同源盒基因CDX2mRNA在胃癌中的定量表达及临床意义

[摘要] 目的 探讨同源盒基因CDX2 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测CDX2 mRNA在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系临床病理特征进行分析。 结果 胃癌组中CDX2 mRNA的阳性表达率为37.9%（22/58）,癌旁组为63.8%（37/58）,正常对照组不表达,组间比较差异有显著性（P<0.05）;CDX2 mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率差异有显著性（P<0.05）。结论 CDX2 mRNA在癌旁和胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间有密切的联系,提示CDX2 mRNA的高表达可能与胃癌的发生有关。 [关键词] CDX2 实时荧光定量PCR 胃癌     

原发性肝癌患者围手术期尿8-羟基脱氧鸟苷水平的变化及意义

目的通过测定和比较肝癌患者围手术期和健康体检者尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)水平,探讨DNA氧化损伤与肝癌的相关性以及尿8-OHd G作为肝癌疗效评价的生物指标的应用价值。方法采用酶联免疫吸附法检测肝癌患者不同时期(治疗前、术后2周、首次免疫治疗后第1天)和健康体检者尿8-OHd G水平。结果肝癌患者尿8-OHd G水平(16.53±4.92)ng/mg Cr显著高于健康体检者(12.11±4.36)ng/mg C(r t=-6.701,P<0.01),肝癌患者术后尿8-OHd G水平(13.80±4.23)ng/mg Cr较术前(17.24±5.74)ng/mg Cr明显下降(t=3.100,P<0.01),与健康对照组接近。首次免疫治疗后第1天患者尿8-OHd G水平为(14.90±6.04)ng/mg Cr,较免疫治疗前有所升高,但差异无统计学意义,而与健康对照组相比差异有统计学意义(t=-2.789,P<0.01)。同时,以不同AFP水平分组的组间两两比较尿8-OHd G水平无明显差异。结论尿8-OHd G水平有望成为肝癌临床诊断以及疗效评价领域中一个潜在和辅助性的生物学指标。     

小分子干扰RNA对胃癌MGC803细胞E2F-1表达及其生物学行为的影响

目的 观察小分子干扰RNA(siRNA)对胃癌MGC803细胞E2F-1基因表达及其生物学行为的影响.方法 将实验组(E2F-1-siRNA)和阴性对照组(negative control-siRNA)转染进MGC803细胞,48 h后采用实时定量聚合酶链反应(PCR)及Western blot技术分别检测E2F-1 mRNA及蛋白的表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测MGC803细胞增殖的变化,流式细胞仪检测MGC803细胞周期变化.结果 E2F-1-siRNA有效抑制胃癌细胞E2F-1 mRNA和蛋白的表达并且影响MGC803细胞的增殖,与阴性对照组及未转染组细胞比较mRNA降低了84.8%和85.3%(F=14.35,P＜0.05),蛋白降低T77.2%和79.6%,MGC803细胞增殖分别抑制了69.0%和81.6%,差异有统计学意义(F=170.18,P＜0.05);同时E2F-1-siRNA促使更多MGC803细胞DNA含量聚集于G2/M期附近,G2/M期DNA含量比例为(54.98±3.46)%,与阴性对照组(44.70±3.82)%和未转染组(31.47±2.12)%比较,差异有统计学意义(F=88.90,P＜0.05).结论 E2F-1-siRNA可以有效抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1 mRNA及蛋白的表达,使G1 期细胞的DNA含量下调,细胞分裂停滞在G2/M期附近,抑制胃癌细胞的增殖.     

转录因子E2F-1 mRNA在胃癌中的定量表达及临床意义

目的:探讨转录因子E2F-1 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测E2F-1 mRNA在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系.临床病理特征进行分析.结果:胃癌组中E2F-1 mRNA的阳性表达率为72.4%(42/58),癌旁组为50.0%(29/58),正常对照组为27.9%(12/43),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);E2F-1 mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无统计学意义(P>0.05).结论:E2F-1 mRNA在胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间没有必然联系,提示E2F-1 tuRNA的高表达可能与胃癌的发生有关.     

Cdx2对胃癌细胞生物学性状的影响

目的 观察Cdx2对人胃癌细胞MGC-803生物学性状的影响.方法 利用脂质体将pCMV-Cdx2-HA和pCMV-HA质粒分别转染MGC-803细胞,应用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测MGC-803细胞中Cdx2基因的表达;应用体外实验及流式细胞仪分别检测Cdx2对MGC-803的侵袭力、黏附力、增殖力、迁移力和凋亡率的影响.结果 转染pCMV-Cdx2-HA质粒的MGC-803细胞中可以检测到高Cdx2的表达,其侵袭能力[穿膜细胞数:(64.33±11.94)个/视野下降到(23.93±8.95)个/视野]、黏附能力[(1.172±0.042)]、增殖力[(26.13±1.60)%]和迁移能力[(42.87±2.19)%]较对照组明显降低(P＜0.05),而且凋亡率升高,48 h和72 h的凋亡率分别为(11.40±0.36)%、(9.72±0.50)%(P＜0.05).结论 Cdx2高表达对MGC-803具有抑制其侵袭转移的作用,并促进肿瘤细胞的凋亡.     

