红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的研究红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制和凋亡的诱导作用。方法在体外细胞培养下,采用不同质量浓度红三叶异黄酮和5-Fu处理MCF-7细胞,MTT法测定红三叶总异黄酮抑制MCF-7细胞增殖的量-效关系;TUNEL法、流式细胞术分析其细胞凋亡率和周期分布。结果红三叶总异黄酮对MCF-7细胞增殖的抑制作用随药物质量浓度提高和作用时间延长而更加明显,而在低质量浓度时却出现轻微促细胞增殖现象。TUNEL法、流式细胞术分析结果表明,红三叶总异黄酮能诱导MCF-7细胞凋亡,阻滞细胞于G2/M期,降低细胞增殖指数,且这种作用也存在剂量-效应关系。结论红三叶总异黄酮可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,具有抗肿瘤作用。     

SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株的构建及筛选

目的:构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株,为研究SLC7A11基因的表达沉默对肝癌发生发展的影响奠定基础。方法:针对SLC7A11基因的不同部位合成3个siRNA的寡核苷酸片段,分别将其克隆到真核表达载体p GPU6/GFP/Neo中。利用脂质体转染法分别将质粒导入肝癌LM3细胞,24小时后观察细胞内GFP表达情况,并通过real-time PCR及Western blot的方法比较各组细胞SLC7A11基因mRNA和蛋白的表达水平,然后用G418对转染细胞进行筛选培养。结果:经酶切分析及测序验证,成功构建了靶向沉默SLC7A11基因的真核表达质粒p GPU6-SLC7A11-siRNA;通过real-time PCR及Western blot的方法验证,成功筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株。结论:成功构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株,为进一步研究SLC7A11基因表达沉默对肝癌细胞发生发展的影响奠定了基础。     

SIRT6在原发性肝癌中的表达变化与抑瘤机制分析

SIRT6是Sirtuin家族的组成部分,是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）依赖的组蛋白去乙酰化酶。 SIRT6是肝脏葡萄稳态主调节者,通过对胰岛素/IGF1样信号（IIS）途径的影响,基于多个网络调控机制,实现对葡萄糖代谢的影响,对人体生命维系和控制肿瘤产生作用。本文笔者以SIRT6为出发点,分析其在原发性肝癌中的表达变化与抑瘤机制。     

川芎嗪衍生物对人阴茎海绵体平滑肌细胞游离钙浓度的影响

目的研究川芎嗪（TMP）衍生物（A3 A6）对人阴茎海绵体平滑肌细胞（PCSMC）胞质内游离钙离子（Ca2+）浓度的影响。方法采用新型Ca2＋荧光染色剂Fluo 3/AM负载人PCSMC,应用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）实时测定胞质内［Ca2＋］i变化。以母体川芎嗪和经典钙拮抗药维拉帕米 （Ver）为阳性对照,分别观察A3 A6对去甲肾上腺素（NE）诱导胞质内钙浓度升高的影响。结果在浓度0.2 mmol•L 1时,A3 A6对NE诱发的人PCSMC内［Ca2＋］i升高有明显抑制作用,抑制率分别为49.03%,54.83%,51.48%和50.31%,优于TMP（18.96%）,远大于Ver（16.51%）（P＜0.05）。结论A3 A6对人PCSMC电压依赖性钙通道均有抑制作用,能降低PCSMC胞质内Ca2+水平,其作用效果均比TMP强。     

猫爪草皂苷抑制乳腺癌的机制研究

目的探讨猫爪草皂苷对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用及对免疫功能的影响.方法四唑盐比色法、集落形成实验测定猫爪草皂苷对体外培养的MCF-7细胞生长的抑制率;DNA Ladder、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;不同方法测定猫爪草皂苷对正常小鼠免疫功能的影响.结果猫爪草皂苷抑制MCF-7细胞生长和集落形成,呈量-效关系;DNA Ladder、FCM显示其可有效诱导细胞凋亡;猫爪草皂苷灌胃给药(2.96,5.93,11.86 g生药·kg-1)明显升高雌性小鼠脾指数和淋巴细胞转化率,增加NK细胞活性.结论猫爪草皂苷可提高正常小鼠免疫调节功能,明显抑制MCF-7增殖诱导其凋亡.     

