CDKN2/p16基因在四种原发恶性肿瘤中存在状态的研究

目的 :研究CDKN2 /p16基因缺失和蛋白丢失在非小细胞肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌 4种原发恶性肿瘤中的作用。方法 :采用免疫组织化学法和多重PCR技术对 68例 (非小细胞肺癌 3 1例 ,食管癌 15例 ,胃癌 13例 ,乳腺癌 9例 )原发肿瘤组织标本进行CDKN2 /p16基因第一、第二外显子纯合缺失和p16蛋白表达丢失分析研究。结果 :第一或 (和 )第二外显子总缺失率为 13 .2 % ( 9/68) ,蛋白丢失率为 44% ( 3 0 /68) ,不同肿瘤组织标本的p16基因缺失率和蛋白丢失率差别很大。结论 :CDKN2 /p16基因是重要的多肿瘤抑制基因 ,在不同肿瘤组织中其失活方式不完全相同。     

FAK基因的表达调控及在肿瘤治疗中的应用

局部黏着斑激酶（FAK）是一种非受体酪氨酸激酶，参与细胞的迁移和增殖等活动。在多种肿瘤组织和细胞系中存在的FAK高表达现象，提示FAK可能是肿瘤治疗的一个有效靶点。在本研究中，我们用修饰改进的聚乙烯亚胺高效转染试剂，在体内和体外转染FAK-siRNA表达质粒和FRNK表达质粒两种方法来抑制FAK的功能。[第一段]     

p16和Rb基因蛋白在肺癌中的表达

目的：研究ｐ１６和Ｒｂ基因蛋白的表达与肺癌临床病理学特征的关系。方法：采用免疫组织化学方法对８９例肺癌进行了ｐ１６和Ｒｂ蛋白的定位观察。结果：肺癌；ｐ１６基因蛋白的总丢失率为４７．２％，且与肺癌的组织学类型，淋巴结转移，临床病理分期有关。Ｒｂ基因蛋白的总丢失率为３１．５％，与组织学类型有关。     

肾周产气性脓肿2例

例1 　女,5 5岁。寒战、高热1 0天,体温最高达40℃,无尿频、尿急、尿痛、脓尿等。体检:神清,心、肺、腹正常,有糖尿病史7年。检查血常规白细胞2 0×1 0 9/L ,血糖1 3mmol/L。CT示左肾周被不规则软组织影包裹,CT值2 8Hu ,其中散在大小不等的气体样低密度影;增强扫描示肾实质、集合系统正常,肾周软组织影不强化。诊断为肾周产气性脓肿。控制血糖,应用抗生素,经皮穿刺置管,引流出灰白色黏稠脓液,含气体。脓液细菌培养有肺炎克雷白菌粒,尿细菌培养阴性。因引流不畅,改为切开置管引流。2 0天后,引流液明显减少,症状完全消失。拔管,继续口服抗…     

分子生物学双语教学探索

本文主要介绍了我们使用原版英文教材 ,对分子生物学课程进行双语教学改革的一些尝试和做法 ,并总结了一些改革的心得体会     

人转录因子sp1在大肠杆菌中的表达与体外纯化

目的：在大肠杆菌中表达人源转录因子spl蛋白,并进行体外纯化。方法：首先将人源sp1真核表达质粒pCMV-sp1中的sp1 cDNA用限制性内切酶切开,连入原核表达质粒pET28b,构建原核表达重组质粒pET28b-sp1-699c;然后将重组质粒转化入大肠杆菌BL21（DE3）菌株,经IPTG诱导表达带His-Tag的融合蛋白His-sp1（88-786aa）,通过包涵体的变复性和Ni-IDA亲和层析纯化后,SDS-PAGE鉴定纯化后的蛋白。结果：融合蛋白His-sp1在大肠杆菌内得到高效表达,纯化后可得到较高纯度的蛋白。结论：本研究获得了较高纯度的融合蛋白His-sp1,为进一步研究sp1蛋白对靶基因的转录调控奠定了基础。     

伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性脑动脉病研究进展

伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性脑动脉病(cerebral autosomal dominant arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy,CADASIL)是最常见的遗传性脑小血管病.NOTCH3基因错义突变致其编码的半胱氨酸发生奇数变化进而影响NOTCH3蛋白构象和功能,异常的NOTCH3蛋白具有血管平滑肌毒性并最终沉积于脑小血管而引发病变.CADASIL通常可凭典型的临床和神经影像学表现而疑诊,确诊则需基因检测或皮肤活检电镜发现小血管平滑肌细胞外嗜锇性颗粒状物质沉积或免疫组化NOTCH3 ECD染色阳性.近20年来,有关CADASIL的遗传学、发病机制、临床表现及诊断技术等方面的研究已取得巨大进展,但许多重要问题并未完全阐明且有新的发现,例如NOTCH3基因的突变方式和位点、基因表型与临床表型的关系、诊断流程的优化、致病机制的深度研究和新发现、新治疗靶点和概念的探索.文章对CADASIL的遗传特征、致病机制和临床诊治技术进行了综述.     

人转录因子USF基因在大肠杆菌中的表达、纯化及在FAK启动子中的结合研究

目的：在大肠杆菌中表达人源转录因子USF（upstream stimulatory factor）并进行分离纯化,进一步分析其在FAK（focal adhesion kinase）启动子中的DNA结合能力。方法：将人源USF cDNA克隆到表达质粒pET28a载体,然后将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达带His6-Tag的融合蛋白His-USF,通过镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE分析鉴定。EM-SA分析纯化后的蛋白与FAK启动子的DNA结合情况。结果：His-USF在大肠杆菌中获得高效表达,镍柱亲和层析纯化得到了高纯度的蛋白,并能够结合到FAK的启动子上。结论：获得高效表达的高纯度His-USF融合蛋白,为USF对其靶基因的结合与转录调控的进一步研究奠定了基础。     

体外冲击波碎石术治疗输尿管上中段结石

目的探讨如何提高体外冲击波碎石术（ESWL）治疗输尿管上中段结石的疗效。方法采用深圳科达NE—VB型B超定位电磁波碎石机,俯卧位治疗输尿管上中段结石2528例。结果经过首次、复次ESWL治疗后2480例结石全部排出,48例治疗失败。结论ESWL治疗输尿管上中段结石是安全、有效、可行的,但必须严格掌握适应证和术中、术后注意事项,才能取得更满意的疗效。     

体外冲击波碎石术治疗膀胱结石249例疗效观察

目的观察B超定位体外冲击波碎石术（ESWL）治疗膀胱结石的临床效果。方法采用B超定位ES-WL治疗膀胱结石249例,并进行节段性总结。结果患者的膀胱结石均完全粉碎、排净,成功率100%,无严重并发症。结论只要掌握好适应证,B超定位ESWL是治疗膀胱结石较理想的方法,具有方便、无痛苦、效果好、并发症少、治疗费用低等优点。