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1.
目的 探索大容量诱导慢性髓性白血病 (CML)细胞来源的树突状细胞 (DCs)的适宜方法 ;研究CML DCs刺激自体T淋巴细胞增殖并分泌γ 干扰素 (IFN γ)的能力。方法 用CS 30 0 0 plus血细胞分离机采集初诊CML病人的外周血单个核细胞 (PBMNCs) ;单采的CML PBMNCS转入组织培养袋 ,加入重组人粒 巨细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)和重组人白介素 4 (rhIL 4 ) ,培养诱导 7d ;在诱导前后 ,用流式细胞仪分别检测细胞表面HLA DR、CD1a、CD80和CD86的表达水平 ;用3 H TdR掺入法检测CML DCs和CML PBMNCs刺激自体和异体T细胞增殖的能力 ;用ELISA法检测在自体混合淋巴细胞培养 (MLR)时T细胞分泌的IFN γ浓度。结果 用血细胞分离机收集的CML PBMNCs ,在组织培养袋内经细胞因子培养诱导 ,HLA DR、CD1a、CD80、CD86的表达均有明显上调 ,细胞形态也表现典型的DC特征 ;CML DCs能显著刺激自体和异体T细胞增殖 ,而CML PBM NCs仅能刺激异体T细胞的增殖 ,刺激自体T细胞增殖的能力很弱 ;刺激自体T细胞增殖时分泌的IFN γ浓度 ,CML DCs组为 (877± 2 14 )pg/mL ;CML BPMNCs组仅为 (14± 1.7) pg/mL。 结论 单采的CML PBMNCs转入组织培养袋 ,加入rhGM CSF和rhIL 4 ,可收获大容量的CML DCs;CML DCs在体外具有显著刺激自体T细胞增殖 相似文献
2.
白血病和骨髓增生异常综合征患者红细胞酶及同工酶谱的改变 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:调查白血病和骨髓增生异常综合征(MDS)患者红细胞酶和同工酶谱改变的患病率,并研究其临床意义。方法:采用ICSH介绍的方法及PAGE电泳测定红细胞酶活性及PK和ADA同工酶,采用FPLC系统纯化ADA同工酶,分析酶蛋白的生化性质。结果:患病率:在229例白血病和MDS患者中,G6PD缺乏为43.1%,PK缺乏为27.8%。MDS患者中的酶缺乏患病率:PK缺乏为50.0%,G6PD缺乏为48.0%,PNP缺乏为39.1%;酶过多患病率:ADA过多为69.6%,ENOL过多为40.0%,ALD过多为30.4%。慢性粒细胞白血病(CML)的PK活性增高,而PK同工酶型均正常。急性白血病患者采用抗肿瘤抗生素后G6PD和6PGD活性减低(P<0.05)。MDS红细胞酶缺陷显著多于ADA2同工酶表达见于AML(M4和M5)的单个核细胞及慢性粒-单核细胞白血病(CMML)的红细胞,但ALL不表达(P<0.001)。ADA同工酶纯化分析示正常结构。结论:红细胞酶的检测可作为CML的预后参数,作为急性白血病抗肿瘤药物耐药预示指标,有助于MDS-RA和再障、CML与CMML的鉴别诊断。 相似文献
3.
非血缘异基因外周血造血干细胞移植治疗急性粒细胞白血病一例 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:开展非血缘关系供者外周血造血干细胞移植(PBSCT)对血液恶性肿瘤进行根治性治疗,并观察其长期造血重建和移植物抗宿主病(GVHD)及一些移植并发症。方法:选择HLA相配非血缘关系的26岁男性健康供者的外周血干细胞移植给1例急性粒细胞白血病第1次复发缓解后的11岁男性患儿。预处理方案为分次全身60Co照射(8Gy)加环磷酰胺(120mg/kg)和足叶乙甙(30mg/kg)。移植物抗宿主病预防用环孢霉素A(CsA)联合氨甲喋呤(MTX)。移植单个核细胞为8.3×108/kg,CD34+细胞为1.079×108/kg,CFU-GM为1.09×106/kg。结果:+10天中性粒细胞达1.30×109/L,+18天骨髓显示造血重建,+23天DNAD1S80显示移植物植入成功,+120天受者血型由AB型转为供者血型A型。+11天出现Ⅰ度急性GVHD,+143天出现慢性GVHD,分别用甲基泼尼龙和泼尼松控制。随访300余天,患者情况正常。结论:非血缘PBSCT可以维持长期造血 相似文献
4.
