基于UPLC特征图谱的南、北葶苈子及其混伪品的鉴别研究

目的：研究并建立南葶苈子药材超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱,并对北葶苈子及混伪品进行对比研究。方法：采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm;流速为0.30 mL·min^–1;柱温为35℃。结果：建立了南葶苈子药材UPLC特征图谱共有模式,标定了12个共有峰,指认了其中7个,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰3)可区分南葶苈子和北葶苈子;芥子碱(峰2)可区分南葶苈子和菥蓂子;异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰6)可区分南葶苈子和荠菜子。结论：建立的UPLC特征图谱能有效区分南葶苈子、北葶苈子及其混伪品荠菜子、菥蓂子,为控制葶苈子药材质量提供了参考。     

鹿茸、鹿角的位点特异性PCR鉴别

目的:建立一种快速、高效、简便的鹿茸、鹿角位点特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法。方法:通过比较梅花鹿、马鹿及其混伪品的COI,Cytb基因序列差异,根据Cytb片段上的3个SNP (single nucleotide polymorphism)变异位点设计出一对鹿茸的特异性鉴别引物LR-238上游和LR-238下游,并对影响PCR结果的主要因素退火温度,PCR循环次数,模板DNA浓度,Taq酶用量和及影响重复性的Taq酶种类和PCR仪型号等进行方法学考察和优化。结果:进行方法学考察确定最优鉴别条件的基础上,当PCR退火温度为56℃,循环次数为35次的条件下,鹿茸、鹿角正品均能扩增出约250 bp片段,其他9种混伪品麋鹿、白唇鹿、水鹿、坡鹿、黇鹿、骡鹿、驯鹿、驼鹿、狍及阴性对照无条带。不同来源的药用的马鹿亚种东北马鹿、塔河马鹿、天山马鹿、阿拉善马鹿、阿勒泰马鹿、新西兰马鹿,梅花鹿亚种东北梅花鹿、华南梅花鹿样品使用建立的位点特异性PCR鉴别方法均产生约250 bp特异性鉴别条带。结论:该文设计的鉴别引物具有高度的专属性,所建立的位点特异性PCR鉴别方法可用于鹿茸、鹿角的准确鉴别。     

菌材物种调查及其与天麻产量和质量相关性分析

目的:作为蜜环菌和天麻能量获得的来源,菌材物种基原多样并在天麻产业发展中发挥着重大作用。为了探讨不同基原菌材物种对天麻质量的影响,该文通过文献和实践生产基地调查,系统分析了天麻生产用菌材的基原、木质纤维素含量以及单位面积天麻产量和质量。方法:对贵州、云南、湖北和陕西4个主要产区天麻及其菌材进行收集,并通过DNA特征片段鉴定菌材物种基原;分别利用高效液相色谱法和灼烧法对菌材木质纤维素含量进行测量;采用苯酚-硫酸法对各产区天麻的多糖含量进行测定;比较使用不同基原菌材所产单位面积天麻质量和多糖含量,并分析其与栽培菌材状况之间的关系。结果:栽培天麻使用的菌材物种基原多样,且桦木科树种利用最为广泛。各基原菌材的木质纤维素组成比例存在差异,其中蓝果树科纤维素含量最高、桑科半纤维素含量最高、蔷薇科木质素含量最高。菌材基原不同对天麻产量和多糖含量具有一定影响,产量最高可达1 285.51 g,最低仅379.30 g;多糖平均质量分数为241.1 mg·g-1,变化幅度为87.95～411.2 mg·g-1。天麻产量和多糖含量与菌材纤维素含量具有极强的正相关性、与木质素含量具有强负相关性。结论:栽培天麻使用菌材基原不同将影响天麻的产量和质量,选择合适的基原将有利于蜜环菌营养物质的吸收、提高天麻的产量,上述结果将为天麻栽培过程中菌材物种的选择提供依据。     

红天麻与乌天麻镇痛活性比较研究

目的 比较红天麻、乌天麻及其差异成分的镇痛作用,为天麻道地药材的开发和临床应用提供参考。方法 采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）对红天麻和乌天麻中19个酚酸类成分进行定量分析,比较其含量差异;使用热板致痛和醋酸致痛2种模型评估红天麻、乌天麻及其差异成分的镇痛作用。结果 热板致痛和醋酸致痛实验结果表明,与空白对照组比较,红天麻可显著提高小鼠的痛阈值,红天麻和乌天麻均具有一定的镇痛作用;红天麻和乌天麻的差异成分琥珀酸、L-焦谷氨酸可显著提高小鼠的痛阈值,丁香酸、天麻素、琥珀酸、L-焦谷氨酸均具有一定的镇痛作用,其中琥珀酸、L-焦谷氨酸的镇痛作用更佳。结论 与乌天麻相比,红天麻具有较强的镇痛作用,二者的差异成分琥珀酸和L-焦谷氨酸显示出较好的镇痛效果,可能是其镇痛作用差异的关键成分。