基于UPLC-Q-TOF-MS分析何首乌提取物体内外成分

阐明何首乌Polygonum multiflorum体内药源性成分。该研究首次以靶器官肝脏中的药源性成分为研究对象,基于UPLC-Q-TOF-MS技术和Targeted-MS-MS模式,采用安捷伦Mass Hunter,Metabolite ID数据处理软件对保留时间、精确相对分子质量、一级、二级质谱信息进行分析并结合标准品和参考文献比对,从中鉴定出5个原型成分、6个代谢产物。此外,该研究还对何首乌给药后大鼠血浆和提取物中的药源性成分进行了分析,从血浆中推出鉴定8个原型成分、19个代谢产物,从何首乌提取物中鉴定出30个化合物。其中大黄素氧化乙酰化、羟化甲基化、葡萄糖醛酸化氧化、羧基化葡萄糖醛酸化和决明柯酮葡萄糖醛酸化代谢产物为首次报道。通过何首乌体内外成分之间的比对分析,初步明确了肝脏中的药源性成分和提取物-血液-肝脏之间成分的传递和转化规律,同时也进一步深化了对何首乌体内药源性成分的认识。     

基于网络药理学及实验验证分析止得咳颗粒治疗咳嗽的作用机制

目的 基于网络药理学预测止得咳颗粒治疗咳嗽的作用机制,并对其进行体内外实验验证。方法 通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)与相关文献获取止得咳颗粒的活性成分及对应靶点;利用人类基因数据库(GeneCards)和比较毒物遗传学数据库(CTD)搜索咳嗽相关靶点;利用STRING数据库和Cytoscape软件构建止得咳颗粒与咳嗽交集靶点的蛋白质互作网络(PPI)网络;利用Cytoscape软件构建止得咳颗粒的“成分-靶点“网络和“成分-靶点-信号通路”网络;通过DAVID数据库对交集靶点进行通路注释和分析;运用SYBYL-X 2.0和Discovery Studio软件对止得咳颗粒排名靠前的活性成分和关键靶点进行分子对接,验证其生物活性;验证实验通过构建LPS致RAW264.7细胞炎症模型,CCK8法检测细胞增殖抑制率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)检测炎症因子及相关蛋白表达,以及建立小鼠棉球肉芽肿模型,ELISA法检测棉球肉芽肿小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达情况。结果 研究共筛选出止得咳颗粒的活性成分59个,关键靶点11个,...     

中药分析和药物分析设计性实验的教学改革研究

<正>中药分析和药物分析是中药学和药学相关专业本科生必修的专业核心课程。目前,我校的中药分析课时设置总学时为98学时,其中实验为40学时,占比约为41%;药物分析课时设置总学时为119学时,其中实验为44学时,占比约为37%。由此可见,实验教学是中药分析和药物分析课程学习中非常重要的一环,是把理论知识转化为实际能力的重要环节,也是培养学生创造性思维,养成严谨、规范的操作习惯和造就应用型人才的有效途径。我校历来重视实验教学工作,为了保证实验教学工作的顺利进行,在专项资金、师资投入、课题经费等方面进行了大量的投入。     

中药莪术本草考证

中药莪术在中医临床中为常用药,其基原之一的广西莪术被遴选为广西“桂十味”道地药材种类。中药莪术为多基原植物,在古代曾与其他姜黄属植物发生混淆,其基源植物出现混乱,以及产地发生变化。为追本溯源,便于临床应用,因此经查阅各代本草及结合近代相关资料,证明中药莪术在古代主流产品为蓬莪荗;莪术道地产区于唐起源于西戎,清后形成为川、广(桂)、温三大道地产区;古代广西莪术的药用部位为根茎,功效主治基本相同。该考证为中药莪术正本清源,为进一步深入开发提供参考。     

丹荷颗粒25种特征性成分LC-MS测定及制剂一致性分析

目的 建立高效液相色谱-三重串联四级杆质谱（HPLC-MS/MS）联用同时测定丹荷颗粒中25种特征性成分（没食子酸、丹参素、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、芦丁、虎杖苷、金丝桃苷、紫云英苷、柚皮苷、橙皮苷、迷迭香酸、白藜芦醇、丹酚酸B、槲皮素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素、大黄素、乌药碱、荷叶碱、隐丹参酮、丹参酮I、去氢荷叶碱、丹参酮II_A）含量的方法，并对其制剂批次间的一致性进行分析。方法 HPLC采用Agilent Rapid Resolution HD C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.8 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液；质谱采用动态多反应监测（dMRM）扫描模式。对25种特征性成分进行含量测定。结果 建立的HPLC-MS/MS方法在10 min内完成了25种特征性成分的同时定量分析，定量限分别为异鼠李素、乌药碱、去氢荷叶碱0.025 ng/mL、大黄素、丹参酮I 0.050 ng/mL，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷0.200 ng/mL，没食子酸、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、芦丁、金丝桃苷、紫云英苷、白藜芦醇、槲皮素、荷叶碱、丹参酮II_A 0.250 ng/mL，儿茶素、迷迭香酸、隐丹参酮0.500 ng/mL，丹参素、橙皮苷、丹酚酸B 1.000 ng/mL，虎杖苷2.000 ng/mL，柚皮苷5.000 ng/mL；且25种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（r>0.990 1），平均加样回收率85.16%~113.46%，RSD为2.01%~8.80%。此外，该方法较为全面地囊括了丹荷颗粒中君臣佐使药材的主要成分，25种成分总量为31.49 mg/g，其中丹酚酸B（9.44 mg/g）及橙皮苷（7.60 mg/g）质量分数最高，异鼠李素（0.79 μg/g）质量分数最低。经箱线图（Box-plot）分析，10个不同批次丹荷颗粒制剂中25种成分质量分数波动范围（P值）在75% < P < 125%；以及统计方法分析，25种成分质量分数的RSD在2.58%~13.10%；以上结果表明10批丹荷颗粒制剂间成分含量一致性合格。结论 所建立的分析方法快速、灵敏度高，结果真实可靠，能够为丹荷颗粒制剂的质量控制和制剂一致性分析提供科学方法及依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析何首乌提取物体内外成分北大核心CSCD