5.
在造血干细胞移植(HSCT)中,供者T淋巴细胞所拥有的强大的免疫作用已越来越为人所熟知。它虽然具有诱导移植物抗白血病效应的作用,但同时其介导的移植物抗宿主病(GVHD)严重制约了HSCT的成功。非宿主抗原特异性记忆T细胞是个例外,这种记忆T细胞能够在避免GVHD的同时诱导移植物抗白血病效应的产生,识别和攻击宿主白血病细胞以达到降低GVHD发生率和移植后白血病复发率之目的,对于HSCT的预后有着积极的影响。 相似文献
6.
慢性粒细胞白血病患者红细胞丙酮酸激酶活性的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
慢性粒细胞白血病患者红细胞丙酮酸激酶活性的变化谢彦晖林果为阮林海黄一微白血病患者可存在多种红细胞酶异常,这些酶谱变化反映白血病血细胞的代谢特征。我们研究了慢性粒细胞白血病(CML)酶谱变化,现将红细胞丙酮酸激酶(PK)的活性变化报告如下。材料和方法1... 相似文献
7.
六亚甲基二乙酰胺对急性白血病细胞株HL-60和U937分化、凋亡的影响及其机制 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 研究六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)体外诱导HL 6 0和U937细胞分化、凋亡的作用及其机制。方法 流式细胞仪检测细胞分化抗原CD1 1b、CD1 4,细胞凋亡标记Annexin Ⅴ以及进行细胞周期分布和细胞内cyclinD、cyclinE、p2 7抗原的分析 ,RT PCR检测c myc、Rb、Bcl 2基因mRNA的表达。结果 HL 6 0、U937细胞经HMBA处理 72h后CD1 1b表达显著增高 ,高剂量HMBA促使Annexin Ⅴ表达增加。HMBA阻滞HL 6 0、U937细胞于G0 G1 期 ,并使该两种细胞内cyclinE表达显著下降 ,cyclinD、p2 7表达显著增高 ,呈剂量依赖关系 ;HMBA可使HL 6 0、U937细胞c myc、Bcl 2mRNA表达下调 ,而RbmRNA在HL 6 0细胞表达上调 ,在U937细胞则无显著改变。结论 HMBA能诱导HL 6 0、U937细胞出现明显的分化 ,高剂量的HMBA有促使HL 6 0、U937细胞凋亡的倾向 ,其机制可能是通过影响细胞周期调控分子以及有关的增殖分化相关基因的表达 ,从而抑制细胞增殖 ,促进细胞分化。 相似文献
8.
目的 探讨原发性免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)患者CD5+B细胞对CD4+T细胞分泌Th1/Th2型细胞因子的调节作用及其在大剂量地塞米松(high dose dexamethasone,HD-DXM)治疗后的变化。方法 采集5例初发原发性ITP患者HD-DXM治疗前后外周静脉血各20 mL及5例健康对照者外周静脉血20 mL,Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),进一步以免疫磁珠法分选CD5+B细胞、CD5-B细胞和CD4+T细胞。CD5+B细胞或CD5-B细胞与CD4+T细胞按1:9、1:5、1:3、1:1、3:1的梯度比例混合培养72 h或144 h。ELISA方法检测细胞培养上清液中IFN-γ(代表Th1型细胞因子)和IL-4(代表Th2型细胞因子)水平。结果 共培养72 h后,健康对照者CD5+B细胞与CD4+T细胞比例在1:3时,细胞培养上清液IFN-γ浓度与T细胞单独培养时相比明显下降[(2 427.99±632.62)pg/mL vs.(1 109.25±338.10)pg/mL,P=0.001 2)];而ITP患者CD5+B细胞与CD4+T细胞比例在3:1时才对IFN-γ的分泌有显著抑制[(3 060.02±493.98)pg/mL vs.(1 769.45±634.73)pg/mL,P=0.000 3]。共培养144 h后得到相似的结果。HD-DXM治疗有效的ITP患者CD5+B细胞与CD4+T细胞比例在1:1时共培养72 h后,对IFN-γ的分泌有明显抑制[(3 600.02±838.00)pg/mL vs.(1 157.97±383.20)pg/mL,P<0.000 1]。健康对照者及ITP患者CD5+B细胞对CD4+T细胞分泌IL-4均无明显影响。结论 原发性ITP患者CD5+B细胞抑制CD4+T细胞分泌Th1型细胞因子IFN-γ的能力明显受损,经HD-DXM治疗后CD5+B细胞抑制IFN-γ分泌的能力可部分恢复。 相似文献
9.
