不同条件下骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性研究

目的:探讨并优化大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养的方法,筛选出最佳培养时间,并鉴定其生物学特性,为BMSCs的应用奠定基础。方法:在不同季节,采用贴壁筛选法分离纯化BMSCs,并通过传代培养对其进行扩增。倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长特征,并按时间段绘制细胞生长曲线。流式细胞术检测BMSCs抗原分子CD90及造血干细胞抗原分子CD45的表达;用β-巯基乙醇诱导BMSCs分化。结果:生长曲线分析,冬季培养的BMSCsF3代潜伏期为4d,对数期为5～9d,第10天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象;春、夏、秋三季培养的BMSCsF3代潜伏期为2d,对数增殖期为3～6d,第7天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象。流式细胞术检测F0代细胞中,CD90+CD45-细胞为3.5%,F3代细胞中CD90+CD45-细胞达到97%;F3代BMSCs镜下呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长。β-巯基乙醇诱导BMSCs5h后表现出明显的神经元样细胞形态。结论:不同培养季节对BMSCs生长曲线影响明显,春夏秋三季细胞生长较快,而冬季细胞生长缓慢,体现了"春生、夏长、秋收、冬藏"的生物规律;贴壁筛选法是理想的体外分离扩增BMSCs的培养体系,所培养的BMSCs纯度高、生物学性状稳定。     

磁共振导航定位高频重复经颅磁刺激治疗抑郁发作的初步研究

目的探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation, r TMS)治疗中应用磁共振导航定位与"标准5 cm法"定位的位置差异。方法对12例抑郁发作患者分别采用磁共振导航定位和5 cm定位法定位背外侧前额叶(dorsolateral prefrontal cortex, DLPFC),比较两者位置的差异,并使用汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression rating scale, HAMD)观察抗抑郁治疗效果。结果磁共振引导下定位与传统定位的DLPFC相距平均(17.42±9.62)mm,该距离具有统计学意义(t=6.00, P0.01)。共有9例患者接受超过5次r TMS治疗(最少6次,最多25次),r TMS治疗前后的HAMD分别为(24.56±4.50)分与(7.78±4.71)分,差异具有统计学意义(t=-11.20,P0.01),其中有4例患者达到临床痊愈。结论磁共振导航定位与标准5 cm方法定位的位置存在明显差异,在r TMS抗抑郁治疗研究中采用磁共振引导定位,能够更精准定位DLPFC区域。     

脑电生物反馈联合拉莫三嗪治疗慢性精神分裂症伴迟发性运动障碍患者的临床疗效分析

目的 探讨脑电生物反馈联合拉莫三嗪对慢性精神分裂症伴迟发性运动障碍（TD）患者的临床疗效。方法 选取2018年6月—2020年6月在杭州市第七人民医院治疗的慢性精神分裂症伴TD患者82例。按照随机表法分为对照组和观察组，每组41例。两组患者维持原有抗精神疾病药物方案。对照组给予拉莫三嗪治疗，观察组在对照组基础上结合脑电生物反馈治疗。比较两组治疗8周后疗效，治疗前与治疗8周后异常不自主运动评定量表（AIMS）、β频段的脑电功率值、简明精神病量表（BPRS）评分和阳性和阴性症状量表（PANSS）评分变化。结果 观察组总有效率高于对照组（P <0.05）。观察组治疗前后AIMS评分、BPRS评分及PANSS评分的差值大于对照组（P <0.05）。观察组治疗前后C3、C4、P3和P4点β频段的脑电功率值的差值大于对照组（P <0.05）。结论 脑电生物反馈联合拉莫三嗪治疗慢性精神分裂症伴TD患者疗效良好，且可减轻患者迟发性运动障碍。     

地黄饮子孵育BMSCs移植对大鼠脑梗塞HSP70和VEGF表达的影响

目的 探讨地黄饮子孵育骨髓间充质干细胞(Bone marrow stromal stem cells, BMSCs) 移植对大鼠脑梗塞HSP70和VEGF表达情况的影响.方法 健康SPF级Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、维甲酸组和地黄饮子组.用线栓法制成Wistar大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO),术后24 h假手术组、模型组大鼠经尾静脉注射生理盐水,其余各组大鼠经尾静脉输入相应药物孵育BMSCs.分别于移植后7d和14d后断头取脑,用免疫组化法检测脑组织HSP70和VEGF蛋白的表达情况.结果 与假手术组比较,模型组HSP70和VEGF表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组HSP70和VEGF表达显著升高(P<0.05),其中药物孵育BMSCs组HSP70和VEGF表达均高于单纯血清孵育BMSCs组(P<0.05).结论 促进脑组织HSP70和VEGF的表达可能是地黄饮子孵育BMSCs移植治疗脑梗塞的作用机理之一.     

