尘肺患者血清β—胡萝卜素与抗氧化功能的研究

本研究测定了尘肺病人，慢性支气管炎病人及健康成人的血清β－胡萝卜素和ＶｉｔＡ含量以及血甭脂质过氧化酶含量，超氧化物歧化酶和谷胱苷肽过氧化物酶活性。结果发现，尘肺组血清ＢＣ含量明显低于健康组和慢支组（Ｐ＜０．０１）。而血清ＶｉｔＡ含量３个组相近（Ｐ＞０．０５）。与健康组和慢支组比较，尘肺组血ＬＰＯ含量明显升高，ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性则明显降低（Ｐ均＜０．０１）。上述结果提示，尘肺病人抗氧化功能明显     

中国人血管抑素基因的克隆及其序列分析

目的：克隆中国人血管抑素(angiostatin，ANG)基因全长并进行序列分析。方法：应用RT-PCR，将5例健康人肝脏组织ANG基因克隆到pSP71载体上，用Sanger法进行基因测序分析。结果：通过RT-PCR获得一个1141bp的扩增产物，测序发现与已报道的ANG比较，国人ANG上有3个碱基突变位点：分别为第825位C→T；第927位T→G和第1078位G→A。前两个碱基突变氨基酸未发生变化，第3个碱基突变结果使缬氨酸(Val342)改变成为蛋氨酸(Met342)。结论：克隆得到中国人ANG基因片段，其碱基和氨基酸的变化可能是人群中该基因的遗传多态现象。     

Kringle 5的真核植物细胞穿梭表达载体的构建

目的：构建含有目的基因kring5的真核植物细胞穿酸表达载体。方法：应用RT－PCR方法，从正常人肝脏组织中获得kringle5基因，测序后，再通过DNA重组技术，将kringle5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI121和pCAMBIA3301上。结果：得到的kringle5基因序列测定结果与文献相符，重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确，含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论：重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制，而且可以在植物细胞中表达。     

β-胡萝卜素和盐藻提取物剌激小鼠免疫功能

用β-胡萝卜素和盐藻提取物给小鼠腹腔注射,剂量为10mg/kg/d,10天后断颈处死小鼠观察其睥细胞和腹腔巨噬细胞功能。实验结果表明,β-胡萝卜素和盐藻提取物组的脾细胞增殖活性和巨噬细胞膜表面 C3b 受体活性明显高于对照组(P<0.01)。实验结果提示,β-胡萝卜素和盐藻提取物经腹腔途径可刺激小鼠免疫功能。     

微藻异养产生二十碳五烯酸的新进展

二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid简写EPA)是一种长链多不饱和脂肪酸，在营养强化、防治心血管疾病、减轻炎症等方面起着十分重要的作用。目前EPA主要来源于鱼油，很难满足市场对EPA日益增长的需求，必须寻求替代生产EPA的资源。一些微藻可在不需要光的条件下以廉价的有机物为原料异养生长，在异养条件下，可以很好地控制培养模式，有可能大规模地生产EPA。工业上用微藻生产EPA研究包括：筛选高EPA产量的微藻株，通过基因工程改善藻株，优化培养条件以及建立有效的培养体系。本文综述了近几年微藻在异养条件下生产EPA的最新进展，着重阐明硅藻是一种能在异养条件下生长且具有高EPA产率的模式藻株。     

钙和维生素D对高脂饮食诱发的小鼠乳腺上皮增生的影响

本研究目的是观察饮食中添加钙和维生素D对高脂饮食诱发的小鼠乳腺上皮细胞增生的影响。将四周龄小鼠随机分成三组，分别给予对照AIN－76A饲料，高脂低钙低维生素D饲料（试验饲料Ⅰ）和高脂加钙加维生素D饲料（试验饲料Ⅱ）。饲养九周后终止试验，小鼠植入渗透泵灌注溴脱氧尿苷（Brdu）72小时。结果显示试验饲料Ⅰ组的小鼠乳腺终末小导管上皮细胞Brdu标记指数与对照饲料组比较明显升高（P＜0．05）。而试验饲料Ⅱ组的BrdU标记指数与对照组相似（P＞0．05）。本实验研究发现进一步证明，高脂饮食能诱发小鼠乳腺小导管上皮细胞的增生，同时也提示饮食中添加钙和维生素D有助于预防高脂饮食的这种不良作用。     

杜氏盐藻基因组文库的构建

目的　构建杜氏盐藻基因组文库,旨在进一步分离和研究杜氏盐藻基因的结构和功能。方法　采用改进的SDS裂解法提取杜氏盐藻基因组DNA ,通过限制性内切酶Sau3AI进行部分酶切,用T4DNA连接酶将目的片段与噬菌体EMBL3载体臂进行连接后转染大肠杆菌LE3 92。结果　体外包装构建了杜氏盐藻基因组文库,得到重组子数为2 .2×10 4,经测定文库滴度为2 .2×10 5pfu/mL。结论　构建了杜氏盐藻基因组文库,为进一步筛选盐藻重要基因及其序列分析奠定基础。     

肝细胞癌高表达基因TPT1真核报告表达载体的构建及鉴定

目的构建TPT1真核报告表达载体pEGFP-N3TPT1,为进一步研究其功能奠定基础.方法通过PCR和酶切的方法获取具有黏性末端的TPT1基因的全长开放读码框,将其定向连入真核表达载体pEGFP-N3绿色荧光报告基因的氨基侧,构成pEGFP-N3TPT1的真核报告表达载体,通过酶切和测序鉴定TPT1的正确插入.结果酶切和测序均证实TPT1正确插入了真核报告表达载体pEGFP-N3TPT1中.结论成功构建了TPT1的真核报告表达载体pEGFP-N3TPT1.     

铜绿微囊藻抗性株与野生株对铜离子的富积效应

目的：分离筛选高铜离子抗性的铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa),并研究其抗性机制及对铜离子的富积效果。方法：将抗性株与野生株分别加入不同浓度铜离子的BG11培养基中,在不同时间段取样过滤,分析过滤液中铜离子的残留量。结果：在相同时间内,抗性株比野生株产生类金属硫蛋白(MTL)的量要大,培养基中Cu^2 减少主要发生在培养后24h以前。抗性株在24h之前对Cu^2 富积较快,24h的去除率为48．87％,96h的去除率为80．77％;而野生株在24h之前对Cu^2 富积相对较慢,24h去除率为20．88％,96h的去除率为34．29％。结论：利用抗性株铜绿微囊藻治理高铜离子污染源具有较大的应用前景。     

杜氏盐藻核基质附着区结合蛋白基因的克隆及原核表达

目的:构建杜氏盐藻核基质附着区(MAR)结合蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化融合蛋白.方法:根据GenBank上杜氏盐藻MAR结合蛋白的cDNA全长序列设计出含有特定酶切位点的引物,PCR法获得MAR结合蛋白基因序列全长,将其克隆至载体pMD18-T中.酶切连接到pET-28a(+)上构建原核表达载体pET-MBP,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)诱导其表达,Western blotting检验其表达结果.结果:重组质粒经酶切、PCR、测序鉴定,成功构建了原核表达载体pET-MBP,对表达的融合蛋白的Western blotting分析结果表明表达的蛋白质为目的蛋白.Ni2+亲和层析法纯化蛋白质,纯化后目的蛋白在总蛋白中的含量约为70%.结论:成功地克隆杜氏盐藻MAR结合蛋白基因的全长并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,且纯化了MAR结合蛋白的融合蛋白.