重组MHCⅠ类分子K^b-EGFP分子的构建及表达

目的 构建绿色荧光蛋白标记的MHCⅠ类分子K^b(K^b-EGFP融合蛋白)，并在哺乳动物细胞中获得功能性表达。方法 RT-PCR的方法获得小鼠MHCⅠ类分子K^b cDNA，克隆入真核表达载体pEGFP-N1中EGFP分子的上游，脂质体转染COS-7细胞，G418加压筛选获得抗性重组细胞。荧光显微镜下观测重组分子的表达及胞内定位情况。结果 分子克隆的方法获得了预期的重组质粒，质粒经DNA序列测定证实阅读框无误，转染COS-7细胞后的抗性克隆胞浆内可以观察到明亮的绿色荧光，特征性地分布于细胞质膜，及核周、膜下的囊泡结构中。结论 所构建的K^b-EGFP融合蛋白在细胞内表达后具有MHCⅠ类分子的特征性分布，提示该重组分子具有野生型MHCⅠ类分子的生物学特性和胞内分布特征，为进一步深入研究MHCⅠ类分子胞内动态分布及分子功能提供了良好的细胞和分子模型。     

《医学免疫学》外训课程的设置及教学体会

《医学免疫学》是现代高等医学教育的重要基础课程,是医学留学生的必修课。结合外训学生自身特点,量身定制免疫学外训课程,分析和总结外训教学的经验和体会,为学校更好地开展留学生培训,进一步提高外训学生的教学质量提供参考依据。     

糖尿病鼠血液粘弹特性分析

动态观察分析糖尿病动物血液粘弹特性变化。在低切变率下全血的表现粘度(η0.512)、红细胞聚集指数(A1)．随病程进展逐渐升高;粘性分量(η’)和弹性分量(η")也显著高于正常．反映红细胞弹性特点的G值,在病程中一直高于正常组．给镁的糖尿病动物上述指标均有不同程度的降低。提示镁离子对改善糖尿病动物的血液粘度和红细胞的变形能力的异常可能有一定作用。 （中华眼底病杂志,1995,11：86-89）     

后极部环状脉络膜营养不良多模式眼底影像学特征

目的 观察分析后极部环状脉络膜营养不良多模式影像特点。方法 4例(8只眼)患者纳入研究。其中男性1例,女性3例。年龄36～76岁,平均52.8岁,病程1～10年,平均病程5年。随访6个月至2年。矫正视力0.3～0.5。经眼底照相、自发荧光、相干光层析成像术(OCT)、荧光素眼底血管造影(FFA)、视野和视网膜电图(ERG)检查,归纳出该病的临床特点及眼底影像学特征。结果 8只眼均呈围绕视神经和颞侧血管弓的对称性萎缩性病变,黄斑部受累相对较轻。自发荧光可见病灶区清晰的环形低荧光。30度视野检查示环状视野缺损,90度视野示中央视敏度下降显著,周边视野未见异常。结论 后极部环状脉络膜营养不良是一种罕见疾病,早期视网膜色素上皮(RPE)退行性改变,并逐渐累及脉络膜毛细血管、光感受器细胞层,最终引起进行性视力减退、夜视力下降、色觉异常。目前没有明确有效的治疗方法。     

乙肝病毒新型免疫原性多肽的设计,合成

在乙肝病毒高分辨率免疫识别的基础上，以Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白的优势Ｂ细胞表位Ｂ１、Ｂ２为基础，引入不同的Ｔｈ细胞表位Ｔｈ１、Ｔｈ２，结构参照ＭＡＰ设计，采用固相合成法，合成了ＭＡＰ１和ＭＡＰ２。产物经毛细管电泳分析和氨基酸组分鉴定。本研究为不同表位的重新组合构建新型多肽抗原及疫苗提供了线索。     

对表位生物学研究的认识和体会

<正> 1 研究表位生物学的必要性 蛋白质抗原不是通过它的完整分子来发挥功能的。它的特异性是通过其表位来体现的。一个蛋白质抗原,它不但含有B细胞、Th细胞、CTL细胞、NK细胞表位等与免疫识别密切相关的结构,同时还含有一些对于保护性免疫不利的结构。如:毒性或抑制性表位、优势非中和性表位、病理及自身抗原交义反应性表位等。人们还认识到同一分子的众多表位中,各表位对抗原性的贡献不同:有优势表位和非优势表位之分。此外,表位间的相对位置、构象特征、表位侧翼顺序等也与表位功能的表达密切相关。而表位的功能表达还取决于MHC限制位(agreotope)、组织位(histotope)……等相关结构。许多研究发现,天然蛋白抗原在引发免疫反应时,不能满足清除病原体的需要。究其原因,一是因为隐匿的保护性表位功能未能表达,因而所引发的保护性免疫不够强大。     

运用移动学习延伸医学免疫学课堂教学的研究

正爱尔兰教育技术专家Desmond Keegan博士曾经说过:"成功的教学手段,不是那些本身具有适合教学特性的技术,而是已经达到了广泛普及的技术~([1])。"针对医学免疫学理论内容纷繁抽象,相应课时数有限,传统"填鸭式"课堂教学很难激发初学者的主动求学热情,师生之间也缺乏互动等种种现状,     

人源轮状病毒的小型猪腹泻模型建立

目的建立人源轮状病毒的小型猪腹泻模型，为人源轮状病毒感染的免疫保护机制、致病机制及疫苗的研制奠定基础。方法ELISA与RT-PCR相结合分离鉴定野生型人源轮状病毒；用野生型人源轮状病毒G1与G3血清型口服接种不同日龄的小型猪，观察粪便排泄等临床症状，ELISA及免疫荧光分别检测粪便与小肠上皮组织中的轮状病毒抗原，光镜及透射电镜观察小肠上皮组织的病理变化与病毒样颗粒。结果3～5日龄小型猪均出现了典型的临床腹泻症状；粪便中轮状病毒抗原排泄可平均持续5～7d；小肠组织可见明显的病理变化，同时用免疫荧光检测方法可在小肠组织中检测到特异性轮状病毒抗原；透射电镜进行观察，在小肠组织的超薄切片中可见到大量的轮状病毒颗粒。30～35日龄小型猪可出现明显腹泻临床症状，粪便中轮状病毒抗原排泄可持续4～7d；56～60日龄小型猪接种野生型人源轮状病毒G1血清型后，均未出现典型的腹泻症状，但可持续排毒2～3d。结论小型猪可作为人源轮状病毒的理想腹泻动物模型。