Nestin在CDA-2诱导人胶质瘤细胞分化中的变化

目的： 研究nestin（巢蛋白）在人尿萃取物细胞分化剂CDA-2（又名尿多酸肽）诱导SWO-38人胶质瘤细胞分化中表达的变化及其意义。方法: 采用光镜观察和鉴定CDA-2对SWO-38细胞的分化作用;RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blotting分析CDA-2诱导前后SWO-38细胞nestin表达的变化。 结果: 光镜观察发现经CDA-2诱导后SWO-38细胞胞体变大、核浆比减小、突起增多,表现出向成熟的星形细胞分化的现象;Nestin表达在细胞浆,呈丝状着色;Nestin在CDA-2诱导SWO-38细胞分化中表达下调。结论: Nestin在CDA-2诱导SWO-38细胞分化中表达下调,进一步验证nestin与细胞分化的关系,nestin有可能成为胶质瘤诱导分化治疗领域新的标志物。     

华蟾素联合沙利度胺、全反式维甲酸治疗低/中危-1老年人骨髓增生异常综合征疗效观察

目的探讨华蟾素联合沙利度胺、全反式维甲酸治疗低危/中危-1老年人骨髓增生异常综合征的可行性及安全性。方法将38例确诊的低危/中危-1老年人骨髓增生异常综合征患者随机分为2组,对照组19例给予沙利度胺及全反式维甲酸治疗,治疗组19例在对照组治疗基础上给予华蟾素注射液治疗。治疗6个月后评估2组临床疗效,比较2组治疗有效者治疗前及治疗6个月后血红蛋白(Hb)、中性粒细胞绝对值(ANC)、血小板计数(Plt)差异,统计2组输血情况、不良反应发生情况及随访6~36个月患者转归情况。结果治疗组总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后2组Hb、ANC、Plt均明显升高(P均<0.05),且治疗组各指标均明显高于对照组(P均<0.05);治疗组依赖输血患者输血间隔延长率显著高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05);随访6~36个月,治疗组3例CR患者维持4~6个月,4例PR患者维持3~15个月;对照组2例PR患者维持2~8个月。结论华蟾素注射液联合沙利度胺及全反式维甲酸可明显改善低危/中危-1老年人骨髓增生异常综合征患者的血液指标,提高治疗有效率,且不良反应轻。     

射波刀联合养阴解毒化瘀方治疗原发性肝癌临床观察

目的：观察射波刀（CK）联合养阴解毒化瘀方治疗肝癌的临床疗效和安全性。方法：将90例不适宜或拒绝接受外科手术切除的肝癌患者随机分为CK治疗组和CK+养阴方治疗组,各45例。CK治疗组单纯接受CK放疗,CK+养阴方治疗组则在CK放疗的基础上联合养阴解毒化瘀方口服治疗。两组均在CK放疗结束后3个月复查肝脏增强CT或增强MRI以评价疗效,并对不良反应进行评价。结果：在近期疗效方面,CK+养阴方治疗组患者完全缓解（CR）6例,部分缓解（PR）22例,稳定（SD）14例,进展（PD）3例,客观缓解率（ORR）为62.2%。CK治疗组CR 4例,PR 18例,SD 18例,PD 5例,ORR为48.9%,两组患者的近期疗效比较差异无统计学意义（P>0.05）。在不良反应方面,CK+养阴方治疗组血细胞减少、碱性磷酸酶（ALP）升高、乏力和恶心的发生率显著低于CK治疗组（P<0.05）。CK+养阴方治疗组中有9例（20%）患者在治疗后发生了Child-Pugh分级的增加,而CK治疗组则有19例（42.2%）,差异有统计学意义（P<0.05）。CK+养阴方治疗组中有13例（28.9%）...     

