慢性淋巴细胞性白血病并发高渗性酮症酸中毒昏迷1例

慢性淋巴细胞性白血病并发高渗性酮症酸中毒昏迷１例何晓彤，鹿立法，王顺清，唐世超患者马某某，男，６７岁。因颈部色块４月余伴头昏、乏力１个月，于１９９２年４月１７日入院。１９９１年１１月于外院诊断为慢性淋巴细胞性白血病。无糖尿病既往史和家族史。体检：Ｔ３...     

反义BCR/ABL寡核苷酸体外抑制K562细胞的研究

目的：探讨反义ＢＣＲ和ＡＢＬ融合基因（ＢＣＲ／ＡＢＬ融合基因）寡核苷酸体外抑制Ｋ５６２细胞的作用及机制。方法：采用Ｋ５６２细胞培养,观察反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸体外对Ｋ５６２细胞数、台盼蓝拒染率及克隆形成等的影响。结果：经反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ３ａ２（ＡＳｂ３ａ２）处理后培养８ｄ的Ｋ５６２克隆抑制率达６０６９％,液体培养中细胞数从２４ｈ开始较对照组减少,细胞存活率从８ｈ开始即较对照组明显下降,ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ２ａ２（ＡＳｂ２ａ２）及无义寡核苷酸对Ｋ５６２细胞数和存活率无明显影响;３种寡核苷酸对ＨＬ６０细胞数和存活率也无影响。结论：ＡＳｂ３ａ２对Ｋ５６２细胞有序列特异性的抑制作用。ＡＳｂ３ａ２的这种抑制作用可能在于它诱导Ｋ５６２细胞的凋亡。     

shRNA沉默RYBP基因表达对HL-60细胞增殖和凋亡的影响

Ring和YY1结合蛋白(RYBP)是生物进化过程中高度保守的转录抑制因子,目前认为是多梳(Polycomb group,PcG)蛋白家族成员,与白血病、淋巴瘤、宫颈癌等肿瘤的发生、发展和预后密切相关[1-3].我们在前期实验中发现白血病患者骨髓单个核细胞(MNC)和白血病细胞系HL-60、SHI-1和K562细胞明显地高表达RYBP,且慢性髓性白血病(CML)患者治疗达到完全缓解时骨髓MNC RYBP表达量明显下降,复发时再升高[4].说明RYBP基因的表达异常与白血病的发生、预后等有关.我们试图通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HL-60细胞RYBP表达,观察HL-60细胞增殖与凋亡,进一步探讨RYBP在白血病发生发展中的作用.     

骨髓增生异常综合征合并骨髓纤维化和Jak2基因突变1例

患者,男,82岁,因发现三系减少2个月,反复气促10 d于2014年4月22日入院。2个月前患者因排尿困难入住我院泌尿外科发现三系减少,入院血常规：WBC 2.08×109· L－1,Hb 78 g／L, Plt 11×109· L－1。患者拒绝骨髓穿刺等检查,入院3 d后签字出院。10 d前因气促、双下肢水肿再次入院,血常规：WBC 1.59×109· L－1, Hb 53 g／L, Plt 12×109· L－1。入院体格检查：贫血貌,瘀点瘀斑未见,浅表淋巴结未及,胸骨无压痛,双肺可及湿啰音,肝脾无肿大,双下肢中度水肿,指凹征（＋）。既往史：2型糖尿病病史10年余,口服降糖药物治疗,有长期不明原因血小板减少［Plt（40～50）×109· L－1］病史2年余。其余个人、婚育、家族史无特殊。入院常规检查生化全套：血肌酐120μmol／L,尿酸387μmol／L,总胆红素15.5μmol／L,间接胆红素7.10μmol／L,直接胆红素8.4μmol／L,总蛋白66.4 g／L,白蛋白28.2 g／L,乳酸脱氢酶203 U／L,碱性磷酸酶98 U／L,谷草转氨酶9.2 U／L,谷丙转氨酶3.6 U／L,总钙1.94 mmol／L;叶酸11.27 nmol／L,维生素B12325.1 pmol／L,铁蛋白748.7 ng／mL;结合珠蛋白2.16 g／L;Ham′s酸溶血试验阴性;Pro－BNP（ S）465 pg／mL;自身抗体全套阴性;体液免疫6项：C30.822 g／L,C40.185 g／L,IgG 14.6 g／L, IgM 0.298 g／L, IgE 57.67 ng／mL, IgA 3.54 g／L,Lam 221.0 mg／dL,Kap 341.0 mg／dL;腹部B超：肝胆脾胰未见异常。血液专科检查：骨髓穿刺（髂后）：取材一般,骨髓增生减少,红系占26％,相对升高,中晚幼红可见病态造血。组化：PAS个别幼红弱阳性。血片：白细胞减少,见有核红4个。免疫分型：粒系41％,单核8％,淋巴42％,有核红2％,未见显著异常抗原表达。核型分析：46XY＋1,der（1,7）（q10;p10）［7］;Jak2基因突变（＋）;骨髓活检：造血面积占5％～30％,可见三系细胞,数量均明显减少,纤维组织增生明显,免疫组化：CD3、CD5、CD20、CD79α均阴性, CD117散在阳性,MPO部分阳性,CD61巨核细胞阳性,Ki－67阳性率20％,Ag染色：网状纤维丰富。考虑：骨髓纤维化。结合患者病史及目前检查讨论后诊断为骨髓增生异常综合征（ MDS）。     