4R危机管理理论在传染病专科医院药房管理中的实践

目的 本研究通过在深圳市某三甲传染病医院药房管理中应用4R危机管理理论,探讨在突发公共卫生事件下医院药房的危机管理策略。方法 以4R危机管理理论为指导,依托医院已有的疫情防控管理体系,从预案、管理制度、人员配置、培训等方面着手,减少危机的冲击力和影响力,事先做好处置危机的准备,灵活应对已发生的危机,以及尽快恢复,从而全面提升危机管理水平。结果 通过优化各项制度流程及人力资源配置,有效保障了医院药房突发公共卫生事件下各项工作的正常开展。结论 基于4R危机管理理论的管理措施,指导医院药房抵御突发公共卫生事件冲击发挥了关键作用,为同行提供了借鉴经验。     

ABC-VED分类法在传染病医院药库药品管理的应用

摘 要 目的： 探讨ABC VED分类法在传染病医院药品库存管理的应用效果。方法: 基于2012年数据应用ABC VED分类法对药库库存药品进行分类管理和采购。采集2012～2014年医院药库药品出入库数据,统计分析方法实施前后药库月周转率和缺药率变化。结果: 药库药品基于ABC VED矩阵分析实施分级管理后,月库存周转率由2012年的约（143.4±10.1）%显著提升至2013年的（190.1±8.9）%和2014年的（208.8±11.5）%（P<0.05）;缺药率由2012年的约(0.62±0.04)%显著下降至2013年的（0.44±0.03）%和2014年的（0.39±0.04）%（P<0.05）。结论:基于VED的ABC分类法可以降低药品库存成本和减少缺药情况。     

BLCAP基因RNA过编辑对肝癌细胞增殖的影响

目的研究BLCAP基因RNA过编辑对肝癌SMMC7721、Focus细胞的生长增殖能力的影响,并探讨其在肝癌发生发展的作用。方法采用半定量PCR的方法分析BLCAP基因在11株肝癌细胞以及2株正常肝脏细胞中的表达情况,选出2株BLCAP基因相对低表达的肝癌细胞株。以基因转染技术,将空质粒(pc DNA3.1,对照组)、BLCAP_WT(野生型)和BLCAP_RDD(过编辑型)质粒(实验组)分别转染肝癌细胞株,通过Western blot法检验转染效率。利用CCK-8生长曲线试验和平板克隆形成实验检测肝癌细胞株的增殖能力。结果半定量PCR结果显示BLCAP基因在肝癌SMMC7721、Focus细胞中的表达量相对较低。Western blot的结果显示,实验组细胞BLCAP基因的蛋白表达水平较对照组细胞明显增高(P0.05),表明转染较成功。CCK-8生长曲线试验和平板克隆形成实验的结果显示,肝癌SMMC7721和Focus细胞在转染BLCAP_RDD质粒后,其增殖能力较空质粒对照组及BLCAP_WT组细胞明显增强(P0.05)。结论 BLCAP基因过编辑可促进肝癌SMMC7721和Focus细胞的增殖,提示其在肝癌细胞中的过编辑与肝癌的发生发展密切相关。     

川芎嗪甲酸对平滑肌细胞游离钙浓度的影响

研究川芎嗪代谢产物川芎嗪甲酸（CTPZ）对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（PCSMC）胞质内游离钙离子浓度的影响。方法：用新型Ca^2＋荧光染色剂Fluo-3／AM负载大鼠PCSMC,细胞分为氯化钾（KCl）和去甲肾上腺素（NE）作用组,应用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）实时测定胞质内[Ca^2＋]的变化,分别观察不同浓度的CTPZ对高钾和NE诱导胞质内钙浓度升高的影响,并与母药川芎嗪作用相比。结果：静息状态下,CTPZ对大鼠PCSMC胞质内[Ca^2＋]无明显影响。1,10,100μmol·L^-1 CTPZ能显著抑制高钾诱发的细胞内的钙浓度升高的影响,抑制率分别为（39．84-4．3）％,（49．2±3．6）％,（58．2±3．9）％。也能抑制1μmol·L^-1 NE诱发钙库释放的细胞内[Ca^2＋]升高,抑制率分别为（20．8±3．9）％,（32．3±2．5）％,（43．7±3．2）％。结论：CTPZ对大鼠PCSMC电压依赖性钙通道和细胞内钙库释放的抑制作用,能降低PCSMC胞质内[Ca^2＋]水平,其作用效果比母药川芎嗪佳。     

CENPK基因过表达载体的构建及鉴定

[目的]构建着丝粒蛋白K (cetromere protein K,CENPK)基因过表达载体,并对其在肝癌FOCUS细胞中的表达进行鉴定.[方法]①从人肝癌组织中扩增出CENPK目的基因并将其克隆到pCMV-3Tag-3载体上,构建真核表达载体pCMV-CENPK;②利用脂质体法将构建好的pCMV-CENPK真核表达载体转染肝癌FOCUS细胞,并用G418筛选出CENPK基因稳定过表达的肝癌FOCUS细胞株;(③通过Real-time PCR及Western Blot的方法对筛选出来的细胞进行鉴定.[结果]①经双酶切分析及测序验证,成功构建了真核表达载体pCMV-CENPK.②通过Real-time PCR及Western blot的方法鉴定,CENPK基因在筛选出来的肝癌FOCUS细胞株中成功过表达.[结论]成功构建真核表达载体pCMV-CENPK并使其在肝癌FOCUS细胞中稳定过表达,为进一步研究CENPK基因在肝癌发生发展中的作用奠定了基础.