大鼠血管平滑肌细胞体外培养的表型转换及其鉴定

目的探讨体外传代培养对血管平滑肌细胞表型转换的影响,确认体外培养的血管平滑肌细胞不同表型的最佳指标。方法选择以未经培养传代的血管平滑肌细胞和体外培养的第4代血管平滑肌细胞作对比研究,采用免疫组织化学法检测血管平滑肌细胞α肌动蛋白,逆转录聚合酶链反应检测血管平滑肌细胞肌动蛋白22α、基质γ-羧基谷氨酸蛋白和骨桥蛋白各目的基因mRNA相对表达水平,透射电镜观察血管平滑肌细胞的形态学特征,确定其表型转换特征及各表型指标的区分效能。结果电镜观察显示,未经培养传代的血管平滑肌细胞胞质中肌丝分布丰富、均匀,并可见到收缩表型血管平滑肌细胞的典型结构—密斑,内质网、高尔基复合体等细胞器相对较少;而体外培养至第4代时血管平滑肌细胞胞质中肌丝明显减少,内质网、高尔基复合体明显增多。原代血管平滑肌细胞α肌动蛋白免疫组织化学染色强且广泛,而体外培养至第4代时α肌动蛋白染色明显变浅、稀疏。第4代血管平滑肌细胞的骨桥蛋白mRNA表达量较原代血管平滑肌细胞显著增高(P<0.01),肌动蛋白22α mRNA在血管平滑肌细胞中的表达量较原始血管平滑肌细胞降低,但差异不大,基质γ-羧基谷氨酸蛋白mRNA表达量较未经培养传代的血管平滑肌细胞升高(P<0.05)。结论血管平滑肌细胞体外培养至第4代,即可从典型的收缩表型转化为合成表型,提示血管平滑肌细胞是一种很容易去分化的细胞。电镜形态观察α肌动蛋白和骨桥蛋白在两型血管平滑肌细胞中的差异,可作为血管平滑肌细胞表型区分的有效标志。而肌动蛋白22α和基质γ-羧基谷氨酸蛋白的表达在两型血管平滑肌细胞中虽有一定的差异,但重叠较大。     

增液承气汤加减治愈便秘

增液承气汤加减治愈便秘王生兰，李锦春增液承气汤是《温病条辨》之方，临床广泛应用阴虚便秘。原文：“阳明温病，无上焦症．数日不大便．当厂之．若其人阴素虚．不可行承气各。增液汤主之。津液不足，无水舟停者．间服增液，再不下者，增液承气汤主之。’皙遇１例治疗如...     

ZMPSTE24基因突变致限制性皮病1例病例报告并文献复习

目的 报告1例ZMPSTE24基因突变致胎儿死亡的限制性皮病(RD)病例,总结临床特征及基因突变的特点,为产前咨询提供依据。方法 对1例ZMPSTE24基因突变的RD患儿的临床资料和测序结果进行分析,结合人类基因突变数据库(HGMD)和PubMed,对ZMPSTE24基因突变所致疾病临床表型进行文献复习。结果 男,死胎,G1P1。母亲孕27周行超声检查,胎儿臀位、羊水过少、羊水指数1.9 cm、胎儿右侧胸腔少量积液。孕31⁺³周因胎膜早破入院,伴妊娠期糖尿病,超声示胎儿宫内重度生长受限。孕32⁺²周娩出一男死胎,具有典型RD表型。为明确病因诊断行新生儿panel测序并行Sanger测序验证,检测到ZMPSTE24基因的一个纯合移码突变(c.1085dupT,p.Leu362PhefsTer19),为已报道的RD热点突变,突变频率达57.14%。检索HGMD和PubMed,共检索到ZMPSTE24基因的32种致病突变(63例),导致4种不同的疾病表型。检索万方、中国知网和PubMed数据库,检索时间从建库至2019年7月25日,共有49例(包括本文1例)ZMPSTE24突变导致RD。ZMPSTE24突变的临床表型严重程度与锌金属蛋白酶活性和核纤层蛋白前体蛋白的堆积程度相关。结论 本例检测到的Leu362PhefsTer19突变为ZMPSTE24基因热点突变,ZMPSTE24基因型与临床表型呈高度相关。本研究提示妊娠期胎儿发育异常应注意RD可能,基因检测可明确诊断。早期基因诊断可为临床及时干预和遗传咨询提供依据。     

