愈肾汤总黄酮的成分组成和活性研究

目的:对愈肾汤总黄酮的化学成分和活性进行研究,为处方的活性成分揭示和作用机制阐明奠定基础.方法:采用体外H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤实验评价愈肾汤总黄酮的活性.并采用硅胶柱、大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶色谱和高效液相制备等方法分离纯化愈肾汤总黄酮的化学成分,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果:愈肾汤总黄酮具有明显的抗过氧化氢诱导的HUVEC损伤和下调PAI-1表达(P＜0.05)的作用.从愈肾汤总黄酮部位分离得到9个黄酮类化合物分别为毛蕊异黄酮(1)、蒙花苷(2)、3',4'-二羟基-7-O-β-D-葡萄糖苷(3)、3'-羟基-4'-甲氧基-7-O-β-D-葡萄糖苷(4)、槲皮素(5)、山柰酚(6)、芦丁(7)、红车轴草异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、4'-羟基二氢黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(9).结论:愈肾汤总黄酮具有抗HUVEC氧化损伤作用,所分离的9个黄酮化合物均为首次从该方中分离得到,化合物1,3,4,8,9可能来自于黄芪,化合物2,5～7可能来自于小蓟和仙鹤草,其中3,4和9为首次从组方的单味药中分离得到.     

儿茶酚胺类应激激素促进小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入

目的探讨应激激素对小鼠肝癌细胞系H22中G_0期细胞周期再入的作用及机制。方法 CD44和CD133流式抗体染色确定H22细胞中是否存在肿瘤干细胞;体外应激激素皮质酮(CORT)、肾上腺素(EPI)和去甲肾上腺素(NE)处理H22细胞48 h后,Ki-67和PI流式抗体染色检测G_0期细胞比例以及细胞周期变化;相应的受体拮抗剂验证介导G_0期细胞周期再入的受体亚型;Western blot检测细胞周期相关蛋白Skp2和p27~(kip1)表达水平。结果 H22细胞中肿瘤干细胞(CD44~+CD133~+)比例为0.80%±0.15%;与对照组相比,皮质酮处理后G_0期细胞比例不变,而儿茶酚胺类应激激素EPI和NE处理后G_0期细胞分别降低了62.50%和53.00%,同时,EPI和NE组H22细胞总数增加,G_2/M和S期细胞比例升高;Skp2蛋白表达显著升高(P0.05),p27~(kip1)蛋白表达显著降低(P0.05);与EPI和NE组相比,添加α1肾上腺素能受体拮抗剂特拉唑嗪和哌唑嗪处理后G_0期细胞比例升高;哌唑嗪处理后Skp2蛋白表达显著降低(P0.05),p27~(kip1)蛋白表达显著升高(P0.05)。结论儿茶酚胺类应激激素通过激活α1肾上腺素能受体促进小鼠肝癌细胞系H22中G_0期细胞周期再入,其机制可能与S期激酶相关蛋白Skp2表达升高及其靶蛋白p27~(kip1)的降解有关。     

大孔吸附树脂纯化愈肾颗粒中总黄酮工艺

目的:研究大孔吸附树脂法纯化愈肾颗粒总黄酮最佳工艺。方法:以总黄酮的比吸附量、解析率、洗脱率等为指标,选用7种大孔吸附树脂对愈肾颗粒总黄酮进行纯化。结果:HPD100型大孔吸附树脂对愈肾颗粒的总黄酮具有较好的分离纯化能力。最佳工艺条件为2 BV的愈肾颗粒供试品溶液为上样量(含生药量为1 g.mL-1),吸附速率为1 BV.h-1,分别用水2BV、30%乙醇3 BV、50%乙醇4 BV洗脱,洗脱流速4 BV.h-1,合并30%乙醇和50%乙醇洗脱液,浓缩,即为纯化的总黄酮。结论:纯化后总黄酮含量提高到76%以上,HPD100型大孔吸附树脂可较好的纯化愈肾颗粒总黄酮。     

