左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠前额叶皮层IR/IRS-1信号通路和能量代谢的影响

目的 观察左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠前额叶皮层胰岛素信号通路相关蛋白表达及能量代谢的影响.方法 建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型.将大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)组和左归降糖解郁方高、中、低剂量组,各组灌胃给予相应药物4周后,尾尖采血测量大鼠空腹血糖,旷场实验和强迫游泳实验评价大鼠抑郁样行...     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马齿状回神经元树突及Wnt5a/RhoA信号通路的影响

目的 探讨左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的可能作用机制。方法 60只大鼠随机分为正常组、模型组、无翅型MMTV整合位点家族成员5a (Wnt5a)激动剂组、左归降糖解郁方组、左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组,每组12只。除正常组外,其余各组大鼠采用高脂饲料饲养、链脲佐菌素注射和慢性温和不可预知应激联用法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型。造模成功后Wnt5a激动剂组大鼠给予双侧海马立体定位注射Wnt5a激动剂Foxy-5各5μl,连续7天;左归降糖解郁方组给予左归降糖解郁方20.52 g/(kg·d)灌胃;左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组进行灌胃给药和双侧海马立体定位注射Wnt5a抑制剂Box5,给药剂量和注射方法同上。正常组和模型组给予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。各组灌胃均连续4周。干预结束后采用强迫游泳实验(不动时间)和旷场实验(活动次数)评价大鼠的抑郁样行为;检测大鼠的血糖和胰岛素含量,并计算胰岛素抵抗指数;采用高尔基染色观察大鼠海马齿状回神经元的树突形态;采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)注射及免疫荧光检测齿状回神经元增殖水平;采用RT-qPCR和Western ...     

冠心病气虚血瘀证模型大鼠与临床患者舌象特征的比对研究

目的 本研究旨在寻求CHD气虚血瘀证病证结合动物模型与CHD气虚血瘀证临床患者舌象共通的特异性指标。方法 使用matlab软件将冠心病气虚血瘀证临床患者舌图像进行分割并提取相关特征,利用RF模型分类识别临床全样本及动物全样本,制作RF预测模型并评估预测价值,计算各指标AUC以判定其诊断价值。结果 与CHD气虚血瘀证临床诊断密切相关的舌象特异性指标有4个,分别是M₁、M₂、M₃、M₅。采用RF分类判别结果提示模型预测FPR为15.2%,TPR为83.3%,最佳界值为0.5,敏感度为81.4%,特异性为76.0%,准确率为85.7%,圆周卷积为0.6991,AUC为0.8151。M₁、M₂、M₅的诊断价值较高(AUC分别为0.9040、0.9254、0.9610),M₃的诊断价值中等(AUC=0.7708)。在大鼠模型上M₁、M₂、M₃、M_5...     

安脑平冲方调控BDNF-Nrf2信号通路对血红蛋白损伤神经元发挥保护作用

目的 研究安脑平冲方对血红蛋白(Hb)损伤神经元BDNF-Nrf2信号通路的影响及其保护作用。方法 培养SD大鼠皮质神经元，使用Hb(10μmol/L)诱导建立Hb损伤神经元模型。设正常组、模型组、空白血清组(10%)、安脑平冲方组(10%)和去铁胺组(10μmol/L)。采用CCK-8法检测各组细胞活力，特异性FeRhoNox^TM-1荧光探针检测各组神经元内亚铁离子的含量变化，活性氧(ROS)荧光染色检测神经元内ROS水平，Western blot检测脑源性神经营养因子(BDNF)、核相关因子2(Nrf2)、胱氨酸/谷氨酸转运蛋白(xCT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组和空白血清组的细胞存活率显著降低(P<0.01),Fe²⁺、ROS荧光强度值和BDNF、Nrf2蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05),而xCT、GPX4蛋白的表达显著降低(P<0.01);予含药血清干预后，安脑平冲方组的细胞存活率较模型组和空白血清组明显增加(P<0.01),Fe^2+...     

乳痛软坚片抗炎镇痛及调节免疫药效作用的实验研究

目的：探讨乳痛软坚片抗炎、镇痛及调节免疫的药效作用。方法：通过小鼠扭体实验、小鼠热板法实验,采用醋酸扭体及热板致痛模型,以扭体次数、痛域值为检测指标,观察乳痛软坚片的镇痛作用;通过大鼠肉芽肿实验、大鼠足肿胀实验,采用棉球植入诱导大鼠肉芽肿增生、角叉菜胶致炎模型,以肉芽重量、足跖肿胀度为检测指标,观察乳痛软坚片抗炎作用;通过小鼠血清溶血素实验、小鼠碳粒廓清实验,采用腹腔注射5%氯化钠溶液鸡红细胞混悬液、小鼠尾静脉注射20%印度墨汁（0.1 mL/10 g）制造小鼠免疫抑制模型,以血清溶血素、廓清指数（K）、吞噬指数（α）为检测指标,观察乳痛软坚片的调节免疫作用。结果：扭体实验中,乳痛软坚片高剂量组小鼠扭体潜伏期长于模型组,扭体次数少于模型组（P<0.01或P<0.05）;乳痛软坚片中剂量组小鼠扭体次数少于模型组（P<0.05）。热板法实验中,乳痛软坚片组高、中剂量组小鼠给药后1、2、3 h痛域值高于模型组（P<0.01或P<0.05）。大鼠肉芽肿实验中,乳痛软坚片组高、中、低剂量组大鼠肉芽质量均低于模型组（P<0.01或P<0.05）。大鼠足肿胀...     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨紫菀散对慢性支气管炎气道炎症的干预作用