病案分析法在病理生理学成人教学中的应用

病理生理学是研究疾病发生、发展规律及其机制的科学.作为一门联系基础医学和临床医学的桥梁性学科, 在医学教育中起着承前启后的作用.近十年来[1],成人教育发展迅速,随着医学科学技术的发展,新的医学理论知识和技术的不断出现,在职医学人才无论是出于提高学历的需要, 还是知识更新的要求,重新回到学校学习医学理论与实践知识的人越来越多,而成人教育与大学普通学生的教育有着一定的差异.     

半胱氨酸对人血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察半胱氨酸（Cys）对人血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMCs,用不同浓度的Cys培养液孵育细胞24h,用MTT法检测VSMCs增殖,流式细胞术检测VSMCs凋亡,RT-PCR法检测bax mRNA的表达。结果体外培养的人VSMCs在终浓度为100、200、500和1000μmol/LCys的培养液中孵育24h后的吸光度（A）值均高于对照组（P〈0.05）,表明Cys可诱导人VSMCs增殖;但同时,VSMCs凋亡细胞数明显高于对照组（P〈0.05）,bax的表达增强,表明Cys亦诱导了人VSMCs凋亡。结论浓度较高时半胱氨酸可同时诱导VSMCs增殖和凋亡。     

病理生理学双语教学的实践与探讨

病理生理学双语教学是教学改革的趋势。青海大学医学院对2006级5年制临床医学专业学生实施《病理生理学》双语教学,取得了一定经验,摸索出了比较合适的双语教材和课堂教学模式。     

羌活醇提物预处理对大鼠HIRI模型的防护作用

目的探讨羌活醇提物对大鼠肝缺血再灌注损伤（hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI）模型肝功能和抗氧化酶的影响。方法将60只Wistar大鼠分为空白组（6只）、模型组（18只）、丹参预处理组（DS组,18只）和羌活预处理组（QH组,18只）,后三组组内再分为缺血45min组（145）、缺血45min再灌注30rain组（145R30）和缺血45min再灌注60min组（145R60）3小组,每组6只,造模后测定大鼠各时点即刻的血清丙氨酸氨基转移酶（alanine amiotransferase,ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）水平以及大鼠肝组织中丙二醛（malondiadehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力水平。结果MDA：羌活组145R30min即刻点MDA含量明显高于145min即刻点（P〈0．01）;145min即刻点,羌活组MDA含量高于模型组（P〈0．05）;145R30min即刻点,丹参组与羌活组MDA含量均明显高于模型组（P均〈0．01）;SOD：羌活组145R30min和145R60min时点的肝组织SOD活力均高于145min时点（P均〈0．01）;145R30min即刻点模型组肝组织SOD活力均低于丹参组和羌活组（P均〈0．001）。结论羌活醇提物可能是通过提高HIRI大鼠肝组织的总SOD活力,增强其对氧自由基的清除能力,减轻脂质过氧化损伤,从而起到保护肝脏的作用。     

病理生理学实验双语教学的实践与探讨

病理生理学实验双语教学是理论双语教学的有益补充与促进。青海大学医学院在前期开展病理生理学理论教学的基础上对2009级5年制临床医学专业本科学生实施了病理生理学实验双语教学,取得了一定经验,有力地促进了病理生理学学科双语教学的进一步开展。     

制作液体记滴装置扩展二道仪的描记功能

自从二道生理记录仪替代记纹鼓后，给病理生理学，生理学和药理学等许多学科的实验教学带来了极大的便利，而且大大提高了实验结果的准确度。但二道仪仅能同时描记两项指标“’，在做休克、心衰等实验时需观测多项指标，除了描记呼吸和血压外，没有测定尿量的空余描记位置。既便占用一个抽记位置，还需要连接一些昂贵而繁琐的装置（象积分放大器和其它转换部件等）才可对尿液数进行描记。本文提出并研制出了在二道仪的标记描笔上连接有关电路和部件便能记录电解质溶液滴数的液体记滴装置，经过二年多的实践，使用效果很好。l记满装置的主要…