基于瘀毒理论与细胞胞葬的关系探讨动脉粥样硬化易损斑块的病机

动脉粥样硬化是一种以病态血管细胞和凋亡细胞碎片产生病理性蓄积形成的动脉闭塞为特征的血管疾病,动脉粥样硬化易损斑块是诱发严重血栓性心血管事件的重要病理基础,对于其病因病机的探讨一直是心血管研究领域的热点问题。细胞胞葬是一种新型的程序性死亡细胞清除方式,指巨噬细胞将凋亡细胞吞噬、降解,防止继发性坏死的过程,是机体生理过程中一种关键的稳态机制。在病理状态下,胞葬功能障碍造成凋亡细胞、坏死碎片病理性蓄积,导致继发性细胞坏死发生和细胞内毒性内容物不断释放,诱导炎症消退障碍和胆固醇代谢紊乱,与动脉粥样硬化易损斑块的发生发展密切相关。“瘀毒”理论是中医学阐释动脉粥样硬化发生发展的重要学说,动脉粥样硬化始于血液凝滞不畅的病理状态,血凝日久,成瘀生毒,瘀毒交互为患,壅塞血脉,从而形成斑块附着脉管,而“瘀毒致变”之论是对急性心血管事件发病和疾病演变的的重要认识。从中医理论角度,细胞胞葬的病理生理机制与中医“瘀毒”的病因病机存有相似之处。因此,该文以“瘀毒”理论为切入点,探讨细胞胞葬在动脉粥样硬化易损斑块中的作用机制,并提出运用解毒活血法调控细胞胞葬防治动脉粥样硬化易损斑块的研究策略,旨在为解毒活血法防治动...     

传统抗疟中药青蒿-常山抗过早搏动的网络药理学研究

目的基于网络药理学的研究方法探讨传统抗疟中药青蒿-常山抗过早搏动(premature beat)的作用机制。方法运用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP数据库)和相关文献检索并筛选青蒿-常山活性化学成分及相关靶点蛋白,通过Uniport数据库将靶点蛋白名转化为靶点基因名。构建青蒿和常山活性化学成分-靶点网络。在Gene Cards和OMIM数据库检索过早搏动疾病的相关靶点基因,并构建疾病-靶点网络。筛选出青蒿-常山活性化学成分直接作用于过早搏动疾病的靶点。将直接作用靶点输入STRING数据库进行蛋白相互作用,获得并分析蛋白互作网络;将直接作用靶点输入DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果筛选出青蒿22个活性化学成分,常山18个活性化学成分。获得青蒿靶点蛋白510个,常山靶点蛋白202个,通过Uniport数据库转化为基因名并去除重复获得青蒿-常山靶点基因110个。在OMIM,Gene Cards数据库中筛选出过早搏动疾病靶点基因971个。进一步筛选出青蒿-常山直接作用靶点43个。通过STRING数据库的蛋白互作网络,筛选出关键靶点。运用DAVID数据库的GO功能分析获得244个富集结果,涉及生物过程、细胞组分、分子功能; KEGG分析获得50个相关通路。结论通过网络药理学对传统抗疟中药青蒿-常山的研究表明,青蒿-常山可通过多成分-多靶点-多通路对过早搏动具有治疗作用,为进一步解释和阐述青蒿常山抗过早搏动可能的作用机制奠定了基础。     

免疫炎症反应对高血压合并新型冠状病毒肺炎的影响

2019年12月,由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome-coronavirus-2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)暴发,对人类造成了巨大的威胁,截至2020年10月11日,W...     

桂枝汤桂枝白芍不同比例配伍对盐敏感高血压大鼠氧化应激和心肌细胞凋亡的影响

目的：探讨桂枝白枝汤桂芍不同比例配伍对盐敏感高血压大鼠氧化应激和心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法：雄性Dahl盐敏感大鼠采用高盐饲料造模,随机分为低盐空白对照组（NS组）、高盐模型对照组（HS组）、桂芍1∶1组（桂枝汤中桂枝∶白芍量1∶1）、桂芍1∶2组（桂枝汤中桂枝∶白芍量1∶2）、桂芍2∶1组（桂枝汤中桂枝∶白芍量2∶1）,每组8只。药物连续干预4周后测量各组大鼠血压并观察心肌形态学变化,同时检测大鼠心肌组织8-OHdG含量及Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、MnSOD蛋白表达水平。结果：与NS组大鼠比较,HS组大鼠平均动脉压、LVPWd、LVmass显著升高（P<0.01）,心肌组织形态出现明显病理改变,心肌细胞排列紊乱,有明显水肿和大量炎性细胞浸润,心肌细胞凋亡率显著增加（P<0.01）,心肌组织中的8-OHdG阳性细胞数显著增加（P<0.01）,Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,Bcl-2、MnSOD蛋白表达水平显著下降（P<0.01）。与HS组比较,各给药组大鼠平均动脉压、L...     