标准残肝体积联合肝纤维化测定在原发性肝癌切除术安全性评估中的价值

[目的]探讨标准残肝体积(SRLV)大小及肝纤维化程度与原发性肝癌切除术后发生肝功能代偿不全间的关系.[方法]对因肝癌行肝切除术的104例病例进行研究.残肝体积=全肝体积-切除肝脏体积;SRLV=残肝体积/体表面积;根据声脉冲辐射力成像(acoustic radiation force impulse,ARFI)评分将所有病例分为A组(中、重度肝纤维化组)和B组(正常或轻度肝纤维化组).通过受试者工作特征曲线(ROC)分析预防发生肝功能代偿不全的SRLV安全临界值.并将术后发生肝功能中度代偿不全患者的术前ARFI评分与术后SRLV进行直线回归分析.[结果]A组病例术后发生肝功能轻度代偿不全、中度代偿不全及重度代偿不全分别为53例、22例、4例.在A组病例中,肝功能中、重度代偿不全发生率为32.9％,(26/79),肝功能轻度代偿不全患者和中、重度代偿不全患者的SRLV[(605.69±1 18.98)ml/m2 vs (470.81±62.59)ml/m2]比较具有显著差异(P＜0.05).ROC曲线分析提示发生肝功能中、重度代偿不全的SRLV的临界值为503ml/m2.B组病例数少,不作统计学分析.将术后发生肝功能中度代偿不全患者的术前ARFI评分及术后SRLV进行直线回归分析,显示呈正相关(R=0.719,P＜0.01),其回归方程为:SRLV(ml/m2)=149.6×A RFI评分(m/s)+194.1.[结论]联合SRLV及肝纤维化程度测定对原发性肝癌术前安全切肝量评估有重要指导价值,对伴中、重度肝纤维化患者安全SRLV临界值为503ml/m2.     

原发性肝癌患者尿8-羟基脱氧鸟苷水平的观察

目的通过测定和比较原发性肝癌患者与健康体检者尿8-羟基脱氧鸟苷水平,探讨DNA氧化损伤与肝癌发生发展的关系。方法以酶联免疫吸附法检测各100例肝癌患者（实验组）及健康体检者（对照组）尿8-OHdG水平,并进行相互比较。结果肝癌患者尿8-OHdG水平明显高于健康体检者（16．12±5．30VS12．21±4．51）ng／mgCr（P〈0．01）。结论肝癌患者尿8-OHdG水平高于健康人群,DNA氧化损伤与肝癌发生发展具有密切的关系,测定尿8-OHdG水平有助于肝癌的诊治。     

转录因子E2F-1在胃癌中的表达及临床意义

目的 探讨转录因子E2F-1在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和免疫组化检测E2F-1在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系临床病理特征进行分析.结果 胃癌组中E2F-1 mRNA的阳性表达率为72.4%(42/58),癌旁组为50.0%(29/58),正常对照组为27.9%(12/43),组间比较差异有显著性(P<0.05);E2F-1 mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无显著性(P>0.05).胃癌组中E2F-1 蛋白的阳性表达率为65.5%(38/58),癌旁组为43.1%(25/58),正常对照组为23.3%(10/43),组间比较差异有显著性(P<0.05);E2F-1 蛋白在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无显著性(P>0.05).结论 E2F-1 mRNA和E2F-1蛋白均在胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间没有必然联系,提示E2F-1的高表达可能与胃癌的发生有关.     

转录因子E2F-1 siRNA表达质粒的构建及对胃癌MGC803细胞的沉默效应

目的:通过构建人E2F-1基因的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,探讨其对胃癌MGC803细胞中E2F-1基因表达的影响.方法:将设计合成的具有短发夹结构的人E2F-1基因siRNA寡核苷酸链退火形成双链,连接人经BamH I和Hind Ⅲ双酶切后的pSilencer4.1-CMV neo表达质粒,并做酶切及测序鉴定.用脂质体把重组质粒转染至细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR)及蛋白印迹(western blotting)技术分别检测E2F-I mRNA及蛋白表达.结果:经酶切及测序鉴定,成功构建了E2F-l siRNA表达质粒;它可显著抑制MGC803细胞中E2F-1基因mRNA及蛋白表达,与未转染组及阴性对照组细胞比较,分别降低了86.4%、86.1%和81,5%、79.6%.结论:pSilencer4.1一E2F-l重组质粒能抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1基因的表达,为进一步E2F-1基因的功能研究及胃癌治疗研究提供了实验基础.