hTERT启动子调控hNIS基因介导肺癌细胞碘摄取和131I治疗的实验研究

目的 构建含人端粒酶反转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠/碘同向转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并靶向转染至肺癌A549细胞中特异性表达.探讨hTERT启动子调控的hNIS基因介导放射性碘治疗肿瘤的可能性.方法 应用AdEasy系统构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS,同时构建巨细胞病毒(CMV)启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV.hNIS作为阳性对照,不含hNIS的重组腺病毒Ad-CMV作为阴性对照.应用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性,摄碘实验检测表达的hNIS蛋白功能,细胞克隆形成实验评价131I对转染肿瘤细胞的毒性作用.结果 成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS及Ad-CMV,并经PCR验证正确.RT-PCR证实hNIS cDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞摄碘能力比阴性对照组Ad-CMV转染的细胞分别提高了23和31倍,且摄碘能力可以被NaClO4抑制.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞均可被131I杀死,2组细胞成活率分别为(31.2±1.45)%和(23.6±4.08)%,而阴性对照组和未转染病毒组分别为(89.0 ±2.99)%和(91.2 ±4.63)%.结论 hTERT启动子调控的hNIS重组腺病毒转染肿瘤细胞后,应用131I治疗有望成为一种新的基因靶向治疗手段.     

Raji 细胞系特异性Fab噬菌体抗体库的构建及筛选

目的构建针对B细胞淋巴瘤Raji细胞系噬菌体抗体库并从中筛选出特异性的抗体。方法以Raji细胞免疫BALB/c小鼠,RT-PCR法从脾淋巴细胞中扩增抗体轻链к和重链Fd基因。经SacI/XbaI和XhoI/SpeI双酶切,依次克隆入噬菌体载体pComb3H-SS中,并电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,构建B细胞淋巴瘤Raji细胞系特异性Fab噬菌体抗体库。以Raji细胞为抗原进行筛选,获得抗Raji细胞的抗体,通过ELISA法进行抗原结合活性的测定,并对所得阳性克隆进行基因测序分析。结果构建了容量为2.18×107的抗人B细胞淋巴瘤Raji细胞系的Fab噬菌体抗体库,并筛选获得了与Raji细胞系特异性识别结合的8株阳性克隆。对其中两个阳性克隆进行基因序列分析,结果显示其重链可变区、轻链可变区分别与免疫球蛋白基因库中已注册的鼠源性免疫球蛋白重链可变区和轻链可变区序列具有高度同源性。结论成功地构建Fab噬菌体抗体库并筛选出针对Raji细胞系膜抗原的抗体,为进一步研究B细胞淋巴瘤的免疫治疗提供了实验基础。     

大黄-丹参通过miRNA-155对脓毒症大鼠血清炎症因子水平的影响

目的探讨大黄-丹参通过miRNA-155对脓毒症大鼠血清中炎症因子水平的影响。方法 Wistar大鼠分为正常对照组、脓毒症模型组、大黄-丹参中药组、miRNA-155抑制剂组,每组15只。除正常组大鼠外,其余大鼠建立脓毒症模型,在此基础上给予相应的药物干预。在造模3 h后检测大鼠血清中IL-6、IL-10水平;应用RT-PCR检测大鼠血清中miRNA-155的表达。结果脓毒症模型组大鼠血清miRNA-155表达、IL-6和IL-10水平较正常对照组高(P0.05),大黄-丹参中药组和miRNA-155抑制剂组的miRNA-155表达、IL-6和IL-10水平均较脓毒症模型组低(P0.05),大黄-丹参中药组和miRNA-155抑制剂组的miRNA-155表达、IL-6和IL-10水平差异无统计学意义(P0.05)。结论大黄-丹参或可通过miRNA-155降低脓毒症大鼠血清IL-6、IL-10水平,从而减轻脓毒症炎症反应。     

中医药通过肺淋巴管系统干预间质性肺疾病的研究进展

间质性肺疾病(ILD)是一种以弥漫性肺实质的炎症和肺纤维化改变为特征的疾病。淋巴管系统在炎症和纤维化疾病中发挥重要作用。已知在炎症性疾病和纤维化疾病中淋巴管系统具有重要功能。但在间质性肺疾病中淋巴管系统作用的相关研究较少,随着科技的进步,逐渐发现了间质性肺疾病中肺淋巴管系统发挥作用的重要机制。且近年来运用中药疗法干预淋巴管系统来治疗疾病成为研究热点。现将基于肺淋巴管系统与间质性肺疾病中的相关性来探讨中医药对间质性肺疾病的干预作用。     

强直性脊柱炎患者中医证型与生存质量关系的研究

目的:探讨强直性脊柱炎(AS)患者中医证型与生存质量的关系。方法:采集142例AS患者人口学资料、中医证候、SF-36量表及实验室指标等临床评价指标进行相关统计,分析肾虚督寒型、肾虚湿热型及肝肾不足型三种证型与生存质量关系,同时研究中医证型与AS评价指数之间的相关性。结果:肾虚督寒型患者在本次调查中生存质量总分最低(P<0.05),突出表现在活力及精神健康两个维度(P<0.05);不同证型AS患者生存质量生理功能、生理职能、躯体疼痛、活力、精神健康等维度上均有不同(P<0.05);不同证型AS患者BASDI、BASFI评分及炎性指标CRP、ESR间存在差异(P<0.05)。结论:不同证型AS患者生存质量受损维度不同,AS临床评价指数可以在一定程度上反映不同证型的特点。在辨证施治的过程中采取针对性的措施更有利于提高中医药的疗效,改善患者生存质量。     

