基于UHPLC Q-Exactive Orbitrap MSn和分子网络技术快速鉴定吴茱萸汤中化学成分

《伤寒论》名方吴茱萸汤是首批《古代经典名方目录》收载品种,全方由吴茱萸、人参、生姜、大枣4味药组成,具有温中补虚、散寒降逆之功,临床应用广泛,疗效显著。经典名方化学组成是其物质基准和量值传递的重要前提,该研究旨在建立高分辨质谱(HR-MS)和分子网络整合的快速分析经典名方吴茱萸汤中化学成分的方法。采用AQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。分别在正、负离子模式下,采集Q-Exactive Orbitrap MS数据,根据MS/MS碎片模式的相似性创建GNPS分子网络,运用Cytoscape 3.6.1软件筛选结构相似的分子簇,最后根据对照品比对,并结合保留时间信息、高分辨质谱精确相对分子质量和MS/MS碎片信息对吴茱萸汤中化学成分进行快速准确鉴定。在吴茱萸汤中共鉴定出105种化学成分。该研究可为经典名方吴茱萸汤进一步的质量控制、基准物质研究以及药效物质研究等提供参考数据,同时也为中药化学成分的快速定性分析提供借鉴。     

针刺对颅脑损伤后脑组织三磷酸腺苷酶影响的研究

针灸疗法为古代外治法的一种 ,在促醒疗法中 ,因其具有简便易行、疗效迅速等特点为历代医家所青睐 ,其中有些穴位一直沿用至今 ,如水沟穴。现代研究认为 ,针刺水沟一方面兴奋脑神经元 ,使中枢神经系统发生复杂的整合作用 ,另一方面可改善脑血流 ,为脑细胞的功能恢复提供能量。目的 :观察针刺对大鼠颅脑损伤后脑组织Na+ -K+ -ATP酶、Ca2 + -ATP酶和Mg2 + -ATP酶活性的影响。方法 :5 6只Wistar大鼠随机分为 :假手术组 (8只 )、模型组 (16只 )、针刺治疗组 (16只 )、药物治疗组 (16只 ) ,后三组用自由落体法致大鼠左侧颅脑损伤。针刺治疗组和药物治疗组于术后 0 .5h给予治疗 ,然后每隔 12h治疗一次。模型组、针刺治疗组、药物治疗组于术后 2 4h、72h取大脑组织 ,假手术组于术后 72h取大脑组织 ,测定组织匀浆中ATP酶的活性。结果 :(1)Na+ -K+-ATP酶、Ca2 + -ATP酶和Mg2 + -ATP酶活性在伤后 2 4小时明显下降 ,伤后 72小时活性更低。 (2 ) 2 4h针刺组Na+ -K+ -ATP酶和Mg2 + -ATP酶的活性变化不明显 ,Ca2 + -ATP酶活性的变化明显。结论 :(1)针刺对Na+ -K+ -ATP酶和Mg2 + -ATP酶的速发型反应不如迟发型反应明显。 (2 )针刺对Ca2 + -ATP酶活性的速发型和迟发型反应都很明显。 (3)针刺可以减轻脑组织细胞内钙离子     

天门穴取穴方法与临证应用考释

古之练功之人早已讲“开天门” ,主要是指修练者具有了知宇宙人生真相的境界 ,也就是在更高层次上认识大自然的一种思维方式。关于天门的解释《辞海》中有 :“天门 :道家语 ,指心。《老子》 :‘天门开阖 ,能无雌乎 !’ ,魏源本义引张尔岐曰 :‘天门开阖 ,指心之运动变化言’ ,一说指鼻孔 ,见河上公注。指头额 ;天庭。《黄庭内景经·隐藏章》 :‘上合天门入明堂’。务成子注 :‘天门在两眉间 ,即天庭是也’。”可见“天门”一词最早见于《老子》 ,这反映古人对大自然的一种朴素唯物主义认识论 ,即 :事物的可知性和人的主观能动性。在医学书籍…     

针刺对颅脑损伤后脑组织三磷酸腺苷酶影响的研究

针灸疗法为古代外治法的一种，在促醒疗法中，因其具有简便易行、疗效迅速等特点为历代医家所青睐，其中有些穴位一直沿用至今，如水沟穴。现代研究认为，针刺水沟一方面兴奋脑神经元，使中枢神经系统发生复杂的整合作用，另一方面可改善脑血流，为脑细胞的功能恢复提供能量。目的：观察针刺对大鼠颅脑损伤后脑组织Na^ -K^ -ATP酶、Ca^2 -ATP酶和Mg^ -ATP酶活性的影响。方法：56只Wistar大鼠随机分为：假手术组(8只)、模型组(16只)、针刺治疗组(16只)、药物治疗组(16只)，后三组用自由落体法致大鼠左侧颅脑损伤。针刺治疗组和药物治疗组于术后0．5h给予治疗，然后每隔12h治疗一次。模型组、针刺治疗组、药物治疗组于术后24h、72h取大脑组织，假手术组于术后72h取大脑组织，测定组织匀浆中ATP酶的活性。结果；(1)Na^ -K^ -ATP酶、Ca^2 -ATP酶和Mg^2-ATP酶活性在伤后24小时明显下降，伤后72小时活性更低。(2)24h针刺组Na^ -K^ -ATP酶和Mg^2-ATP酶的活性变化不明显，Ca^2 —ATP酶活性的变化明显。结论：(1)针刺对Na^ -K^ -ATP酶和Mg^2-ATP酶酶的速发型反应不如迟发型反应明显。(2)针刺对Ca^2 —ATP酶活性的速发型和迟发型反应都很明显。(3)针刺可以减轻脑组织细胞内钙离子超载和神经细胞损害。     

温阳、解郁及温阳解郁方对母婴分离结合慢性神经疼痛应激小鼠疼痛敏感性及抑郁样行为的调节作用

目的 观察母婴分离小鼠给予慢性神经疼痛应激后的行为、痛阈改变，以及血清和中枢抑郁、疼痛相关指标的变化，以温阳方、解郁方、及温阳解郁方进行干预探讨温阳解郁法抗抑郁、改善疼痛敏感的可能机制。方法 以小鼠出生日为PD0，小鼠在出生后随机分为对空白组和母婴分离组，母婴分离组在PD5~14进行8 h·d^-1的母婴分离，离乳后将其分为母婴分离组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组，每组15只，同时以15只未经母婴分离的同期雄性仔鼠作为空白组。空白组、母婴分离组小鼠于PD21~90以普通发育饲料喂养，余组分别以温阳方二仙汤、解郁方逍遥散、温阳解郁方及氟西汀药混饲料喂养（用药剂量分别为5.84、12.00、16.68 g·kg^-1及2.60 mg·kg^-1）。于PD91行坐骨神经结扎手术，建立母婴分离+慢性神经病理性疼痛模型。采用旷场实验观察各组小鼠抑郁样行为，测量机械痛阈和温度痛阈检测各组小鼠疼痛敏感性，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清皮质酮（CORT）、P物质及β-内啡肽（β-EP）含量，免疫组化检测杏仁核糖皮质激素受体（GR）和下丘脑β-EP蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测杏仁核糖皮质激素受体基因（Nr3c1）、FK506结合蛋白5基因（FKBP5）、代谢型谷氨酸受体5基因（GRM5）及脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达量。结果 与空白组比较，母婴分离组小鼠5 min旷场中心停留时间和运动总距离均显著减少（P<0.01），机械痛阈显著降低（P<0.01）。血清CORT和β-EP均显著上升（P<0.01），FKBP5 mRNA表达显著下降（P<0.01）。下丘脑β-EP表达上升，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。与母婴分离组比较，各给药组5 min旷场中心停留时间均明显增加（P<0.05，P<0.01），温阳组、温阳解郁组和氟西汀组小鼠在5 min旷场运动总距离明显增加（P<0.05，P<0.01），各给药组痛阈均不同程度上调。解郁组小鼠血清CORT显著下降（P<0.01），β-EP明显下降，但差异无统计学意义；BDNF mRNA显著上升（P<0.01）。温阳组小鼠Nr3c1及GRM5 mRNA均明显下降（P<0.05，P<0.01）。温阳解郁组小鼠血清CORT明显下降（P<0.05），Nr3c1、GRM5及BDNF mRNA均下降（P<0.05，P<0.01），差异具有明显统计学意义，各给药组下丘脑β-EP表达水平均有不同程度提升，但差异无统计学意义。温阳组、解郁组和温阳解郁组小鼠杏仁核GR表达水平均明显上升，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。结论 温阳解郁方可通过增强杏仁核GR表达、抑制杏仁核区神经可塑性及兴奋性达到抑制中枢疼痛敏化和调节下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能，缓解抑郁行为和改善躯体疼痛过敏的作用。     

散偏汤加减治疗偏头痛研究进展

偏头痛是一种常见的神经血管功能紊乱性疾病，多表现为反复发作的单侧或两侧剧烈头痛，偶伴恶心、呕吐、畏光、畏声等症状，具有反复发作、家族遗传的特点。中医认为偏头痛属于“头风”范畴，其发病多由外风引动导致，且与肝风内动有关。散偏汤出自清代医家陈士铎所创《辨证录·头痛门》，由川芎、白芷、郁李仁、香附、柴胡、白芥子、甘草组成，具有行气止痛，活血化瘀的作用，临床上常用于治疗偏头痛。目前应用散偏汤治疗偏头痛的临床研究多使用原方加减用药，或单独应用，或与西药/针刺联合应用。临床试验结果显示可以明显降低偏头痛积分、疼痛视觉模拟评分及内皮素水平等，减少止痛药使用频率，改善偏头痛症状显著且不良反应少。动物实验多从偏头痛发病不同解剖水平上探究散偏汤加减的起效机制，主要有降低一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）水平，减少神经递质的释放如5-羟色胺（5-HT）、神经肽（NPY），抑制神经元兴奋，阻断伤害性感受传导通路的传递，进而促进脑血液循环，调节神经递质而达到防治偏头痛的作用。该文结合偏头痛的发病机制，对散偏汤加减的临床应用、实验研究等方面的最新进展进行了系统综述，总结其防治偏头痛的作用机制，为临床治疗偏头痛提供新的思路。     

当代名中医治疗偏头痛的经验

本文对1979～2009年公开发表的文献进行检索,关键词输入"偏头痛"和"经验",对检索到的文献进行归类整理,归纳当代名中医治疗偏头痛的经验,主要从以下几方面治疗:从肝论治,从少阳胆论治,从风论治,调整脏腑,升阳祛霾法,调和营卫法.     

国医大师王琦教授中医体质学理论在疼痛性疾病诊疗中的临床应用

慢性疼痛涉及临床各科的多种疾病，包括一些重大疾病和疑难疾病。中医体质学是中医学的新兴学科，其体质分类、体病相关思想以及“辨体论治”的诊疗方法已广泛应用到临床各科疾病的诊疗中。文章探讨了以中医体质学思想指导疼痛性疾病诊疗的若干理论问题，认为疼痛性疾病的发生与患者体质类型存在密切的关系。因此，在临床辨治疼痛性疾病时要考虑患者体质因素。所施方药不仅要符合病证特点，也要针对患者体质类型。并列举国医大师王琦教授辨体论治慢性前列腺炎盆腔疼痛综合征、偏头痛、过敏性头痛等疼痛性疾病的案例加以分析，以期为相关领域同仁提供参考。     

《黄帝内经》中头痛理论探讨

《内经》中有关头痛的论述颇为丰富,提出了六经病变所致头痛及其伴随症状、针灸治疗方法,并根据头痛伴随的症状、症状所在的经络脏腑,而调其有关脏腑经络所归宿的腧穴。头痛外感病因:风、寒、湿、寒湿、热,内伤病因:脏腑气血功能紊乱,寸口脉短弱而出现头痛的脉诊诊断,提出治疗头痛的原则:调阴阳,补不足,泻有余;详细记述了厥头痛、头项部疼痛的治疗方法,同时还提出头痛治疗的宜忌及头痛的预后。为后世关于头痛病因、病机、辨证论治、治疗方法、针灸理论奠定了理论基础。     

一粒金搐鼻散治疗偏头痛给药方法探讨

鼻腔给药是治疗头痛的有效方法之一。搐鼻散是朱丹溪明确的提出治疗偏头痛的组方,其药物组成包括青黛、荜茇、藁本、延胡索、白芷、川芎、猪胆汁。全方药物均入于肝胆二经,除具有治疗标证的止痛作用外,每一味药物也有针对偏头痛病因病机的治本作用。西医学认为鼻腔给药治疗偏头痛具有以下几个特点:(1)生物利用度高,避免了胃肠吸收和肝脏的首过消除效应;(2)鼻腔内皮上的小孔可使药物直接进入脑脊液,或通过丰富的血管较快穿过血脑屏障;(3)使用方便,患者依从性较好,避免了熬药、服药等较复杂的过程;(4)起效迅速,非常适于急救、自救以及疾病发作时的中止性治疗。