莱菔硫烷经由miR-124抑制胶质瘤干细胞的增殖

摘要：目的 研究莱菔硫烷对SWO-38胶质瘤干细胞增殖的影响及其机制。方法 细胞增殖实验检测莱菔硫烷对SWO-38细胞增殖的影响;克隆形成实验、肿瘤球形成实验、蛋白印迹法等检测并比较莱菔硫烷处理前后SWO-38细胞克隆形成能力、肿瘤球形成能力及干性相关基因（如β-catenin、Oct4、Sox-2、c-Myc）表达水平等改变,比较莱菔硫烷和（或）miR-124抑制物处理对干性相关基因表达水平的影响。实时荧光定量PCR检测莱菔硫烷对miRNA-9、21、221、124、128、181等转录水平的影响。结果 莱菔硫烷有效抑制SWO-38细胞增殖,其半数抑制浓度为（26.41±2.13）μmol/L。莱菔硫烷呈现剂量依赖性地削弱SWO-38细胞克隆和肿瘤球形成的能力。莱菔硫烷下调β-catenin、Oct4、Sox-2和c-Myc等干性相关基因的表达。同时,莱菔硫烷还影响miR-9、21、221、124、128、181等miRNA的转录水平, 其中miR-124转录水平增高约5.9倍,miR-128增高约2.6倍。miR-124抑制物组β-catenin、Oct4、Sox-2等基因表达较空白对照组显著增高,而miR-124抑制物与莱菔硫烷联合组上述基因表达水平高于空白对照组,但低于miR-124抑制物组。结论 莱菔硫烷有效抑制SWO-38胶质瘤干细胞的增殖,其机制可能与miR-124/ (β-catenin/ Sox-2/Oct4)通路有关。     

莱菔硫烷抑制肺癌干细胞增殖的体外实验

目的 研究莱菔硫烷（sulforaphane, SFN）对肺癌干细胞增殖的影响及其机制。方法 采用MTT法分析SFN对H460细胞增殖的影响;应用流式细胞术（FACS）检测SFN对细胞凋亡和侧群细胞比例的影响;肿瘤球培养法分析SFN对肿瘤球生长的影响;使用shRNA慢病毒载体构建β-catenin低表达细胞株,并应用蛋白电泳法检测在β-catenin正常或低表达情况下莱菔硫烷对β-catenin、Oct4、Sox2、c-Myc、Nanog等基因表达的影响。结果 SFN有效抑制H460细胞增殖,IC50为11.2 μmol/L。SFN处理72 h后,细胞凋亡呈剂量依赖性增高。SFN有效抑制原代肿瘤球和2代肿瘤球的生长,在较低浓度（1.0 μmol/L）下即有明显的抑制作用。FACS检测提示侧群细胞比例随SFN浓度增高而减少。SFN浓度依赖性地抑制β-catenin、Oct4、Sox2、c-Myc和Nanog等蛋白表达。在低表达β-catenin情况下,Oct4、Sox2、c-Myc、Nanog等基因表达水平与SFN浓度相关。结论 SFN通过β-catenin和干性相关基因（Sox2、c-Myc、Nanog和Oct4）特异地抑制肺癌干细胞的增殖。     

射波刀治疗腹膜后淋巴结转移癌81例

目的 探讨射波刀治疗腹膜后淋巴结转移癌的疗效和不良反应。 方法 81例恶性肿瘤术后出现腹膜后淋巴结转移的患者,其中 33例伴腹痛或腰背部疼痛,7例伴一侧肾积水、输尿管扩张,8例伴单侧或双侧下肢肿胀。采用射波刀立体定向精确放疗,DT33~45 Gy分 3~6次,观察患者症状的改善情况、肿瘤客观反应率和放射不良反应。 结果 所有患者治疗后4周,疼痛、下肢肿胀症状完全缓解,肾积水完全消失;每隔 2~3个月行增强CT或MRI复查1次,随访至6个月时,完全缓解率为 77%(62/81),部分缓解率为21%(17/81),稳定率为3%(2/81),无进展病例,有效率98%。不良反应主要为肠道损伤,1级16%(13/81),2级9%(7/81)。多因素分析显示肿瘤完全缓解率与原发肿瘤类型、肿瘤大小无关(P>0.05),而与肿瘤和肠管间距离>0.5 cm、肿瘤生物等效剂量(α/β=10)>70 Gy相关(P<0.01);不良反应发生率与肿瘤最大径>5 cm、肿瘤与肠管间距离<0.5 cm相关(P<0.01)。 结论 射波刀治疗恶性肿瘤术后腹膜后淋巴结转移疗效显著,不良反应轻微。     