非清髓性造血干细胞移植治疗8例恶性血液病的疗效观察

我们从 1998年 9月至 2 0 0 0年 6月采用抗胸腺细胞球蛋白 (ＡＴＧ)、白消安 (ＢＵ)和环磷酰胺 (ＣＴＸ)组成的预处理方案行非清髓性造血干细胞移植 (ｎｏｎｍｙｅｌｏａｂｌａｔｉｖｅｓｔｅｍｃｅｌｌｔｒａｎｓ ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ,ＮＳＣＴ)治疗 8例恶性血液病患者 ,均实现供者造血细胞植入 ,且无严重的药物不良反应发生 ,现报告如下。病例和方法1　病例　 8例患者的临床特征见表 1。 8例恶性血液病患者均因年龄因素、脏器功能不良或ＨＬＡ配型不合而选用ＮＳＣＴ。其中移植前经化疗达到缓解的 4例 ;处于慢粒慢性期 1例 ;处于全血细…     

非清髓性造血干细胞移植后并发移植物抗宿主病的相关因素分析

目的 探讨和分析非清髓性造血干细胞移植(NST)后并发移植物抗宿主病(GVHD)的相关因素.方法 选择34例血液病患者,其中重型再生障碍性贫血(SAA)15例,重型β-地中海贫血(TM)1例,肿瘤性血液病18例;进行无关供者脐带血造血干细胞移植(UCBT)11例,同胞供者骨髓联合外周血干细胞移植7例,外周血造血干细胞移植(PBSCT)16例.移植前采用以抗胸腺细胞球蛋白(ATG)、抗淋巴细胞球蛋白(ALG)或者氟达拉滨强效免疫抑制为基础的非清髓性预处理方案.GVHD的预防采用短程的甲氨蝶呤(MTX)联合环孢素A(CsA).观察非清髓性造血干细胞移植后的临床特点以及急、慢性移植物抗宿主病的发生情况;分析发生慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的相关因素.结果 NST的植入率为91.2%.移植后7例肿瘤性血液病患者形成了供、受者造血细胞混合嵌合体(MC),给予供者淋巴细胞输注(DLI)2～9次后,例由MC转变为供者造血细胞完全嵌合体(FDC).随访12(3～96)个月,共发生Ⅰ～Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)5例,GVHD 15例.经统计学分析,发现年龄大的肿瘤性血液病患者经以ATG为基础的NST后,再给予DLI,其cGVHD的发生率高,且合并感染,对治疗的反应差;而以氟达拉滨为基础的NST患者发生cGVHD后治疗反应较好.移植100 d前后患者分别死亡3例和5例,其中3例死于广泛性cGVHD.结论 患者的年龄大、有合并症、以ATG为基础的预处理方案、肿瘤性血液病是NST后患者并发cGVHD的危险因素.     