益气化瘀法治疗脓毒症疗效的Meta分析

目的 针对益气化瘀法治疗脓毒症的疗效进行Meta分析,探析该治法在脓毒症中的作用。方法 先后检索中国知网（CNKI）、万方数据库（WF）、维普数据库（VIP）、科学网（Web of Science）、荷兰医学文摘Embase数据库、美国国立医学图书馆PubMed数据库中从建库至2021年12月01日发表的关于益气化瘀法治疗脓毒症患者的随机对照临床试验（Randomized controlled trial RCT）。对照组采用常规治疗措施;治疗组在对照组基础上采用以益气化瘀法为主的中医治疗,包括中草药和中成药。主要观察指标为有效率、28天死亡率、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEII）;次要观察指标为序贯器官衰竭评分（SOFA）、中医证候评分、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、白细胞（WBC）总数、白细胞介素（IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、D二聚体（D-Di）、血小板（PLT）、血乳酸（Lac）水平等。由2位研究者分别独立检索文献、收集数据及评估偏移风险;应用RevMan 5.3完成统计分析...     

冠状动脉支架置入后短期内行肺癌手术的护理

总结33例冠脉支架置入术后短期内行肺癌手术的患者护理,术前对患者进行围术期血栓及出血风险评估,进行呼吸道准备,术后监测凝血指标,严密观察出血的情况,合理选择抗凝及止血治疗;监测生命体征,指导有效咳嗽和深呼吸锻炼,心理护理支持及疼痛护理,促进呼吸功能恢复。     

玻璃体切割手术联合地塞米松玻璃体腔植入剂治疗重度特发性黄斑前膜的短期临床研究

目的观察玻璃体切割手术(PPV)联合地塞米松玻璃体腔植入剂(DEX)治疗重度特发性黄斑前膜(IMEM)的疗效。方法前瞻性临床病例研究。2018年12月至2021年5月于天津医科大学眼科医院检查确诊的重度IMEM患者24例25只眼纳入研究。其中, 男性7例7只眼, 女性17例18只眼;年龄(57～ 84)岁。IMEM分期为3～ 4期。患眼均行最佳矫正视力(BCVA)、频域光相干断层扫描(SD-OCT)检查。采用SD-OCT仪测量患眼中心凹视网膜厚度(CMT)。将患眼随机分为PPV组、PPV+DEX组, 分别为11、14只眼。均行标准经睫状体平坦部三通道25G PPV。手术中均联合白内障超声乳化、剥膜、人工晶状体植入。手术完毕时PPV+DEX组患眼行玻璃体腔注入0.7 mg DEX治疗。手术后1周及1、3、6个月采用手术前相同设备和方法行相关检查, 对比观察两组患眼BCVA、CMT变化。组间BCVA、CMT比较采用t检验。结果与手术前比较, 手术后1、3、6个月, PPV+DEX组患眼BCVA明显提高(t=3.974、4.639、4.453), CMT显著降低(t=2.955、3.722、...     

胸腔积液中检测出梅毒抗体1例

梅毒诊断常依赖于血液的梅毒抗体检查，神经梅毒则必须做脑脊液的梅毒抗体检查。据我们所知，浆膜腔积液的梅毒抗体检查未见报告。2006年8月，我们对一例相关患者血液、脑脊液和胸腔积液中进行了梅毒抗体检查。现报告如下。     

131I标记B细胞淋巴瘤Fab抗体荷瘤裸鼠体内分布和显像

目的 研究131I标记B细胞淋巴瘤Fab抗体(131I-Fab抗体)在荷人B细胞淋巴瘤裸鼠体内的分布和放射免疫显像效果.方法 应用免疫组织化学和流式细胞仪检测经噬菌体抗体库技术获得的B细胞淋巴瘤Fab抗体的免疫活性.以Iodogen法对Fab抗体和CD20单克隆抗体(简称单抗,对照)进行131I标记.标记物经尾静脉注入荷瘤裸鼠后2,4,8和24 h分别进行显像,并测定荷瘤裸鼠体内主要组织的放射性分布.结果 免疫组织化学和流式细胞仪检测结果表明Fab抗体和131I-Fab抗体均能与Raji细胞膜抗原结合,结合率＞87%.显像结果显示131I-Fab抗体在注入荷瘤裸鼠体内8 h即可使肿瘤清晰显影,24 h基本被清除.131I-CD20单抗注入后24 h肿瘤可见放射性浓聚.荷瘤裸鼠体内分布结果表明在2,4和8 h 131I-Fab抗体组肿瘤每克组织百分注射剂量率(%ID/g)分别为(1.37±0.28),(1.84±0.13)和(2.21±0.15)%ID/g,均高于对照组[分别为(0.33±0.06),(0.62±0.08)和(1.46±0.24)%ID/g;F=52.22,278.42和29.00,P均＜0.05],24 h则明显低于对照组[分别为(0.44±0.07)和(3.56±0.66)%ID/g;F=89.7,P＜0.05].2,4,8,24 h 131I-Fab抗体组肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值分别为(0.22±0.03)～(5.44±0.31),(0.43±0.11)～(21.01±3.97),(1.09±0.07)～(20.28±2.77),(1.12±0.02)～(10.29±1.78);而对照组T/NT比值分别为(0.04±0.01)～(3.10±0.29),(0.11±0.05)～(7.99±1.81),(0.48±0.06)～(23.55±1.69),(2.32±0.34)～(33.23±6.83).结论 131I-Fab抗体具有相对分子质量小、活体定位准确高效、显像早和清除快速等优点, 对临床放射免疫显像诊断B细胞淋巴瘤具有潜在的应用价值.