人肝癌原发性耐药细胞亚系的建立及耐药机制的初步探讨

目的从人肝癌细胞系HeFG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制.方法采用阿霉素(adriamycin,ADM)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性,流式细胞术分析细胞周期和检测耐药蛋白的表达.结果随冲击次数的增加,筛选出细胞的耐药指数(resistance index, RI)逐渐升高,筛选3次后对ADM的RI可达30.5;其形态学特点、生长特性及细胞周期分布与亲本细胞有明显差异,同时发现耐药蛋白P-gp、MRPt LRP表达增强.结论肝癌细胞系HepG2是个非均质的群体,其中存在着原发性耐药细胞株.     

低频超声逆转人肝癌细胞多药耐药的实验研究

多药耐药(multidurg resistance，MDR)是导致肿瘤化疗失败的重要原因，超声波具有方向性好，可聚焦的特点，能非特异性地提高细胞膜的通透性，促进一系列物质进入细胞内，是一种理想的耐药逆转工具。为此，我们以人肝癌耐阿霉素(ADM)的多药耐药细胞亚系HepG2／ADM为研究对象，观察低频超声对其耐药特性的逆转，并探讨其可能的作用机制。     

前列地尔联合复方鳖甲软肝片治疗慢性乙型肝炎肝硬化的疗效观察

目的探讨复方鳖甲软肝片联合前列地尔治疗慢性乙型肝炎肝硬化的临床疗效。方法选取2013年4月—2016年6月在雅安市人民医院接受治疗的126例慢性乙型肝炎肝硬化患者作为研究对象,随机分为对照组和治疗组,两组各63例。对照组患者口服复方鳖甲软肝片,4片/次,3次/d;治疗组患者在对照组的基础上静脉注射前列地尔注射液,5μg加入到10mL生理盐水中,1次/d。两组患者均治疗6周。观察两组的乙肝病毒的脱氧核糖核酸(HBV-DNA)转阴率、乙肝E抗原(HBeAg)转阴率及HBeAg转换率,比较治疗前后两组患者的Child-Pugh评分、肝功能指标以及肝纤维化指标的变化。结果治疗组的HBV-DNA转阴率、HBeAg转阴率和HBeAg转换率分别为77.8%、54.0%、44.4%,均显著高于对照组的55.6%、30.2%、27.0%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05);两组患者的Child-Pugh评分均降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组的Child-Pugh评分明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TBIL)显著降低,凝血酶原活动度(PTA)升高,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组的肝功能指标明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者的透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、IV型胶原(Ⅳ-C)、层黏连蛋白(LN)均显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组的肝纤维化指标明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论复方鳖甲软肝片联合前列地尔治疗慢性乙型肝炎肝硬化疗效显著,可有效改善肝功能和肝纤维化,具有一定的临床推广应用价值。     

胰腺癌患者血清CEMIP、CA19-9和CA242水平变化及其临床意义*

目的 研究胰腺癌患者血清CEMIP、CA19-9和CA242水平变化及其临床意义。方法 2013年4月～2016年8月我院诊治的92例胰腺癌患者、105例胰腺良性疾病患者和选择的83例健康人，采用ELISA法检测血清细胞迁移诱导透明质酸结合蛋白（CEMIP）水平，采用放射免疫法检测血清CA19-9和CA242水平。应用受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）评价各指标的诊断效能。采用Kaplan-Meier和Cox风险比例模型行生存分析。采用Logistic回归分析影响术后生存的因素。结果 胰腺癌患者血清CEMIP、CA19-9和CA242水平分别为0.7（0.4，1.0） ng/mL、180.1（89.1，230.3） U/mL和61.7（20.7，93.5）U/mL，均显著高于胰腺良性疾病患者和健康人，差异有统计学意义（P均<0.05）；应用血清CEMIP、CA19-9和CA242联合诊断胰腺癌的AUC为0.966，其诊断效能显著高于任一指标单独诊断；应用血清CEMIP、CA19-9和CA242水平预测胰腺癌患者根治术后1年生存的效能均较高；经Kaplan-Meier和Cox多因素分析，结果表明肿瘤分化程度、血管侵犯、术后化疗、血清CEMIP≥0.7 ng/mL、CA19-9≥90.3 U/mL和CA242≥32.8 U/mL均是影响胰腺癌患者根治术后生存的独立危险因素。结论 检测胰腺癌患者血清CEMIP、CA19-9和CA242水平可有助于对疾病的诊断和预后评估。     