桂枝汤调节LIF改善心脏交感神经胆碱能性质转化的作用机制

目的:探讨桂枝汤抑制心力衰竭心脏交感神经胆碱能性质转化的可能作用机制。方法:36只Dahl盐敏感(DS)大鼠随机分为模型组和桂枝汤不同桂芍比例组(桂芍比分别为1∶1、2∶1、1∶2,即桂枝汤1、2、3组),另取9只SS-13^BN大鼠设为空白对照组。心脏超声检测大鼠心脏左心室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)指标变化,RT-PCR检测大鼠左心室白血病抑制因子(LIF)mRNA的表达,Western Blot和双抗体免疫荧光分别检测大鼠左心室酪氨酸羟化酶(TH)、胆碱乙酰转移酶(CHAT)蛋白及荧光表达。结果:与空白对照组比较,模型组LVEF、LVFS水平降低,LIF mRNA表达上升,TH蛋白和TH+阳性神经纤维表达下降,TH+/CHAT+阳性神经纤维水平下调(P<0.01)。与模型组比较,桂枝汤1组、2组LVEF、LVFS水平增加,LIF mRNA表达下降,TH蛋白和TH+阳性神经纤维表达上升,TH+/CHAT+阳性神经纤维水平上调(P<0.01,P<0.05),其中桂枝汤1组作用最佳。结论:桂枝汤桂芍1∶1、2∶1配伍可抑制心脏交感神经胆碱能性质转化,提高交感神经功能学支配,改善心功能,其机制可能与调节心脏LIF的表达有关。     

桂枝汤桂枝-白芍不同比例配伍通过调节TGF-β1/Smads信号通路及慢性炎症改善盐敏感高血压大鼠心肌纤维化

目的:观察桂枝汤不同桂枝-白芍比例配伍对盐敏感高血压大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路以及白细胞介素-10(IL-10),IL-6,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)相关炎症因子表达的影响,探讨桂枝汤改善盐敏感高血压大鼠心肌纤维化具体的机制。方法:将40只雄性6周龄盐敏感大鼠随机分为5组,分别为正常组、模型组、桂枝汤桂枝-白芍1∶1组(简称桂芍1∶1组)、桂枝汤桂枝-白芍1∶2组(简称桂芍1∶2组)、桂枝汤桂枝-白芍2∶1组(简称桂芍2∶1组),每组8只。正常组给予低盐饲料喂养,其余4组给予高盐饲料喂养,喂养4周后开始灌胃,正常组、模型组每天给予等体积的生理盐水灌胃,桂芍1∶1组、桂芍1∶2组和桂芍2∶1组分别按4.0,5.5,5.5 g·kg^-1给予桂枝汤水溶液灌胃,连续灌胃4周。每周测量1次血压;采用超声心动图检测左室收缩末期内径(LVESD),左室舒张末期内径(LVEDD),左室射血分数(LVEF),左室短轴缩短分数(LVFS);采用苏木素-伊红(HE)及马松(Masson)染色观察各组大鼠心肌病理形态变化;采用免疫组化检测各组大鼠心肌组织中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠心肌组织中IL-10,IL-6,TNF-αmRNA的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠心肌组织中TGF-β1,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Smad2,Smad3,Smad7蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组在8~15周的血压升高,LVESD,LVEDD升高,LVFS,LVEF降低,胶原容积分数升高,免疫组化显示Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的表达增加,IL-10,IL-6,TNF-αmRNA的表达均升高,TGF-β1,Smad2,Smad3,α-SMA蛋白的表达升高,Smad7蛋白的表达降低(P<0.01)。与模型组比较,桂枝汤各组在12~15周血压上升延缓,LVESD,LVEDD降低(P<0.01),LVFS,LVEF升高(P<0.01),胶原容积分数降低(P<0.01),Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的表达降低(P<0.01),同时,IL-10 mRNA的表达升高(P<0.05,P<0.01),IL-6,TNF-αmRNA的表达降低(P<0.01),TGF-β1,Smad2,Smad3,α-SMA蛋白的表达降低(P<0.05,P<0.01),Smad7蛋白的表达升高(P<0.01);且与桂芍2∶1组相比,桂芍1∶1组改善上述指标的效果更明显(P<0.01)。结论:桂枝汤不同桂芍比例配伍可以改善盐敏感高血压大鼠的心肌纤维化程度,其机制可能与调节TGF-β1/Smads信号通路及减轻炎症反应有关,且桂枝汤桂芍1∶1组减轻炎症反应,改善心肌纤维化效果最好。     

