去势联合地塞米松建立大鼠骨质疏松模型的研究

目的观察去势联合地塞米松肌肉注射的方法建立大鼠骨质疏松模型的效果。方法将24只3.5月龄雌性SD大鼠(250±20)g随机分成3组,A组:假手术+肌注生理盐水组(8只)、B组:去势+肌注生理盐水组(8只)和C组:去势+肌注地塞米松组(8只)。后两组大鼠行双侧卵巢切除术。分别于术前及术后2w、4w、6w采用(双能X线吸收)骨密度仪进行大鼠全身BMD的测量,术后6w三组大鼠分别进行骨CT值测量、外周血生化检测和股骨颈骨组织形态学观察及其骨小梁形态计量学测定。结果大鼠术后6w,C组全身BMD及骨CT值较A组明显降低(P<0.05);B和C组血清Ca浓度较A组明显下降(P<0.05);B和C组血清P浓度较A组明显升高(P<0.05);B组血清ALP、TRACP浓度较A组明显升高(P<0.05),C组与B组比较血清ALP浓度显著降低(P<0.01)、TRACP浓度显著增高(P<0.01);B组和C组大鼠骨小梁均变窄,连接不完整出现断裂、局部镂空的现象,骨髓腔变大,骨细胞分布减少,骨小梁形态计量值降低(P<0.01),C组更明显。结论去势联合肌注地塞米松法建立大鼠骨质疏松症模型较单纯去势法时间短、效果明显、稳定性好。     

c-jun基因沉默对放射抗拒鼻咽癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响

目的 探讨c-jun基因沉默对人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 用携带shRAN慢病毒载体感染CNE-2R细胞以沉默c-jun基因,构建c-jun-shRNA-CNE-2R细胞组（c-jun-shRNA组）以及阴性对照NC-shRNA-CNE-2R细胞组（NC组）,以CNE-2R细胞为空白对照组,采用Western blot 检测3组细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白的表达水平。构建裸鼠模型,观察3组细胞裸鼠皮下种植瘤生长曲线及体积;采用免疫组化法检测移植瘤组织中VEGF、CD34的表达,并检测组织内微血管密度（microvessel density,MVD）。结果 Western blot 结果显示,c-jun-shRNA组细胞VEGF蛋白表达较NC组及空白对照组明显下调（P<0.05）。裸鼠模型实验中,c-jun-shRNA组移植瘤体积为（720.85±72.10） mm³,质量为（0.42±0.04）g,MVD为11.69±3.30;NC组移植瘤体积为（1 196.81±90.69） mm³,质量为（0.80±0.08）g,MVD为32.56±7.33;空白对照组移植瘤体积为（1 203.76±100.42） mm³,质量为（0.83±0.05）g,MVD为35.45±4.87;c-jun-shRNA组种植瘤体积、质量、MVD较NC组和空白对照组低（P<0.05）。免疫组化检测结果显示,移植瘤组织中VEGF蛋白表达c-jun-shRNA组呈弱阳性,NC组及空白对照组组均呈强阳性。结论 c- jun基因沉默可抑制放射抗拒性鼻咽癌移植瘤生长及血管生成。     

PARP-1对鼻咽癌CNE-2细胞迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1［poly（ADP-ribose）polymerase-1,PARP-1］对鼻咽癌CNE-2细胞迁移、侵袭能力的影响。方法 将鼻咽癌CNE-2细胞分为空白对照组（CNE-2组）、转染阴性病毒对照组（NC组）、转染稳定沉默PARP-1基因组（LV组）和未照射组（CNE-2-0 Gy组）,4组细胞在照射前划痕、前3组给予10 Gy剂量照射,48 h后计算细胞迁移率、穿入下室细胞数,采用Western blot法检测PARP-1蛋白及Vimentin蛋白的表达。结果 照射后48 h,CNE-2组、NC组、LV组和CNE-2-0 Gy组的细胞迁移率分别为（79.37±5.75）%、（70.13±6.56）%、（20.83±10.91）%和（27.13±7.50）%;迁移穿入下室的细胞数分别为（60.00±2.66）个、（52.33±9.71）个、（13.67±3.51）个和（23.33±4.04）个,侵袭入下室细胞数分别为（33.00±2.00）个、（29.00±1.72）个、（6.67±2.52）个和（9.67±1.16）个;PARP-1蛋白相对表达量分别为1.00±0.00、1.02±0.04、0.47±0.05和0.47±0.06,Vimentin蛋白相对表达量分别为1.00±0.00、0.99±0.04、0.24±0.02及0.27±0.03;LV组细胞迁移率较CNE-2组及NC组降低,迁移及侵袭入下室的细胞数较少,PARP-1及Vimentin蛋白相对表达量下调,差异均有统计学意义（P<0.05）;LV组与CNE-2-0 Gy组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 PARP-1照射后激活可促进鼻咽癌CNE-2细胞迁移、侵袭。