鸡蛋花提取物的抗突变活性研究

目的 探讨鸡蛋花提取物是否具有抗突变活性,为其开发应用提供实验依据.方法 采用高内涵体外微核实验和Ames实验,计数微核细胞数、回复突变菌落数,计算微核细胞率、相对菌落数及其抑制率;评价不同浓度的鸡蛋花提取物的抗突变效应.结果 高内涵体外微核实验中鸡蛋花提取物20、10mg/mL 2个剂量预处理致突变剂条件下的微核细胞率与致突变剂对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);鸡蛋花提取物与致突变剂同时加入条件下未观察到抗突变效应.Ames实验中鸡蛋花提取物预处理致突变剂条件下对TA98、TA100的相对回变菌落数与致突变剂对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05),且呈一定的剂量-反应关系;同时加入条件下只在25 mg/皿剂量组呈现出对致突变剂的抑制作用.结论 本实验条件下,鸡蛋花提取物能够直接灭活致突变剂,具有一定的拮抗突变的作用.     

白杨素增强顺铂抗肿瘤作用的研究

目的：探讨白杨素增强顺铂抗肿瘤作用的最佳条件并筛选敏感细胞。方法：设立阴性对照组、空白调零组及40 μmol/L白杨素、5.0 μg/mL顺铂、40 μmol/L白杨素+5.0 μg/mL顺铂3个处理组,选取人结直肠癌细胞（HCT-116）、人鼻咽癌细胞（CNE1）、人肝癌细胞（HepG2）、人胃癌细胞（BGC-823）分别作用24 h。采用四甲基噻唑蓝（MTT）法测定肿瘤细胞的增殖抑制率,采用Hoechst 33342荧光染色法测定诱导肿瘤细胞的凋亡率,通过抑制率和凋亡率筛选出敏感细胞。采用L₉（3³）正交设计方法,设立3个白杨素水平（10、20、40 μmol/L）,3个顺铂水平（1.3、2.5、5.0 μg/mL）,以及3种作用时间（12、24、36 h）处理敏感细胞,确定白杨素增强顺铂抗肿瘤作用的最佳作用条件。结果：与白杨素或顺铂单独处理组相比,MTT试验结果表明,白杨素联合顺铂作用组对上述4种肿瘤细胞增殖的抑制率均明显增加,差异均具有统计学意义（P均 < 0.01）;Hoechst 33342染色实验发现,白杨素联合顺铂作用组诱导各肿瘤细胞的凋亡率亦均明显增加（P均 < 0.01）。白杨素联合顺铂作用组对人胃癌细胞BGC-823的增殖抑制率为（78.0±2.0）%、诱导细胞的凋亡率为（72.3±6.5）%。在4种细胞中,人胃癌细胞株BGC-823对白杨素联合顺铂抗肿瘤作用最敏感。正交实验的体外模型结果表明,最佳作用条件为白杨素40 μmol/L联合顺铂5.0 μg/mL,作用时间24 h。结论：白杨素能增强顺铂抑制人肿瘤细胞增殖和诱导人肿瘤细胞凋亡的作用。人胃癌细胞BGC-823是白杨素和顺铂联合作用的敏感细胞株。     

白杨素联合喜树碱促进鼻咽癌细胞CNE2凋亡作用研究

目的研究白杨素联合喜树碱对鼻咽癌细胞CNE2凋亡的影响,并对其分子机制做初步探讨。方法白杨素以不同浓度(10、20、40μmol/L)单独/联合喜树碱(1μg/mL)处理CNE2细胞后,于普通及荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化,获得细胞死亡的定性资料;MTT法分析细胞活性,获得细胞死亡的定量资料;并以Western blotting方法检测凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的变化情况及凋亡抑制蛋白Bcl-xL随时间的变化规律。结果形态学观察发现,与对照组比较,白杨素联合喜树碱处理CNE2细胞后,细胞出现明显的死亡量增加,而单独白杨素、喜树碱和未处理的对照组则未观察到细胞的明显减少;MTT法分析的定量资料也支持这一结果,联合处理组细胞存活率随着白杨素剂量增加而下降,与未处理的对照组比较均有统计学意义(P0.05),而且与单独白杨素及单独喜树碱组比较均有统计学意义(P0.05);Hochest 33342荧光染色在联合处理组可观察到明显的核固缩细胞增加;Western blotting检测到凋亡标志蛋白caspase-3和PARP原蛋白减少、相应的活化裂解片段出现;全caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可有效抑制联合处理引起的CNE2细胞凋亡,阻止凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的活化降解;喜树碱引起的凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达量增加,随联合处理时间延长而明显下调。结论白杨素联合喜树碱具有促进CNE2细胞凋亡的能力,凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达下调是其重要的分子机制。     

溪黄草袋泡茶的急性毒性和遗传毒性研究

目的： 探讨溪黄草袋泡茶的急性毒性和遗传毒性。方法：急性毒性实验,分别对小鼠灌服剂量为21.5、10.0、4.64、2.15 g/kg的溪黄草袋泡茶提取液,采用霍恩氏(Horn)法计算其半数致死剂量(LD50)。设每皿5 000、1 000、200、40、8 μg共5个剂量组进行Ames试验;分别按 10.0、5.00、2.50 g/kg进行小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,检测溪黄草袋泡茶的遗传毒性。结果：溪黄草袋泡茶对雌雄小鼠LD50＞21.5 g/kg;Ames试验中,溪黄草袋泡茶对 TA97、TA98、TA100、TA102这4种试验菌株,在加与不加S9条件下,样品各剂量组回变菌落数均未超过溶剂对照组菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验结果显示,各剂量组的微核率和精子畸形率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：在本实验条件下,溪黄草袋泡茶属无毒级物质,未见遗传毒性。