地黄饮子孵育骨髓间充质干细胞对大鼠缺血性脑损伤Bcl-2及Bax表达的影响

目的:探讨地黄饮子孵育骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对鼠缺血性脑损伤的脑组织Bcl-2(B淋巴细胞性白血病-2)及Bax(Bcl-2相关X蛋白)表达的影响作用。方法:选用健康SPF级Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、维甲酸组和地黄饮子组。用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,术后24h,假手术、模型组大鼠尾静脉注射生理盐水,其余各组大鼠经尾静脉输入等量相应药物诱导后的BMSCs。移植7d和14d后断头取脑,用免疫组化法染色,分别观察大脑皮质每高倍镜视野Bcl-2、Bax的阳性表达情况。结果:与假手术组比较,模型组缺血性脑损伤时大脑皮层均有Bcl-2和Bax的表达明显增加(P<0.05);地黄饮子组、维甲酸组、BMSCs组与假手术组、模型组比较,缺血性脑损伤时皮层Bcl-2的表达均显著增高(P<0.05),Bax的表达均明显降低(P<0.05)。结论:Bcl-2和Bax在缺血性脑损伤过程中发挥重要作用,地黄饮子对缺血性脑损伤具有保护作用,其保护作用机制可能与提高Bcl-2表达、抑制Bax表达而减少细胞凋亡有关。     

不同补肾法在脑梗死大鼠体内促骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用

目的 探讨不同补肾法在脑梗死大鼠体内对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化的影响.方法 用线栓法制备大鼠大脑中动脉梗塞(MCAO)模型,随机分为空白诱导组、左归丸诱导组、地黄饮子诱导组、右归丸诱导组、维甲酸(RA)诱导组、左归丸联合RA诱导组、右归丸联合RA诱导组、地黄饮子联合RA诱导组,不同补肾法代表方药含药血清孵育BMSCs,移植后7、14 d进行移植细胞神经标志蛋白的检测.结果 诱导BMSCs经静脉移植入大鼠体内后,阳性表达神经细胞的相关蛋白神经元特异性烯醇化酶(NSE)、Nestin及胶质纤维酸性蛋白(GFAP).结论 不同补肾法在脑梗死大鼠体内能够促BMSCs向神经元样细胞分化,且补阴类代表方左归丸和阴阳双补类代表方地黄饮子在体内诱导分化的效果优于补阳类代表方右归丸.     

CYP2C19基因多态性对精神分裂症患者丙戊酸血药浓度的影响

目的 研究CYP2C19基因多态性与精神分裂症患者心境稳定剂丙戊酸血药浓度的关系。方法 选择奥氮平治疗且服用丙戊酸钠作为心境稳定剂的精神分裂症患者160例,采集血液,测定CYP2C19基因型以及丙戊酸血药浓度,比较各个基因型血药浓度的差异。结果 *2/*2型(122.06±41.30)mg·L^-1和*2/*3型(132.34±51.34)mg·L^-1患者丙戊酸血药浓度明显高于野生*1/*1型(79.41±25.14)mg·L^-1(P<0.05或P<0.01);*1/*1、*1/*2和*1/*3型之间、*2/*2和*2/*3型之间血药浓度无统计学差异;PM型血药浓度(122.13±42.85)mg·L^-1与EM型(80.59±48.60)mg·L^-1比较,显著升高(P<0.05)。 结论 *2/*2和*2/*3型CYP2C19患者,其血液丙戊酸浓度较高,该类患者服用丙戊酸作为精神分裂症心境稳定剂时,宜适当降低用药剂量。     

精神分裂症阳性和阴性症状患者奥氮平治疗疗效与血浆BDNF关系研究

目的 研究阳性症状和阴性症状精神分裂症患者奥氮平治疗前后血浆BDNF水平的变化。方法 按入组和排除标准分别募集阳性、阴性症状精神分裂症患者以及健康对照,2组精神分裂症患者均接受奥氮平治疗,治疗前后PANSS量表得分变化评价奥氮平治疗效果,ELISA法测定病例组治疗前后以及对照组血浆BDNF水平,并比较差异。结果 阳性症状精神分裂症患者治疗前后PANSS得分与血浆BDNF水平均呈显著负相关(P<0.01);治疗前血浆BDNF明显低于对照组(P<0.01);奥氮平治疗效果为好或中的患者,治疗后血浆BDNF水平比治疗前显著升高(P<0.01),而治疗无效的患者,治疗前后血浆BDNF差异无统计学意义。阴性症状患者奥氮平治疗前后PANSS得分与血浆BDNF水平均无明显相关性,且治疗前后血浆BDNF水平差异无统计学意义。结论 血浆BDNF可作为判断阳性症状精神分裂症患者奥氮平治疗是否有效的参考指标。     

精神专科管理中中成药规范化管理实践

目的:探讨精神专科管理中中成药规范化管理方法与管理效果。方法:2018年8~12月医院精神专科按照常规方法实施中成药管理(对照组),2019年1~10月医院精神专科管理中中成药采取规范化管理(观察组),观察组与对照组各随机抽取500张处方与500张中成药用药说明书予以评价,分析中成药不规范管理情况。结果:观察组中成药说明书对应药物成分、核准日期、用法用量、不良反应、特殊用药、毒理药理及临床试验等标识率高于对照组(P<0.05);观察组中成药使用不规范率低于对照组,观察组临床用药不规范率低于对照组,观察组患者治疗期间不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:加强对精神专科管理中中成药规范化管理,可减少中成药说明书、中成药处方及临床使用不规范率,提高患者用药安全性。