AML—M5b外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖特点

目的研究AML—M5b患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖特点，并分析分选的患者T细胞经体外诱导、活化及短期培养后其TCR Vβ亚家族的利用及克隆性增殖情况。方法运用RT—PCR-基因扫描技术分析初治AML—M5b患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族利用和克隆性增殖，免疫磁珠分选患者T淋巴细胞，体外利用自体白血病DC细胞联合CD3单抗、CD28对T细胞进行诱导、活化，并对诱导后T细胞进行TCR Vβ亚家族表达和克隆性增殖分析。结果9例患者T细胞在体外获得增殖，TCR即分析显示患者外周血T细胞均表达部分Vβ亚家族，体外诱导前后的T细胞TCR Vβ亚家族表达和克隆性增殖特点不完全相同，有部分出现新的邯亚家族表达及克隆性增殖，有部分Vβ亚家族在诱导前后始终表现为克隆性增殖，体外杀伤性分析发现诱导后的T细胞对自体白血病细胞具有一定的识别作用。结论AML—M5患者TCR Vβ亚家族T细胞的倾斜性分布和克隆性增殖，部分Vβ亚家族T细胞在诱导前后始终保持克隆性增殖状态，可能是机体针对白血病相关抗原的特异性CTL，体外诱导活化及短期培养后患者T细胞TCR Vβ亚家族表达数量增加，并出现新的克隆性增殖Vβ亚家族T细胞，提示体外诱导活化能够产生白血病患者自体的白血病特异性CTL。     

非清髓性异基因造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤一例

患者男 ,4 2岁。因反复腰痛 8个月 ,于 2 0 0 0年 5月 2 4日入院。经骨髓、Ｘ线、血清Ｍ蛋白等检查 ,诊断为多发性骨髓瘤ⅢＡ期。用ＶＢＡＰ方案 (ＶＣＲ、ＢＣＮＵ、ＡＤＲ、Ｐｒｅｄ)化疗 1个疗程 ,骨髓象浆细胞由 2 2 .5 %上升到 39%。随后改用大剂量环磷酰胺 (ＣＴＸ)治疗 ,共 2个疗程 ,骨髓象浆细胞降至3.5 % ,血浆Ｍ蛋白由 35 .8%降至 2 5 .8%。随后即以非清髓性预处理策略行异基因外周血造血干细胞移植 (ａｌｌｏ ＰＢ ＳＣＴ)。供者为其胞姐 ,ＨＬＡ配型全相合 ,ＡＢＯ血型供者为Ｏ型 ,受者为Ｂ型 ,属次要不合 ,供者每天用ｒｈＧ Ｓ…     

非清髓性外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血1例

目的:异基因造血干细胞移植是治愈地中海贫血的唯一方法.观察应用强免疫抑制剂及胸腺球蛋白与减量的消胺为预处理方案,异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血的移植后效应以及降低并发症的特点.方法:选择2002-11于广州市第一人民医院血液科住院的11岁患者.出生时即诊断为纯合子重型β-地中海贫血.经患者家属同意和医院伦理委员会批准.对患者实施异基因外周血造血干细胞移植.供者为妹妹,血型相同,HLA配型全相合的杂合子轻型β-地中海贫血.预处理方案:氟达拉滨35 mg/(m2·d),马利兰 4 mg/(kg·d);抗胸腺细胞球蛋白200 mg/d.外周血造血干细胞动员粒细胞集落刺激因子150 μg/d×7 d;于移植前1 d至移植后1 d连续3 d采集细胞总量为:CD34 3.22×106/kg,单个核细胞4.52×108/kg,CD3 T细胞22.33×107/kg,当天输注.移植物抗宿主病的预防:环孢素A联合甲基泼尼松龙并渐减量,甲基泼尼松龙在2个月内停药.采用骨髓细胞的XY/XX的荧光原位杂交和微卫星法DNA指纹图检测植入证据.结果:血小板和白细胞在移植后10,14 d最低值为:1.26×109 L-1, 28.8×109 L-1;移植后30 d,血小板> 50×109 L-1,血红蛋白> 60 g/L, DNA指纹图为混合性嵌合体,性染色体示供者细胞占96%.移植后44 d,血红蛋白< 45 g/L,XY染色体占94%,行动员供者干细胞输注,输注CD34 1.02×106/kg,单个核细胞1.20×108/kg,T细胞(CD3 )2.2×107/kg,2周后血红蛋白上升;移植后75 d供者嵌合体占40%,停用环孢素A,供者嵌合体上升至96%,移植后120 d,仍然为混合性嵌合体状态.无移植物抗宿主病、肝静脉闭塞病、出血性膀胱炎和感染的发生.结论:以氟达拉滨和抗胸腺细胞球蛋白强烈免疫抑制剂、减量马利兰为基础预处理方案,实施异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血,可达到造血细胞在患者体内的迅速植入,减少移植相关并发症的发生.