阐明何首乌Polygonum multiflorum体内药源性成分。该研究首次以靶器官肝脏中的药源性成分为研究对象,基于UPLC-Q-TOF-MS技术和Targeted-MS-MS模式,采用安捷伦Mass Hunter,Metabolite ID数据处理软件对保留时间、精确相对分子质量、一级、二级质谱信息进行分析并结合标准品和参考文献比对,从中鉴定出5个原型成分、6个代谢产物。此外,该研究还对何首乌给药后大鼠血浆和提取物中的药源性成分进行了分析,从血浆中推出鉴定8个原型成分、19个代谢产物,从何首乌提取物中鉴定出30个化合物。其中大黄素氧化乙酰化、羟化甲基化、葡萄糖醛酸化氧化、羧基化葡萄糖醛酸化和决明柯酮葡萄糖醛酸化代谢产物为首次报道。通过何首乌体内外成分之间的比对分析,初步明确了肝脏中的药源性成分和提取物-血液-肝脏之间成分的传递和转化规律,同时也进一步深化了对何首乌体内药源性成分的认识。     

中药分析学硕士研究生科研能力培养初探

<正>中药分析作为一种研究中药质量及其规律的分析技术,逐步发展为一门日益成熟的学科,其主要任务包括对药品质量进行常规检验,为新药开发提供方法手段和技术支撑,对药物生产工艺、评价等流程进行分析和监控,研究中药的质量控制和质量评价方法体系等,是中药学领域中一个重要组成部分^[1]。我校已明确中药分析学硕士研究生的培养目标：具有较扎实的中药学和中药分析学基础理论及系统的专业知识,掌握一定的现代化最新科学技术;学位获得者能在高等院校、药物科研机构、药品监督管理部门、     

基于体内暴露量的丹荷颗粒质量标志物研究

目的 基于丹荷颗粒中15个特征性成分(丹酚酸B、虎杖苷、大黄素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、白藜芦醇、金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、橙皮苷、川陈皮素、荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、去氢荷叶碱、乌药碱)在大鼠血浆暴露量的测定,筛选丹荷颗粒中适于作为质量标志物(quality marker,Q-Mark...     

龙眼叶治疗2型糖尿病的网络药理学研究及实验验证

目的 基于网络药理学和分子对接的方法探讨龙眼叶治疗2型糖尿病（T2DM）的作用机制,并通过体外实验进行初步验证。方法 采用中药系统药理学分析平台（TCMSP）并结合化源网数据库和相关药理活性文献筛选出龙眼叶的活性成分;通过Swiss TargetPrediction网站在线分析筛选活性成分的靶点。利用OMIM、GeneCards、DrugBank三个数据库获取T2DM的相关靶点,进而利用韦恩（VENNY）2.1筛选出活性成分与T2DM的交集靶点;然后将其导入STRING数据库以进行蛋白质互作网络（PPI）网络构建;采用Cytoscape v3.8.0软件构建“中药-化学成分-关键靶基因-疾病”网络图;通过DAVID数据库对交集靶点进行GO注释和KEGG通路富集分析,GraphPad Prism 8.3软件将其可视化;运用SYBYL-X 2.0和Discovery Studio 4.5 软件对龙眼叶排名靠前的活性成分和关键靶点进行分子对接,验证其生物活性。验证实验以人肝癌细胞（HepG2）作为研究对象,高糖诱导胰岛素抵抗HepG2细胞模型,CCK8法检测细胞增殖抑制率,蛋白印迹（Western blot）检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K-AKT）信号通路相关蛋白的表达情况。结果 共筛选出龙眼叶有16个活性成分,活性成分和疾病的交集靶点共96个,网络拓扑分析筛选出关键靶点16个。生物学过程包括凋亡过程的负调控、细胞质膜、酶结合等。龙眼叶在改善T2DM主要作用于HIF-1信号通路、胰岛素抵抗信号通路、PI3K-AKT信号通路等。分子对接显示山柰酚和EGFR、槲皮素和PTGS2、木犀草素和PIK3R1有比较强的结合活性。细胞实验结果表明龙眼叶提取物可以上调IR模型HepG2细胞AKT-1、p-AKT-1、p-PI3Kp85蛋白表达。结论 龙眼叶抗T2DM的作用机制可能与PI3K-AKT、HIF-1、胰岛素抵抗等信号通路有关。