目的 建立非清髓性骨髓移植的小鼠动物模型 ,探讨非清髓预处理条件下能否实现异基因造血细胞的植活 ,探讨输入的异基因造血细胞数量和移植植活的关系。方法 以雌性C5 7BL/ 6小鼠为异基因骨髓移植的受者 ,雄性BALB/c小鼠为异基因骨髓移植的供者 ,采用非致死剂量的环磷酰胺腹腔注射 (2 0 0mg/kg)加γ射线全身照射(5Gy)为非清髓性预处理方案 ,将移植受鼠分为A、B、C 3组 ,每组 10只 ,分别给予 2× 10 7、8× 10 6和 2× 10 6个供鼠骨髓细胞 ,移植后第 36天用聚合酶链式反应检测受鼠骨髓细胞内Y染色体特异性基因检测移植物植活。结果 在移植A、B和C组中分别有 8、3和 0只小鼠检测到了异基因造血细胞的植活 ,经过统计学检验发现A组小鼠的植活比例高于其余两组。结论 非清髓的预处理条件下可以实现异基因骨髓移植的成功植入 ;加大移植物中造血前体细胞的数量有助于克服移植供、受者间主要组织相容性 (MHC)间的差异和促进移植物植活 相似文献
10.
多种雷公藤单体抑制HL-60细胞腺苷脱氨酶活性 总被引:4,自引:0,他引:4
目的研究多种雷公藤单体对HL-60细胞腺苷脱氨酶(ADA)的影响和诱导细胞凋亡作用。方法分别用雷公藤春碱、雷公藤内酯甲、雷公藤乙素、雷公藤黄素、雷公藤呋喃南蛇碱、雷公藤定碱(10mg/L、1mg/L、0.1mg/L)与HL-60细胞共孵育24h后测定ADA活性,选出抑制作用最强的雷公藤内酯甲。将HL-60细胞与雷公藤内酯甲10mg/L、1mg/L、0.1mg/L以及0.1mg/L雷公藤内酯甲+腺苷0.5mmol/L、腺苷0.5mmol/L共孵育24h后测定细胞凋亡率。结果①雷公藤内酯甲和雷公藤呋喃南蛇碱均能明显抑制HL-60细胞ADA活性(P〈0.01),抑制作用与浓度成正比;雷公藤春碱仅在10mg/L浓度时有明显的ADA抑制作用(P〈0.01);雷公藤黄素、雷公藤定碱与雷公藤乙素无明显ADA抑制作用(P〉0.05)。②HL-60细胞与雷公藤内酯甲10mg/L、1mg/L作用均可见明显的凋亡,单加内酯甲0.1mg/L时或单加腺苷时与对照组比较凋亡率无显著差异,但同时再加入腺苷有很高的凋亡率,两者有协同作用。结论雷公藤内酯甲、雷公藤呋喃南蛇碱和雷公藤春碱等雷公藤单体在一定浓度下对HL-60细胞ADA有抑制作用,可能是ADA一种抑制剂。雷公藤内酯甲在抑制细胞ADA活性的同时也造成明显的细胞凋亡。 相似文献