枸橼酸托法替布片在健康中国受试者体内的生物等效性研究

目的评价2种枸橼酸托法替布片在中国健康受试者中的生物等效性和安全性。方法按单次给药、随机、开放、两周期、双交叉试验设计。空腹、餐后条件下各入组30例受试者,随机交叉单次口服枸橼酸托法替布受试制剂和参比制剂各5 mg,用HPLC-MS/MS法检测血浆中托法替布的浓度,用Phoenix WinNonlin 7.0软件计算药代动力学参数,并进行2种制剂的生物等效性评价。结果受试者服用受试制剂和参比制剂后,空腹组血浆中枸橼酸托法替布的主要药代动力学参数如下:C_max分别为（69.02±21.25）和（66.64±17.48）ng·mL^-1,AUC_0-t分别为（167.69±47.42）和（167.34±45.92）ng·mL^-1·h, AUC_0-∞分别为（168.75±47.50）和（168.40±46.26） ng·mL^-1·h。餐后组血浆中枸橼酸托法替布主要药代动力学参数如下:受试制剂和参比制剂的C_max分别为（50.51±18.01）和...     

火绒草中酚类成分的分离与鉴定

目的对火绒草的化学成分进行分离与鉴定。方法应用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱和高效液相制备色谱分离纯化,根据理化性质和波谱数据确定化合物的结构。结果从火绒草中分离得到10个化合物,分别鉴定为咖啡酸乙酯(ethyl caffeate,1)、芹菜素(apigenin,2)、对羟基苯甲酸(P-hydroxybenzoic acid,3)、原儿茶醛(protocatechuic aldehyde,4)、原儿茶酸(protocatechuic acid,5)、咖啡酸(caffeic acid,化合物6)、槲皮素(quercetin,7)、木犀草素(luteolin,8)、对羟基桂皮酸(p-hydroxy cinnamic acid,9)、阿魏酸(ferulic acid,10)。结论化合物1-3、8首次从火绒草中分离得到,化合物1-3为首次从火绒草属植物中分离得到。     

泽泻麸制前后健脾作用研究

目的:对比泽泻炮制前后对大鼠胃泌素含量以及十二指肠Na+ -K+ -ATP酶活性的影响,探讨泽泻炮制前后健脾作用的变化.方法:取50只雄性SD大鼠随机分为空白组、泽泻生品低剂量组、泽泻生品高剂量组、泽泻麸制品低剂量组、泽泻麸制品高剂量组,空白组ig给予生理盐水,各低、高剂量组每次ig给予对应药物2.0,6.0 g·kg-1.每天ig给药2次,7d后测定大鼠血清胃泌素水平及十二指肠中Na+ -K+ -ATP酶活性.采用离体器官实验法,以大鼠离体十二指肠平滑肌的收缩幅度、相对张力及收缩频率为指标,观察在克氏液中泽泻炮制前后提取液对大鼠离体十二指肠平滑肌的影响.结果:泽泻麸制品高剂量组血清胃泌素含量为(3.77±0.49) ng·L-1,明显高于相同剂量生品组(3.24±0.13)ng·L-1(P＜0.05);麸制品高剂量组Na+ -K+-ATP酶含量为(13.31±1.99)pmol·g-1,明显高于相同剂量生品组(11.77±1.37) pmol· g-1(P＜0.05);生品和麸制品在高浓度时,对大鼠离体十二指肠收缩振幅及相对张力都有增强(P＜0.05).结论:泽泻能增加大鼠血清胃泌素含量、提高十二指肠Na+ -K+ -ATP酶活性,以及大鼠离体十二指肠肠管的运动功能,且呈剂量依赖关系,炮制后作用增强.     

来那度胺胶囊单次空腹及餐后状态下给药在健康受试者的生物等效性研究

目的 评估2种来那度胺胶囊25 mg在中国男性健康受试者中的生物等效性。方法 本研究包括空腹和餐后2个试验,均用随机、开放、两周期、两交叉试验设计。空腹试验入组24例、餐后试验入组30例健康男性受试者,随机、交叉单次口服受试和参比来那度胺胶囊25 mg,用HPLC-MS/MS法测定血浆中来那度胺的血药浓度,根据非房室模型用Phoenix WinNonlin 6.4软件计算两者的药代动力学参数,用SAS 9.4软件进行生物等效性评价。结果 在空腹状态下,受试者单剂量口服受试和参比来那度胺胶囊25 mg后,主要药代动力学参数：C_max分别为（615.00±165.00）和（569.00±118.00）ng·mL^-1,AUC_0-t分别为（1 512.00±158.00）和（1 532.00±183.00）ng·mL^-1·h, AUC_0-∞分别为（1 519.00±159.00）和（1 539.00±185.00）ng·mL^-1·h;在餐后状态下,受试者单剂量口服...