婆罗双树样基因2干扰对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究婆罗双树样基因2（sal-like gene 2,SALL2）干扰对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法：设计针对SALL2基因的3条小干扰RNA（siRNA-1、2、3）,并设载体组及未转染对照组,使用脂质体转染HeLa细胞。采用逆转录RT-PCR和Western blot检测转染后HeLa细胞中SALL2 mRNA和蛋白的表达以筛选沉默效果最好的siRNA片段。将最适siRNA片段转染HeLa细胞后,采用CCK-8检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果：对照组HeLa细胞高表达SALL2。载体组和转染siRNA-3组SALL2的mRNA和蛋白表达与对照组相比,差异均无统计学意义（P均>0.05）,而siRNA-1和siRNA-2转染48 h后,HeLa细胞SALL2的mRNA和蛋白表达均降低,差异均有统计学意义（P均<0.05）,其中siRNA-1的沉默效率更好,故后续选择siRNA-1作为干扰组。与对照组相比,转染siRNA-1 48和72 h后细胞的增殖率均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;转染48 h后siRNA-1组处于G0/G1期的细胞比例减少,凋亡率明显降低（P均<0.05）。结论：SALL2基因干扰可明显提高HeLa细胞的增殖率,并降低其凋亡率。提示SALL2基因对宫颈癌HeLa细胞的增殖有抑制作用。     

白细胞相关免疫球蛋白样受体-1在宫颈癌和子宫内膜癌患者外周血T细胞的表达及意义

目的 研究白细胞相关免疫球蛋白样受体(LAIR-1)在宫颈癌和子宫内膜癌患者外周血T细胞的表达情况,并与子宫肌瘤、子宫癌前病变患者相比较,探讨LAIR-1表达与肿瘤免疫的相关性.方法 密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测LAIR-1在196例肿瘤患者外周血T细胞的表达水平.结果 流式细胞术检测结果显示,宫颈癌和子宫内膜癌患者外周血CD3+CD4+T细胞LAIR-1阳性率均高于子宫肌瘤(P＜0.001;P＜0.05)和癌前病变患者(P ＜0.001;P ＜0.01).平均荧光强度分析结果显示,宫颈癌患者外周血CD3+CD4+T细胞LAIR-1表达水平显著高于癌前病变患者(P＜0.01),CD3+CD8+T细胞LAIR-1表达水平显著高于子宫肌瘤患者(P＜0.05)和癌前病变患者(P＜0.001).子宫内膜癌患者外周血CD3+CD4+T细胞LAIR-1表达水平明显高于子宫肌瘤患者(P＜0.05)和癌前病变患者(P＜0.01),CD3+CD8+T细胞LAIR-1表达水平高于癌前病变患者(P＜0.05).结论 LAIR-1在宫颈癌和子宫内膜癌患者外周血T细胞表达上调,提示LAIR-1可能与肿瘤免疫逃逸存在相关性.     

抑制性受体LAIR-1对巨核谱系分化的调节作用

 目的 研究抑制性受体LAIR-1在巨核谱系细胞的表达及其对巨核细胞分化的调节作用。方法 采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测LAIR-1在巨核谱系细胞的表达；免疫磁珠法纯化脐血CD34+细胞，体外无血清培养系统诱导CD34+细胞向巨核细胞分化，观察LAIR-1被抗体或配体交联激活后对巨核细胞分化的影响。结果 LAIR-1表达于人骨髓CD34+CD41a+和CD41a+CD42b+细胞以及脐血CD34+CD41a-和CD34+CD41a+细胞；脐血CD34+细胞向巨核细胞分化过程中，LAIR-1表达在倍性为2N和4N的不成熟CD41a+细胞上；交联激活LAIR-1分子能够抑制脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化。结论 LAIR-1可能是参与巨核细胞早期分化发育的一种新的负调控分子。     

婆罗双树样基因2对A2780细胞生长及转移影响

目的 婆罗双树样基因2(sal-like gene 2,SALL2)作为肿瘤抑制基因,在多种肿瘤细胞的生长过程中发挥调控作用.本研究旨在探讨SALL2基因对卵巢癌(ovarian cancer,OC) A2780细胞生长和转移的影响.方法 采用小干扰RNA(small-interfering ribonucleic acid,siRNA)转染OC A2780细胞以沉默SALL2,设载体组及空白对照组.采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测SALL2的表达.采用CCK-8和流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞增殖,采用FCM检测细胞凋亡.应用划痕实验检测细胞迁移,采用侵袭实验检测细胞侵袭.结果 A2780细胞高表达SALL2的mRNA及蛋白.RT-PCR结果显示,转染siRNA2和siRNA3 48 h后,空白对照组、载体组、siRNA2和siRNA3组平均2-△△Ct值分别为1.000±0.030、0.942±0.053、0.207±0.041和0.465±0.007,差异有统计学意义,F=8.213,P=0.024.转染siRNA2和siRNA3 48 h后,空白对照组、载体组及siRNA2和siRNA3组蛋白表达相对灰度比值分别为0.629±0.035、0.603±0.072、0.225±0.004和0.453±0.061,差异有统计学意义,F=11.629,P=0.018.siRNA2组转染72 h后的细胞增殖力(4.285±0.026)显著高于载体组(3.622±0.029)和空白对照组(3.614±0.016),差异有统计学意义,F=34.023,P=0.012.siRNA2组转染48 h后的细胞凋亡率为(49.17±2.03)％,显著低于载体组的(56.82±2.74)％和空白对照组的(58.39±2.45)％,差异有统计学意义,F=5.781,P=0.037.siRNA2组转染48 h后处于G0/G1期的细胞比例为(47.87±1.28)％,均显著低于载体组的(55.27±1.46)％与空白对照组的(56.60±1.57)％,差异有统计学意义,F=4.213,P=0.032.siRNA2组转染48 h后划痕愈合率为(78.925±6.133)％,明显高于载体组的(38.504±3.772)％和空白对照组的(42.169±4.103)％,差异有统计学意义,F=17.184,P=0.006.siRNA2组转染48 h后穿过基质胶的细胞数(147.169±7.208)显著高于载体组(92.169±11.052)和空白对照组(95.169±9.830),差异有统计学意义,F=12.698,P=0.014.结论 SALL2沉默促进A2780细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡.