湖南地区腰椎间盘突出症中医证候学及辨证分型的初步调查

目的进行腰椎间盘突出症（Lumbar disc herniation，LDH）中医证候学及辨证基本规律规范化研究。方法多中心随机取样收集病例349例；采用SPSS软件包，对患者的症状、体征、舌脉进行K-means聚类分析，再对每种类型进行主成分分析，判定每种类型的代表症状，归纳出证型。结果调查收集的LDH症状22种，症状出现频率较高的是腰腿痛、腰骶痛、腰胀痛、一侧性下肢麻木、向下肢放射性疼痛，活动加重；症状出现频率较低的是刺痛、冷痛、灼痛、腰膝酸软、下腹痛。舌象与CT扫描轻重之间未发现特别的相关性；辨证分型与X线、CT扫描结果有一定的相关性。结论气滞血瘀、肾虚是腰椎间盘突出症的根本病机；X线、CT扫描可作为LDH辨证分型的客观指标之一。     

针刺对偏头痛大鼠脑内一氧化痰、5-羟色胺的影响

目的 :观察针刺对偏头痛大鼠脑内一氧化氮 (NitricOxide,NO)和 5 -羟色胺 (Sereotonin ,5 -HT)的影响 ,并探讨其防治偏头痛的作用机制。方法 :将 4 0只大鼠随机分为正常对照组、模型组、针刺预防组和针刺治疗组 ;采用硝酸还原法和反相高效液相色谱法分别测定颈静脉 (ExternalJugularVein ,EJV)中NO和 5 -HT含量。结果 :与正常对照组比较 ,模型组NO显著升高 ,5 -HT显著降低 (P <0 .0 1) ;与模型组比较 ,针刺预防组和针刺治疗组NO显著降低 (P <0 .0 1) ,5 -HT明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :针刺不仅能治疗偏头痛 ,而且能减慢 5 -HT的降解 ,抑制NO的释放。推测针刺偏头痛可能是通过调节 5 -HT和NO的含量而实现的。     

偏头痛大鼠脑内5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶基因的表达变化及针刺的干预效应

目的:前期实验已证实针刺治疗偏头痛疗效优越。观察针刺对偏头痛大鼠脑内5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的调控作用。方法:实验于2005-11/2006-05在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室完成。①选用SD大鼠40只,按随机数字表法分为4组(n=10),除正常对照组外,其余3组均复制大鼠偏头痛模型。模型对照组只造模,不作其他处理;针刺治疗组造模后进行针刺;针刺预防组针刺后造模电刺激20min。针刺方法:针刺大鼠双侧太冲、阳陵泉穴20min。采用疏密波,电流强度0.3～0.6mA,留针20min,1次/d,共5次。②实验完毕后取脑干及三叉神经节匀浆,采用反转录-聚合酶链反应法测定5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达。结果:进入结果分析正常对照组10只,模型对照组、针刺治疗组、针刺预防组各9只,共脱失3只。①与正常对照组比较,模型对照组大鼠诱导型一氧化氮合酶mRNA表达显著增强(P<0.01),5-羟色胺1FmRNA表达显著减弱(P<0.01)。②与模型对照组比较,针刺预防组和针刺治疗组诱导型一氧化氮合酶mRNA表达明显减弱(P<0.01),5-羟色胺1FmRNA表达显著增强(P<0.01)。结论:针刺调控5-羟色胺1F和诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达可能是针刺防治偏头痛的分子机制。     

偏头痛大鼠脑干组织G蛋白亚基Gsa和Gia含量的变化

目的　观察实验性偏头痛大鼠脑干组织 (Gsa和Gia)G蛋白两个亚基含量的变化 ,探讨其在偏头痛发作时的作用。方法　皮下注射硝酸甘油 ( 10mg/Kg)建立实验性偏头痛大鼠模型 ,将动物随机分成正常对照、生理盐水对照和模型组 ,运用免疫印迹法 (Westernblot)检测脑干组织Gia和Gsa含量。结果　皮下注射硝酸甘油 4h后脑干组织Gsa蛋白含量明显升高 (P <0 0 1) ,Gia蛋白含量明显降低 (P <0 0 1) ,Gsa/Gia蛋白比值升高。结论　偏头痛发作可能与大鼠脑干组织G蛋白信号传导系统功能障碍有关。     

平肝潜阳法对SHR血管平滑肌细胞增殖及HSP27表达的影响

目的 探讨平肝潜阳法对体外培养的自发性高血压大鼠(SHRs)血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响,及与热休克蛋白27(HSP27)表达的关系.方法 采用改良的贴块法行SHR主动脉VSMC的分离培养,α-actin 单克隆抗体免疫组织化学染色鉴定培养细胞;以MTT法反映VSMC增殖情况;用RT-PCR和Western印迹方法检测HSP27基因和蛋白的表达水平.结果 对照组和治疗组均能抑制VSMC增殖,两组有显著差异(P＜0.01);RT-PCR和Western印迹分析显示,与正常组比较,模型组HSP27表达明显增强(P＜0.01);与模型组比较,对照组和治疗组HSP27表达明显减弱(P＜0.01).结论 平肝潜阳法通过抑制VSMC增殖可能与抑制HSP27表达有关,是改善高血压血管重构的重要作用分子机制之一.     

针刺对缺血性脑血管疾病大鼠脑皮质蛋白质差异表达的影响

目的:寻找缺血性脑血管疾病的特异蛋白质并探讨针刺对其差异蛋白质表达的影响。方法:用固相pH梯度双向凝胶电泳分离正常组、缺血性脑血管病及针刺组大鼠的总蛋白质,经考马斯亮兰染色,PDQuest 7.0软件分析。结果:与正常组匹配,缺血性脑血管病组与针刺组大鼠脑皮质图象匹配率分别为82%、85%,且重复性较好,其蛋白质主要分布在等电点pI4-8,分子量Mr20-75 kD范围。与正常组比较,缺血性脑血管病组中蛋白质点表达上升2倍及以上的点有9个,下降2倍及以上的点有11个。而在针刺组中这些表达上升的点均有下降,有10个点下降达2倍以上,其中有6个下降后接近于正常组;这些表达下降的点均有上升,有7个点上升达2倍以上,其中有4个上升后接近于正常组。结论:上述有显著差异的蛋白质可能是缺血性脑血管疾病的相关蛋白;针刺改善缺血性脑血管疾病的临床症状也可能与上述蛋白质的改变有关。     

甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺组织蛋白质组的双向电泳分析

目的观察甲亢肝阳上亢证大鼠与正常大鼠肾上腺中蛋白质的差异表达，以期发现诊断甲亢肝阳上亢证的标志物，为进一步探讨甲亢肝阳上亢证的分子机制提供依据。方法左旋甲状腺素（L-T4）和附子汤灌胃造成甲亢肝阳上亢证模型，应用蛋白质组学技术比较模型组与正常组中肾上腺的差异蛋白质，结合生物信息学对其进行分析鉴定。结果模型组与正常组相比有33个蛋白质上升和6个蛋白质下降，进一步质谱鉴定，其中6个蛋白质为GrpE蛋白同系物1、60kDa热休克蛋白、脂酰辅酶A脱氢酶、钙网织蛋白前体、醛脱氢酶、异戊酰辅酶A脱氢酶。结论甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺中具有特异表达的蛋白质，经质谱鉴定后发现，其蛋白质的变化可能与甲亢肝阳上亢证的形成密切相关。     

平肝潜阳方治疗前后高血压病肝阳上亢证大鼠肾上腺组织蛋白表达变化的蛋白质组学研究

目的：从蛋白质组学水平探讨大鼠高血压肝阳上亢证发生机制及平肝潜阳方治疗肝阳上亢证的分子机制，为治疗高血压肝阳上亢证寻找新的药物标志蛋白提供理论和实验依据。 方法：以自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat，SHR）加灌服附子汤法制备高血压肝阳上亢证大鼠模型，二维凝胶电泳分离大鼠肾上腺蛋白质，获得差异表达蛋白质；利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）和数据库分析鉴定差异表达蛋白质。 结果：高血压肝阳上亢证大鼠模型复制成功，平肝潜阳法治疗后易激惹程度和结膜充血减轻，收缩压下降（P〈0．05，P〈0．01）。通过点检测后，发现12个具有明显表达差异的蛋白质斑点，经鉴定可以确认的蛋白质点有8个，其中2个蛋白点为同一蛋白。其中异柠檬酸脱氢酶、类固醇合成急性调节蛋白在模型组表达较正常组上调，在治疗组重新下调至前水平；铁轻链蛋白、Tu翻译延长因子、鸟苷酸解离抑制因子、黄素还原酶、Basic转录因子3在模型组表达较正常组下调。在治疗组重新上调至前水平。 结论：成功鉴定了高血压肝阳上亢证大鼠平肝潜阳方治疗前后肾上腺组织差异表达蛋白，为深入研究高血压病肝阳上亢证的病理机制及平肝潜阳方治疗的分子机制奠定了基础。     

偏头痛肝阳上亢型大鼠脾脏淋巴细胞的比较蛋白质组学分析

目的筛选与偏头痛肝阳上亢型相关的蛋白质，进一步揭示偏头痛肝阳上亢证的分子机制。方法用电刺激SD大鼠三叉神经节，并灌服附子汤的方法制造偏头痛肝阳上亢型模型。采用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离偏头痛肝阳上亢型大鼠脾脏淋巴细胞的总蛋白，PDQuest7．0图像分析软件识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图，搜索数据库鉴定蛋白质。结果鉴定到的10个差异蛋白分别为：氯通道蛋白-1、硫氧还蛋白过氧化物酶-I、硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ、专利蛋白W0979348序列、Rho GDP解离抑制因子α、肌动蛋白2／3复合物、神经微丝轻肽、蛋白酶体、热休克蛋白-27、膜联蛋白-A1。结论这些蛋白可能与偏头痛肝阳上亢证的形成有关，本实验为进一步揭示偏头痛肝阳上亢证的发病机制提供了新的线索。     

针刺配合耳穴贴压治疗单纯性肥胖症的临床观察

观察针刺配合耳穴贴压治疗单纯性肥胖的近期疗效。将单纯性肥胖患者随机分成电针配合耳穴贴压治疗组和西药对照组 ,疗程结束后进行近期疗效评定。结果表明 ,治疗组总有效率为 96 71% ,对照组总有效率为 82 73 % ,两组进行比较 ,组间差异有显著性 (P <0 0 5 )。针刺配合耳穴贴压对单纯性肥胖患者有良好的近期治疗效果。