肿瘤囊泡包装的甲氨蝶呤对肺癌A549细胞放疗增敏作用的体外研究

目的 探讨肿瘤囊泡(tumor cell-derived microparticles,T-MP)包装的甲氨蝶呤(MTX)对非小细胞肺癌A549放疗增敏作用及其机制.方法 MTT法检测T-MP MTX对A549细胞增殖的影响;应用流式细胞术、划痕法、West-ern blot等方法检测T-MP MTX联合放疗对A549细胞凋亡、迁移能力以及MMP-2、Nanog、Sox-2等蛋白表达变化.结果 MTT法检测提示T-MP MTX浓度依赖性地抑制A549细胞增殖,并且在较低浓度下即发挥抑癌作用.T-MP MTX对支气管上皮细胞株16HBE细胞增殖的影响较弱,在较高浓度可轻度地抑制细胞增殖.细胞凋亡检测发现T-MP MTX联合放疗扩大A549细胞凋亡,其作用与放疗剂量有关(P<0.05).划痕实验提示T-MP MTX联合放疗有效抑制A549细胞迁移能力,其作用与放疗剂量有关(P<0.05);Western blot检测表明T-MP MTX联合放疗显著下调A549细胞MMP-2、Nanog和Sox-2蛋白表达水平,此作用与放疗剂量有关(P<0.05).结论 T-MP MTX联合放疗特异地抑制A549细胞增殖、迁移,诱导细胞凋亡,提高放疗敏感性,其机制可能与T-MP MTX诱导细胞周期同步化,以及干扰肿瘤干细胞低代谢状态有关.     

外源性hCG对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察外源性hCG对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响,探讨hCG在子宫内膜癌治疗中的意义.方法 建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,用hCG对裸鼠进行皮下注射,计算成瘤率,称量瘤体质量;并对瘤组织进行HE染色,观察肿瘤瘤组织形态及测量坏死面积;Masson染色观察瘤组织纤维化;免疫组织化学染色观察瘤组织Ki-67表达.结果 两组裸鼠成瘤率均为100%(10/10);与对照组相比,hCG处理组裸鼠移植瘤瘤质量有增高趋势;HE染色可见hCG处理组子宫内膜癌细胞呈腺腔样排列,瘤组织内坏死面积较少而范围较小;Masson染色见hCG处理组胶原纤维粗大而致密,而NS组胶原纤维较纤细而稀疏;Ki-67在两组表达无明显差别.结论 外源性hCG在裸鼠体内实验可促进子宫内膜癌细胞的分化.     

P16，CDK4及eyelin D1在粤东地区食管癌中的表达及意义

目的研究抑癌基因蛋白P16与细胞周期调控蛋白CDK4，cyelin D1在粤东地区食管癌高发地区患者的表达情况，寻找对临床诊治有价值的食管癌分子指标。方法利用免疫组化SP法对粤东地区10例正常食管黏膜和45例食管癌标本进行P16，CDK4及eyelin D1蛋白的检测。结果P16，CDK4及eyclin D1在10例食管正常黏膜中均有低水平散在表达，而在45例食管癌中，P16表达总阳性率为60．0％（27／45），CDK4表达总阳性率为64．4％（29／45），cyelin D1表达总阳性率为55．5％（25／45），P16和CDK4在中、低分化食管癌组间的表达率差异有显著性（P=0．031，P=0．030），P16和CDK4表达呈负相关（P=0，005）；P16，CDK4及cyelin D1表达与肿瘤浸润范围、淋巴结转移无显著相关性。结论P16在食管癌中呈现独特性的高水平表达，P16和CDK4表达与肿瘤分化程度相关，并且提示P16和CDK4间存在负反馈调控通路。P16和CDK4可以作为粤东地区食管癌的有效分子标志物，在食管癌早期筛选和临床诊治中有重要价值。