APA-3T3细胞微囊的深低温保存

目的:通过优选冻存液的成份和浓度,建立低温保存APA微囊化小鼠成纤维细胞(3T3细胞)的方法。方法:用海藻酸钙-多聚赖氨酸-海藻酸钙微囊(APA)包裹3T3细胞制成APA-3T3细胞微囊。以高糖DMEM培养液为基础冻存液,分别加入不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)或牛血清白蛋白(BSA)。分别将不同的冻存液加入APA-3T3中。按程序控制降温梯度,置于液氮中保存。快速复温后,光镜下观察APA-3T3的形态、细胞活率及膜通透性。结果:①10%DMSO组的微囊内细胞活率降低最少,细胞活率达(75.68±1.54)%,P<0.01。微囊完好率达到(94.48±0.90)%,P<0.01。②与其它组相比,4%BSA组的微囊内细胞活率降低程度最小,活率达(73±1.26)%,P<0.01。微囊完好率最高,为(85.1±0.82)%,P<0.01。③加入不同成份和浓度的冻存液对微囊的通透性没有明显影响。结论:在冻存液中加入10%DMSO和4%BSA,可在低温保存的过程中较好地保护细胞的存活及微囊的完整性。     

经皮加压钢板治疗股骨粗隆间骨折

目的:探讨经皮加压钢板(percutaneous compression plate,PCCP)在治疗股骨粗隆间骨折的临床疗效。方法:自2008年9月至2009年3月应用PCCP治疗股骨粗隆间骨折24例,其中男13例,女11例。致伤原因:交通伤8例,摔伤12例,高处坠落伤4例。骨折按照Evans分型:I型6例,Ⅱ型10例,Ⅲ型4例,Ⅳ型4例;我们通过记录手术时间、术中出血量、术后并发症、骨折愈合情况和术后髋关节功能Harris评分来评价临床疗效。结果:手术时间55～85min,平均65min;出血量50～160ml,平均85ml。所有病例均获得5～11个月随访,平均随访9.3个月。所有患者骨折均愈合,骨折愈合时间2～5个月,平均9.5W。无髋内翻、股骨头切割、旋转移位、感染、内固定断裂、松动等并发症发生。患髋Harris评分70～97分,平均84分。结论:PCCP治疗股骨粗隆间骨折具有生物力学更合理、操作简便、创伤小、恢复快、固定有效牢靠、骨折愈合率高、并发症少的特点,尤其适用于伴有骨质疏松的老年患者。     

内科胸腔镜窄带成像技术联合冷冻活检对不明原因胸腔积液的诊断价值

目的 探讨内科胸腔镜窄带成像技术（NBI）联合胸膜冷冻活检对不明原因胸腔积液的诊断价值。方法 选择113例不明原因胸腔积液患者,应用内科胸腔镜对胸膜病变进行检查,检查过程中,先通过内科胸腔镜白光观察胸膜表面情况,再切换至NBI模式对胸膜表面进行观察,分析不同病变在内科胸腔镜白光及NBI下的形态表现,并在白光及NBI下分别对胸膜表面怀疑病变的部位进行常规钳夹活检及冷冻活检,对比两组患者活检标本诊断准确率、敏感度、特异度及取材直径的情况,同时分析不同活检方式的安全性及并发症情况。结果 NBI联合冷冻活检组的胸膜疾病诊断敏感度、特异度及准确率均高于白光联合冷冻活检组,两组比较,差异均具有统计学意义（P=0.047、P=0.024和P=0.015）;NBI联合钳夹活检组的胸膜疾病诊断敏感度和准确率高于白光联合钳夹活检组,两组敏感度比较,差异有统计学意义（P=0.033）,两组准确率比较,差异无统计学意义（P=0.079）。NBI联合钳夹活检组特异度明显低于白光联合钳夹活检组,差异有统计学意义（P=0.041）。通过NBI对胸膜表面血管情况进行分析,病变血管≥2根的冷冻活检灵敏度、特异度及准确率...     