基于网络药理学的枳实薤白桂枝汤治疗冠心病的分子机制研究

目的基于网络药理学方法研究枳实薤白桂枝汤治疗冠心病的作用机制。方法利用中药系统药理学数据库(TCMSP)筛选与枳实薤白桂枝汤相关的化学成分及其作用靶点;通过OMIM和NCBI数据库获取与冠心病相关的靶点,将疾病靶点与药物靶点进行交集,筛选得到疾病-药物成分共同靶蛋白。应用STRING平台构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型;利用Cytoscape软件构建"复方-活性成分-作用靶点-疾病"相互作用网络;运用R语言进行KEGG通路和GO功能富集分析。结果经数据库分析共获得了1801个疾病靶点,42个药物作用靶点。对其中26个共同相关靶点(占枳实薤白桂枝汤靶点的62%)进行分析,发现共有119个生物学过程及58条通路被显著富集。结论枳实薤白桂枝汤治疗冠心病具有多靶点、多通路的特点。其作用机制可能与调控冠心病发展过程中细胞代谢与凋亡、脂质代谢等过程有关。     

新型冠状病毒肺炎合并高血压靶点基因分析以及治疗中药预测

目的：筛选并分析新型冠状病毒肺炎合并高血压靶点基因同时探索潜在治疗中药。方法：筛选出新型冠状病毒肺炎合并高血压共同靶点基因并进行蛋白互作，分析出高度值和血管紧张素转换酶2（ACE2）相关的两个模块的重要靶点基因。根据两个模块的重点靶点基因预测相关中医症状以及中药；根据两个模块的重要靶点基因进行GO功能分析和KEGG通路分析。结果：获得新型冠状病毒肺炎合并高血压共同靶点基因197个，获得高度值靶点基因18个和ACE2及其相关靶点基因共14个两个重要靶点基因模块，获得发热、头痛等中医症状和钩藤、麻黄、苦杏仁、青蒿、葛根等中药。两个模块的GO功能分析的细胞组分的前5个过程中的4个过程具有明显的一致性，KEGG通路分析有共同的8个信号通路。结论：获得了新型冠状病毒肺炎合并高血压靶点基因，并筛选和分析出重要靶点基因，同时也预测了具有潜在治疗作用的中药，为临床用药提供了参考。     

基于网络药理学的五苓散治疗慢性心力衰竭的机制研究

目的通过网络药理学方法探讨五苓散(WLS)治疗慢性心力衰竭(CHF)的作用机制。方法运用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)与文献挖掘获取五苓散的有效活性成分和对应的作用靶点,从而建立单味药-活性成分-靶点网络;在GeneCards、OMIM数据库获得CHF的靶点,采用Cytoscape 3.7.1软件构建药物活性成分-CHF-靶点网络模型并进行分析;运用STRING数据库构建蛋白质相互作用网络(PPI),借助DAVID在线工具对关键靶点进行基因本体功能注释(GO)和东京基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并用Surflex软件进行分子对接。结果通过筛选得到50个活性成分,29个潜在靶点,8243个CHF靶点,27个五苓散-CHF共同靶点。网络分析结果表明,五苓散治疗CHF的关键靶点包括CASP3、RELA、AR、ESR1、CHRM1、CASP8等,生物过程主要涉及信号转导、神经系统发育、RNA聚合酶II启动子的转录起始、对雌二醇的反应、胆碱能突触传递等,KEGG富集主要涉及调节神经活性配体-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路、胆碱能突触等。分子对接结果显示五苓散中(+)-儿茶素、花旗松素等关键化合物与CASP8、CHRM1、NR3C1等关键靶点有较好的结合能力。结论从网络药理学角度初步揭示了五苓散治疗CHF的物质基础和作用机制,为五苓散的临床应用提供了一定的理论依据。