胃肠道肿瘤患者外周血Survivin-△EX3 mRNA的表达变化及其意义

目的：探讨胃肠道肿瘤患者外周血Survivin剪接变体△EX3 mRNA的表达对该病的发生及发展和预后的价值。 方法：选52例胃肠道肿瘤患者为观察组,35例健康体检人员为对照组。采用PCR技术对其外周血Survivin-△EX3 mRNA 表达进行检测。 结果：观察组外周血组织中Survivin-△EX3 mRNA相对表达量明显高于对照组[（0.51± 0.289）vs.（0.003±0.003）,P=0.000];低分化者Survivin-△EX3 mRNA 阳性率及Survivin-△EX3 mRNA相对表达指数均高于中高分化者（χ2=12.5759,P=0.0004;U=13.0915,P=0.0000）;I+II期与III+IV期比较,Survivin-△EX3 mRNA 阳性率及Survivin-△EX3 mRNA相对表达指数后者明显比前者升高（χ2=7.0806,P=0.0078;U=13.2359 ,P=0.0000）;淋巴结无转移者与有转移者Survivin-△EX3 mRNA 阳性率及Survivin-△EX3 mRNA相对表达指数比较,后者明显高于前者（χ2=8.7970,P=0.0030;U=13.6479 ,P=0.0000） 结论：Survivin-△EX3 mRNA阳性表达与胃肠道肿瘤具有关;其表达的高低在分化程度、临床病理分期和淋巴结转移方面均有意义。

     

人脂肪干细胞与VEGF-PLGA纳米微球缓释系统构建工程化脂肪组织的相关研究

目的 探讨缓释血管内皮生长因子复合支架与脂肪干细胞构建工程化脂肪的可行性。方法 制备VEGF-PLGA纳米微球缓释支架,检测支架释放 VEGF 浓度,体外提取培养 ADSCs,检测复合支架对 ASC 生长增殖的影响。将复合支架和ADSCs植入裸小鼠背部,8 周后切取植入物称重,组织切片HE染色,评估效果。结果 VEGF-PLGA纳米微球缓释复合支架能连续 12 d释放较高浓度的VEGF,对 ADSCs的生长增殖无影响。动物实验结果显示复合支架与ADSCs共移植能显著提高脂肪组织的形成,增加血管的生成（P＜0.01）,减少组织坏死。结论 VEGF-PLGA纳米微球缓释系统具有良好的生物安全性,其与ADSCs共移植构建工程化脂肪组织具有一定的可行性。     

胰岛素瘤的定位诊断分析

目的:探讨胰岛素瘤较佳的定位诊断方法,提高胰岛素瘤的定位准确率。方法:回顾性分析54例胰岛素瘤病人诊断治疗经过,总结定位诊断经验。结果:胰腺B型超声和普通CT扫描的定位准确率低,多层螺旋CT薄层增强扫描、MRI、动脉造影以及术中B超的准确率相对较高。结论:对于定性诊断为胰岛素瘤的患者,用B超初步检查后可行多层螺旋CT薄层增强扫描或MRI进行定位诊断。对仍不能明确定位者应进行手术探查,术中辅助定位首选B超检查。     

pEGFP-N1-亚麻苦甙水解酶重组真核表达载体的构建及亚麻苦甙水解酶在SGC-7901细胞中的表达

目的:构建携带亚麻苦甙水解酶(lis)基因的重组真核表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,导入SGC-7901细胞中表达。方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该基因全长定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体。用电穿孔法转染体外培养的SGC-7901细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察lis-EGFP融合蛋白在细胞中的表达。用PCR检测lis转录水平的表达,用Western blot法验证lis蛋白水平的表达。结果:酶切和测序证实pEGFP-N1-lis重组质粒构建正确,重组质粒载体在SGC-7901细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有lis和EGFP的双重活性。结论:通过基因克隆方法成功地构建了pEGFP-N1-lis重组质粒载体,并且在SGC-790细胞中稳定表达。     

乳腺癌保留乳头乳晕切除即刻乳房重建术后患者生活质量的评价

目的:观察分析保留乳头乳晕乳腺切除术后即刻假体乳房重建术患者的美容效果和生活质量。方法:回顾性分析陕西省人民医院2015年5月至2016年9月收治并行保留乳头乳晕乳腺切除术后即刻假体乳房重建组（20例）与乳腺切除+前哨淋巴结活检术组（20例）的乳腺癌患者临床病理资料，术后就乳房重建的美容效果及随访1年生活质量等数据进行组间比较。结果:两组的平均年龄、TNM分期及文化程度等资料差异均无统计学意义（P＞0.05）；随访1年两组生活质量通过乳腺癌患者生命质量测定量表评价结果表明，重建组在社会/家庭状况、情感状况、功能状况、附加关注方面的得分均高于对照组，重建组显著优于对照组（P＜0.05）；而在生理状况评分方面无明显差异。结论:保留乳头乳晕乳腺切除术后即刻假体乳房重建术较乳腺切除+前哨淋巴结活检手术具有创伤小、效果良好、外形美观、生活质量高等优势，值得临床推广。     