富铬中药制剂和富铬井水对四氧嘧啶糖尿病大鼠模型各种生化指标的影响

目的:观察富铬中药制剂和富铬井水对四氧嘧啶糖尿病大鼠模型血糖及脑、肝抗氧化能力变化、血清各种生化指标的影响,分析铬与糖尿病的关系。方法:实验于2006-07-04/29在右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室进行。选用清洁级Wistar大白鼠40只,雄雌不拘,鼠龄60d,以随机数字表法分成4组,即含铬井水组、富铬中药组、模型组、正常组,每组10只。含铬井水组给予含铬井水,每笼5只大鼠上午150mL,下午150mL,自由饮用;富铬中药组用富铬中药制剂(商品名舒糖宝,由荔枝、沙田柚、番石榴等果类提取制成,富含铬元素),按每鼠2mL,加到自来水瓶中,自由饮用每天饮完;模型组和正常组自来水自由饮用。1周后,分别收集尿液,测定各鼠每天尿量、蛋白和尿糖。测定造模前、成模后和治疗结束时血糖含量。连续治疗2周后,麻醉下处死大鼠,取大脑、肝脏在冷冻条件下匀浆,用生理盐水制成100g/L匀浆,检测血清尿素、丙氨酸氨基转移酶、三酰甘油、总胆固醇、肌酐,脑、肝匀浆超氧阴离子自由基、丙二醛、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶含量,比较组间差异。结果:全部大鼠进入结果分析。①含铬井水组、富铬中药组血糖较治疗前明显下降(P<0.001),模型组下降不明显(P>0.05)。②含铬井水组血清尿素、肌酐含量高于其他各组(P<0.05～0.01);含铬井水组、富铬中药组脑超氧阴离子自由基清除率高于正常组和模型组,含铬井水组、富铬中药组、正常组肝超氧阴离子自由基清除率、肝谷胱甘肽含量均高于模型组,差异有显著性意义(P<0.05～0.01)。③含铬井水组、富铬中药组、模型组肝丙二醛含量均高于正常组,以模型组最高(P<0.01);含铬井水组、富铬中药组、正常组肝谷胱甘肽过氧化物酶低于模型组(P<0.01),含铬井水组、富铬中药组、正常组3组差异无显著性意义(P>0.05);④富铬中药组大鼠尿量明显低于模型组(P<0.05),与正常组差异无显著性意义(P>0.05);各组血清丙氨酸氨基转移酶活力差异无显著性意义(P>0.05);正常组尿糖含量明显低于其他3组(P<0.01)。⑤正常组三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、脑丙二醛含量明显低于其他3组(P<0.05～0.01),正常组脑谷胱甘肽明显高于其他3组(P<0.01)。⑥治疗药物富铬中药制剂、富铬井水中铬元素含量明显高于当地自来水和其他井水(P<0.001)。结论:富铬中药制剂和矿区某井水含丰富铬元素,两者均可明显降低四氧嘧啶糖尿病大鼠模型血糖、三酰甘油水平,提高脑、肝超氧阴离子自由基清除力和抗氧化能力。铬的作用可能是富铬中药制剂的降糖机制之一。     

感染性心内膜炎患者病原菌及其耐药率的分析

目的 通过对感染性心内膜炎(IE)患者病原菌及其耐药率的分析,探讨IE病原菌的变迁及抗菌药物的合理应用情况.方法 对1997年1月至2006年12月收治的207例IE患者的病原菌情况进行回顾性分析.按住院时间分为Ⅰ组(2002年1月至2006年12月)及Ⅱ组(1997年1月至2001年12月),其中Ⅰ组77例,Ⅱ组130例.结果 血细菌培养阳性率47.83%,其中Ⅰ、Ⅱ组阳性率分别为38.96%和53.08%.链球菌在致病菌中的比例亦由Ⅱ组的52.17%下降到Ⅰ组的33.33%.而金黄色葡萄球菌的比例则由15.94%上升到23.33%.链球菌对青霉素G耐药率低,但近年来已由19.44%上升到30.00%.结论 血细菌培养阳性率近年来有所下降,链球菌仍然是IE的主要病原菌,对青霉素G耐药率较低,但近年来已有所上升.金黄色葡萄球菌的比例则上升.     