目的 观察紫菀散对慢性支气管炎气道炎症的干预作用,并基于Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)/髓分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)/核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路探讨其作用机制。方法 60只健康成年雄性SD大鼠随机分为6组,每组10只,除正常组外均采用气管内滴注脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)的方法建立慢性支气管炎模型。醋酸地塞米松组给予0.075 mg·kg^-1醋酸地塞米松灌胃,每天1次;紫菀散低、中、高剂量组分别给予1.5、3.0、6.0 g·kg^-1紫菀散灌胃,每天1次;模型组、正常组给予等量生理盐水灌胃。采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-...     

从“肝玄府到脑玄府”论治脑出血后脑水肿

脑出血是具有较高发病率、致残率和病死率的一种疾病,严重危害人类的健康。脑出血后脑水肿临床上病情复杂多变,可加重原发脑出血疾病。因此,积极控制脑水肿对脑出血的治疗及康复具有重要意义。该文根据脑出血患者脑水肿的临床表现,提出从肝玄府到脑玄府,依据“气津血宜宣通”的治疗原则,采用疏肝行气通窍、化痰祛瘀清脑、质重潜降镇魂、养肝柔肝缓急等治法对脑出血后脑水肿的证治规律进行探究,以期为脑出血后脑水肿的临床治疗提供思路。     

左归降糖解郁方促进糖尿病并发抑郁症大鼠的海马齿状回神经干细胞的自我更新并激活Shh信号通路

目的 研究左归降糖解郁方调节糖尿病并发抑郁症大鼠海马Shh信号通路,改善齿状回神经干细胞自我更新的机制。方法 建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为5组,16只/组：模型组、阳性药（二甲双胍+氟西汀）组、左归降糖解郁方高、中、低剂量组;另设健康SD大鼠为正常组。其中,左归降糖解郁方高、中、低剂量组和阳性药组分别给予相应药物,对照组和模型组灌胃给予等体积蒸馏水。给药结束后,采用血糖试纸检测大鼠血糖,采用强迫游泳实验和水迷宫实验检测大鼠抑郁样行为和学习记忆功能,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清瘦素水平。采用双重免疫荧光法检测海马齿状回Nestin和Brdu蛋白表达;采用Western blot法检测海马神经干细胞自我更新标（P<0.01）志物及Shh信号蛋白的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠血糖和瘦素水平显著升高（P<0.01）,强迫游泳实验的不动时间显著延长（P<0.01）,水迷宫实验中动物登台时间明显延长,寻台时间明显缩短,穿台次数明显减少（P<0.01）;海马齿状回Nestin和Brdu表达显著减少（P<0.01）,Cyclin D1、SOX2、Shh...     

益生菌调节肠道菌群对糖尿病并发抑郁症大鼠血糖及抑郁样行为的影响

目的探讨益生菌调节肠道菌群对糖尿病并发抑郁症大鼠血糖及抑郁样行为的影响。方法将24只大鼠分为正常对照组、糖尿病并发抑郁症(DD)组和益生菌组, 每组8只。通过高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素(每只60 mg/kg)诱导, 给予慢性不可预计温和应激(CUMS)刺激28 d建立DD大鼠模型, 同时给予益生菌(双歧杆菌联合乳酸菌)重建其肠道菌群。每周称量大鼠体重的同时进行空腹血糖(FPG)检测, 采用强迫游泳实验和矿场实验检测各组大鼠抑郁样行为, 采用酶联免疫吸附测定法检测促炎性细胞因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)相关蛋白[促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇]及脂多糖(LPS)在血清中的含量;采用16s rRNA对各组大鼠肠道内容物微生物菌群进行测序分析。两组之间比较采用独立样本t检验, 多组之间比较采用单因素或双因素方差分析。结果与对照组比较, DD组大鼠FPG升高并表现出明显抑郁样行为(静止时间增加、水平活动降低)和HPA亢进[功能相关的蛋白(CRH、A...     

左归降糖解郁方调控经典Wnt信号改善糖尿病并发抑郁症海马神经干细胞增殖与分化研究

目的 研究左归降糖解郁方调控模拟糖尿病并发抑郁症脑环境下的体外海马神经干细胞增殖与分化作用及分子机制。方法 纯化和培养SD大鼠海马神经干细胞并通过标记巢蛋白（Nestin）进行荧光鉴定。取第3代海马神经干细胞进行实验，分为正常组、模型组、空白血清组、左归降糖解郁方含药血清组、左归降糖解郁方含药血清+海马无翅基因3a(recombinant wingless type MMTV integration site family member 3a,Wnt3a)信号抑制剂XAV-939组。在干细胞培养液中添加葡萄糖和皮质酮模拟糖尿病并发抑郁症脑环境进行造模，空白血清组和左归降糖解郁方含药血清组于造模同期分别给予不同血清。干预18 h后，采用WST-1检测干细胞活力，采用Brdu免疫荧光结合高内涵细胞成像技术评价干细胞的增殖能力，分别采用双皮质素（doublecortin,DCX）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、神经元核抗原（neuron specific nuclear protein,NeuN）免疫荧光评估干细胞的分化能力，采...