表观遗传学在肿瘤诊治中的应用

DNA甲基化和组蛋白修饰、染色质重塑等是表现遗传修饰的主要方式，这种表现遗传修饰对于肿瘤的发生、诊断和治疗等方面具有重大意义。     

低频脉冲超声对肿瘤细胞内化疗药物浓度影响的体外实验研究

目的：观察低频脉冲式超声波对肿瘤细胞内化疗药物浓度的影响并探讨其作用机制。方法：将肝癌细胞株HepG2与临床常用化疗药蒽环类抗生素阿霉素(adriamycin，ADM)共孵育，用不同条件的低频脉冲超声波处理，选不同时间点用流式细胞仪检测细胞内ADM荧光强度，荧光分光光度计测量细胞膜流动性。结果：低频脉冲超声波能显著提高肿瘤细胞HepG2内ADM浓度，且这种效应有明显的频率赖性，以0．8MHz的频率最为理想，细胞内ADM荧光强度最大可达145．12，细胞膜荧光偏振度值由原来的0．1985降至0．1624，改善细胞膜流动性。另外，细胞内药物浓度与细胞膜流动性呈正相关，提示超声波促进药物进入细胞内的作用是通过提高细胞膜的流动性来实现的。结论：低频脉冲超声可促进化疗药物进入肿瘤细胞内，这种效应有明显的频率敏感性，其机制与超声提高细胞膜的流动性有关。     

肿瘤细胞多药耐药化学逆转剂研究进展

用MDR的逆转是肿瘤治疗过程中的关键.用化学药物阻断耐药机制,如针对各种耐药蛋白和PKC的逆转剂;反义核酸技术阻断耐药途径,如反叉核酸、核酶及小RNA等;细胞因子拮抗耐药过程;物理逆转措施如微波、超声波等等.利用化学逆转剂对肿瘤细胞的耐药的分析.     

血液透析膜生物相容性及在重症胰腺炎中的应用

BACKGROUND: Continuous blood purification can remove cytokines and inflammatory mediators, maintain homeostasis and prevent the occurrence of multiple organ dysfunction syndrome in patients with severe pancreatitis, which has become the main therapy for severe pancreatitis. Since the hemodialysis technology began to be applied clinically, the biological and physicochemical properties of hemodialysis membrane materials have been studied. A variety of hemodialysis membranes have been developed in order to improve the biocompatibility and anticoagulant effect in vitro. OBJECTIVE: To investigate the application effect of hemodialysis membranes on severe pancreatitis. METHODS: Ten Wistar rats were selected to make rat models of severe pancreatitis and then were randomized into two groups (n=5 per group): homophone membrane group and polysulfone membrane group. Hemodialysis- related biochemical parameters were detected in the two groups. RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the homophone membrane, ultrafiltration coefficient, creatinine clearance, blood urea nitrogen clearance, phosphorus clearance, number of circulating endothelial cells, and levels of plasma nitric oxide and asymmetric dimethylarginine were significantly lower in the polysulfone membrane group (P < 0.05). Vitamin B12 clearance and amount of pre-congestion increased significantly in the polysulfone membrane group as compared with the homophone membrane (P < 0.05). These findings indicate that the polysulfone membrane for hemodialysis has good biocompatibility, and keeps a stable environment in vivo for severe pancreatitis patients.  中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

木疏胶囊抗大鼠肝纤维化机制研究

目的通过观察木疏胶囊对肝纤维化大鼠纤维化相关基因表达的影响,探讨木疏胶囊抗肝纤维化分子水平的作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,木疏胶囊预防组和治疗组,鳖甲软肝片预防组和治疗组。40%CCl4油溶液诱导大鼠肝纤维化模型。HE染色和Masson染色观察肝组织病理改变。RT-PCR法检测各组TGF-β1,α-SMA,col-Ⅰ,col-Ⅲ基因表达。结果 40%CCl4皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,病理观察证实造模成功。与模型对照组比较,各用药组各指标PCR产物均显著降低（P〈0.01）,木疏胶囊预防组分别与鳖甲软肝片预防组和治疗组比较显示TGF-β,α-SMA,col-Ⅰ,col-Ⅲ基因表达的降低均有统计学差异（P〈0.01）,木疏胶囊治疗组分别与鳖甲软肝片预防组和治疗组比较,TGF-β,α-SMA,col-Ⅰ,col-Ⅲ基因表达的降低均有统计学差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论木疏胶囊预防和治疗用药均可使肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ基因表达下降。     

愈肝颗粒治疗慢性乙型肝炎基本核心区启动子变异患者的疗效观察

目的：观察中药制剂愈肝颗粒治疗慢性乙型肝炎（CHB）基本核心区启动子（BCP）变异患者的疗效。方法：用微孔板杂交法和酶联免疫吸附试验联合检测乙型肝炎病毒（HVB）BCP变异，变异阳性组（简称P组，46例）和变异阴性组（简称N组，69例）。所有患者均给予愈肝颗粒治疗，观察患才治疗前后临床表现及实验室有关指标。结果：治疗结束后，两组患者症状积分显著减低，血清ALT、TBiL水平明显下降。P组HBeAg阴转率（60％）显著高于N组（30％，P＜0．05），而HBV－DNA阴转两组比较差异无显著性，两组综合疗效相似。结论：愈肝颗粒能够显著改善CHB患者的症状，降低血清ALT和TBiL水平，同时具有抗HVB作用，且对于BCP变异株感染与野生株感染同等有效。