抑制率等作为检测指标,以配对t检验进行组间比较。结果:短期用药和长期用药均显示PAP对白血病原代细胞具有显著杀伤作用。短期用药(≤7天),作用时间延长对PAP杀伤白血病细胞作用的影响不明确。长期用药结果显示台盼蓝拒染细胞抑制率从32.40%～69.50%升至94.10%～98.90%。难治或耐药与否对PAP杀伤白血病细胞作用无明显影响。结论:PAP对白血病原代细胞具有显著的杀伤作用,有可能成为一广谱抗白血病药物。     

急、慢性髓性白血病细胞低温冻存后诱生的树突状细胞生物特性研究

目的 观察急、慢性髓性白血病原代细胞经低温冻存后诱生的白血病源性树突状细胞的生物特性.方法 取急、慢性髓性白血病原代细胞,一部分细胞立即培养,一部分细胞用5%二甲基亚砜-6%羟乙基淀粉为保护剂,-80℃冰箱降温,液氮保存一定时间后复温培养.培养时细胞内加重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子、白介素-4、肿瘤坏死因子-α等细胞因子,培养12 d,为白血病源性树突状细胞,观察细胞形态及免疫表型、自身混合淋巴细胞反应及细胞毒T淋巴细胞杀伤自身白血病细胞活性.结果 急、慢性髓性白血病新鲜或冻存的原代细胞,经组合细胞因子培养,细胞均不同程度地出现典型的树突状形态,细胞表面CD80、CD54、人白细胞表面抗原DR、CD1a、CD83、CD86表达上调,CD14下调;冻存原代细胞经培养生成的白血病源性树突状细胞,还表现为自体混合淋巴细胞反应和T淋巴细胞杀伤自体白血病细胞活性明显.结论 急、慢性髓性白血病新鲜或经低温冻存的原代细胞可诱生为白血病源性树突状细胞,这种细胞可诱导T淋巴细胞杀伤自身白血病细胞,为用树突状细胞免疫治疗微小残留病提供了实验依据.     

地尔硫(艹卓)对缺氧所致血管内皮细胞线粒体膜电位变化的保护作用

目的 观察地尔硫(艹卓)对人大血管内皮细胞缺氧损伤时线粒体膜电位的影响.方法 将培养的血管内皮细胞分为对照组、单纯缺氧组和加入地尔硫卓后再缺氧组,应用激光共聚焦显微镜扫描,并测定标记的血管内皮细胞每秒钟线粒体膜电位值,观察缺氧前后人大动脉血管内皮细胞线粒体膜电位变化.结果 与对照组相比,单纯缺氧组的线粒体膜电位水平显著降低(P＜0.01);加入地尔硫(艹卓)后再进行缺氧组与单纯缺氧组相比,内皮细胞线粒体膜电位水平有显著升高(P＜0.01),与对照组相比内皮细胞线粒体膜电位水平变化不明显(P＞0.05).结论 缺氧引起血管内皮细胞线粒体膜电位降低;地尔硫(艹卓)可抑制缺氧损伤所致的线粒体膜电位的降低,从而具有稳定线粒体膜电位、保护血管内皮细胞的作用.