富铬中药制剂和富铬井水对四氧嘧啶糖尿病大鼠模型各种生化指标的影响

目的：观察富铬中药制剂和富铬井水对四氧嘧啶糖尿病大鼠模型血糖及脑、肝抗氧化能力变化．血清各种生化指标的影响，分析铬与糖尿病的关系。方法：实验于2006—07—04／29在右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室进行。选用清洁级Wistar大白鼠40只，雄雌不拘，鼠龄60d，以随机数字表法分成4组，即含铬井水组、富铬中药组．模型组、正常组，每组10只。含铬井水组给予含铬井水，每笼5只大鼠上午150mL，下午150mL，自由饮用；富铬中药组用富铬中药制剂（商品名舒糖宝，由荔枝、沙田柚、番石榴等果类提取制成，富含铬元素），按每鼠2mL，加到自来水瓶中，自由饮用每天饮完；模型组和正常组自来水自由饮用。1周后，分别收集尿液，测定各鼠每天尿量、蛋白和尿糖。测定造模前、成模后和治疗结束时血糖含量。连续治疗2周后，麻醉下处死大鼠，取大脑、肝脏在冷冻条件下匀浆，用生理盐水制成100g／L匀浆，检测血清尿素、丙氨酸氨基转移酶、三酰甘油、总胆固醇、肌酐，脑、肝匀浆超氧阴离子自由基、丙二醛、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶含量，比较组间差异。结果：全部大鼠进入结果分析。①含铬井水组、富铬中药组血糖较治疗前明显下降（P〈0．001），模型组下降不明显（P〉0．05）。②含铬井水组血清尿素、肌酐含量高于其他各组（P〈0．05-0．01）；含铬井水组、富铬中药组脑超氧阴离子自由基清除率高于正常组和模型组，含铬井水组、富铬中药组、正常组肝超氧阴离子自由基清除率、肝谷胱甘肽含量均高于模型组，差异有显著性意义（P〈0．05-0．01）。③含铬井水组、富铬中药组、模型组肝丙二醛含量均高于正常组，以模型组最高（P〈0．01）；含铬井水组、富铬中药组、正常组肝谷胱甘肽过氧化物酶低于模型组（P〈0．01），含铬井水组、富铬中药组、正常组3组差异无显著性意义（P〉0．05）；④富铬中药组大鼠尿量明显低于模型组（P〈0．05），与正常组差异无显著性意义（P〉0．05）；各组血清丙氨酸氨基转移酶活力差异无显著性意义（P〉0．05）；正常组尿糖含量明显低于其他3组（P〈0．01）。⑤正常组三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、脑丙二醛含量明显低于其他3组（P〈0．05-0．01），正常组脑谷胱甘肽明显高于其他3组（P〈0．01）。⑥治疗药物富铬中药制剂、富铬井水中铬元素含量明显高于当地自来水和其他井水（P〈0．001）。结论：富铬中药制剂和矿区某井水含丰富铬元素，两者均可明显降低四氧嘧啶糖尿病大鼠模型血糖、三酰甘油水平，提高脑、肝超氧阴离子自由基清除力和抗氧化能力。铬的作用可能是富铬中药制剂的降糖机制之一。     