siRNA干扰ADAR1表达对小鼠混合淋巴细胞培养的影响

目的:研究靶向ADAR1基因的siRNA在小鼠双向混合淋巴细胞培养中所扮演的角色. 方法:将化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA在Lipofectamine 2000介导下转染处于双向混合淋巴细胞培养试验中的小鼠淋巴细胞,观察转染组与未转染组细胞表型的变化;通过RT-PCR检测两组细胞中ADAR1 mRNA的变化;细胞计数和台盼蓝拒染法检测靶向ADAR1基因的siRNA对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价转染化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA后对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用. 结果: 在经典淋巴细胞混合培养试验中,转染靶向ADAR1基因的siRNA可以明显降低小鼠淋巴细胞内ADAR1的表达,同时ADAR1-siRNA对小鼠淋巴细胞的增殖有抑制作用. 结论:在经典淋巴细胞混合培养试验中,化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA能有效抑制ADAR1基因在小鼠淋巴细胞中的表达,并对小鼠淋巴细胞增殖有抑制作用.     

MHCC97中边缘群细胞的成瘤性及其侵袭性观察

目的:分离肝癌细胞系MHCC97中边缘群细胞并观察其成瘤性和侵袭性.方法:利用流式细胞荧光激活分选法将肝癌细胞系MHCC97分成边缘群(SP)和主群(MP)细胞两个亚群. 对两个亚群细胞分别采用软琼脂克隆形成实验和裸鼠成瘤试验观察其体内外成瘤能力;Transwell小室法检测两个亚群细胞的体外侵袭力.结果:SP细胞的体外克隆形成率为57%,MP细胞仅为13%;1×103个SP细胞可在4 wk后形成明显的皮下移植瘤(2/8),MP细胞则需1×105个才能成瘤(2/8). Transwell侵袭试验结果显示,SP表型细胞穿过人工基底膜的细胞数为(66.6±4.0)个,MP表型细胞仅为(18.2±1.9)个.结论:肝癌细胞系MHCC97中SP亚群的成瘤性和侵袭性均强于MP亚群细胞,表明SP表型的细胞在肝细胞癌的生长、转移中具有重要的地位.     

pEGFP-N1-linamarase重组真核表达载体的构建及linamarase在MH-CC97中的表达

目的:构建携带木薯亚麻苦甙水解酶(lis)基因,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体,并导人人肝癌细胞MHCCW中表达.方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该全长基因定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体.利用电穿孔转染体外培养的MHCC97,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察lis-EGFP融合蛋白在细胞中的表达;PCR检测lis基因转录水平的表达;Western Blot方法验证lis蛋白水平的表达.结果:PCR扩增片段与预期结果相符,酶切和测序证明pEGFP-N1-lis真核表达载体构建成功.pEGFP-N1-lis转染MHCC97细胞后,Western Blot可以检测到lis蛋白在MHCC97细胞表达,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达.结论:成功构建真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1-lis,可为后续lis基因功能的研究奠定实验基础.     

siRNA抑制ADAR1的表达对混合培养的小鼠淋巴细胞周期和凋亡的影响

目的:探讨RNA编辑酶ADAR1的表达受抑制后,小鼠淋巴细胞的细胞周期和细胞凋亡的变化.方法:用电转法将ADAR1特异性siRNA转入到处于混合培养的小鼠淋巴细胞中,培养48 h,RT-PCR检测转染效率;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化;RT-PCR检验周期蛋白D1(cyclin D1)基因和周期蛋白A1(cyclin A1)基因表达量的变化.结果:转染ADAR1特异性siRNA 48 h后,小鼠淋巴细胞GO/G1期细胞量增加,S期细胞量减少,G2/M细胞量保持恒定.另外,cyclinD1基因的表达量降低而cyclin A1基因表达保持恒定.结论:处于经典混合培养体系下的小鼠淋巴细胞,在其RNA编辑酶ADAR1受到特异siRNA抑制后,小鼠淋巴细胞的周期受到明显抑制,细胞凋亡增加.     

参芪扶正注射液对三阴性乳腺癌新辅助化疗的增效减毒效果

目的 观察参芪扶正注射液对三阴性乳腺癌(TNBC)新辅助化疗的增效减毒效果。方法 收集陕西省镇安县中医医院和陕西省人民医院88例TNBC患者,按随机数字表法分成对照组及参芪扶正组,每组44例,对照组给予TAC(紫杉类+蒽环类+环磷酰胺)方案治疗,参芪扶正组在此基础上联合参芪扶正注射液治疗,治疗后比较临床疗效,免疫功能指标[自然杀伤(NK)细胞、CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺]、炎症因子指标[白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及不良反应发生情况。结果 参芪扶正组治疗后临床受益率均高于对照组(χ²=4.470,P=0.034);治疗后,参芪扶正组NK细胞、CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均高于对照组(P<0.05);参芪扶正组血清IL-6、IL-8低于对照组,TNF-α高于对照组(P<0.05);参芪扶正组不良发生率低于对照组(P&l...