整合素连接激酶在大鼠慢性移植肾肾病中的作用与机制

目的探讨整合素连接激酶(ILK)在慢性移植肾肾病(CAN)中的作用与机制。方法实验组肾移植受者为雄性Lewis大鼠40只,供者为雄性F344大鼠40只,依照标准的慢性移植肾肾病大鼠模型要求行左肾原位移植。对照组分别为行单纯右肾切除的Lewis大鼠及F344大鼠各25只。于术后4、8、12、16及24周时分批处死大鼠,同时做肾功能与组织学检测,免疫组织化学与蛋白印迹法测定肾组织中ILK的表达,逆转录聚合酶链(RT-PCR)法检测ILK mRNA的表达,免疫组织化学方法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达。结果CAN大鼠移植4周时肾间质可见单个核细胞浸润,12周时可见血管平滑肌细胞的移行与增殖,24周时可见轻度肾间质纤维化、血管硬化及管腔狭窄。CAN大鼠肾组织中ILK及ILK mRNA表达水平显著增高,且随着移植时间的延长有逐渐增高趋势。CAN大鼠肾移植术后8周前肾小管间质及肾小动脉MMP-9表达水平均显著高于同时段LEW对照组及F344对照组,16周后显著降低。Spearman等级相关分析结果显示:CAN大鼠肾组织中ILK表达水平与24 h尿蛋白定量、血清肌酐水平、肾间质单个核细胞浸润程度、肾小动脉平滑肌细胞数量、肾间质纤维化程度等呈显著正相关,与8周前MMP-9表达水平呈正相关,12周后无显著相关性。结论ILK在慢性移植肾肾病病理变化中发挥重要作用,移植早期肾小管间质及肾小动脉中MMP-9表达上调与ILK的作用机制有关。     

赶黄草花与茎、叶HPLC指纹图谱比较

目的: 建立赶黄草花的HPLC指纹图谱,并对赶黄草花、茎、叶不同部位的指纹图谱进行比较,寻找赶黄草不同部位质量评价与控制方法。 方法: 采用 ODS柱,流动相乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速0.8 mL ·min^-1,柱温30 ℃,检测波长280 nm,进样量10 μL。 结果: 赶黄草花共标示出15个共有峰,其中5号峰为芦丁峰,9号峰为槲皮素峰;10批赶黄草花的相似度在0.925~0.960。赶黄草花分别与茎、叶对比,花的共有峰数目最多,茎最少;茎、叶、花指纹特征峰相对含量有较大差异,花所含特征峰成分的相对含量基本高于茎和叶。 结论: 该方法准确可靠,重复性好,为赶黄草各部位药材质量评价与控制提供参考;为保证药材质量,建议赶黄草药材在花期采收。     

利用重定位策略从中药中发现L-型钙离子通道作用降压药

该文以来源于NCBI数据库中对新西兰兔心脏L-型钙离子通道具有抑制作用的12个化合物为研究对象,利用HipHop定性药效团模型构建方法,建立L-型钙离子通道拮抗剂的药效团模型,利用数据库搜索方法对药效团模型进行优劣评价,同时,以所得的最优药效团模型对Drugbank和TCMD进行筛选,通过匹配程度和文献验证分别对从Drugbank中筛选所得的已上市药物进行降压作用重定位和从TCMD中筛选所得中药有效成分进行降压作用评价。结果获得最优药效团模型具有2个氢键受体和4个疏水基团,其综合评价指数CAI为2.78,从Drugbank中筛选的已上市药物93个,从TCMD筛选的中药有效成分285个。该文所构建的定性药效团具有一定的可靠性,可用于活性化合物筛选;Drugbank中筛得化合物,如普伐他汀,具有潜在的L-型钙离子通道抑制作用;TCMD筛选的中药化学成分,如白花前胡素Ⅲ、牛蒡苷元是潜在的降压药物。该策略有助于从中药中开展L-型钙离子通道的药物重定位研究。     

细毡毛忍冬血清药物化学初步研究

目的：对细毡毛忍冬乙醇提取物进行血清药物化学研究,为筛选确定细毡毛忍冬的药效成分奠定基础。方法：建立细毡毛忍冬乙醇提取物及大鼠含药血清、空白血清的HPLC指纹图谱分析方法;通过比较细毡毛忍冬乙醇提取物、含药血清及空白血清指纹图谱,确定其血清移行成分。结果：在含药血清中发现了8个移行成分,其中2个为原型成分,6个是代谢产物。结论：血中移行成分和代谢产物可能成为细毡毛忍冬的体内直接作用物质,对其更深入的研究有助于探索其药效物质基础及作用机制。