SOD与NaHCO3对重症失血性休克低血管反应性的影响

目的 探讨超氧化物岐化酶(SOD)和NaHCO3治疗重症失血性休克低血管反应性的效果。方法 将28只重症失血性休克SD大鼠随机均分为SOD组、NaHCO3组、SOD NaHCO33个治疗组以及1个对照组，分别观察用药后各组大鼠的血管反应性、血压、微动脉血流量和24h存活率。结果 休克2h后，各组动物微血管对去甲肾上腺素(NE)的反应性显减低，NE阈值比失血前提高24-27倍。复苏治疗2h后，3个治疗组血管反应性都有回升，其中以SOD NaHCO3组效果最显，NE阈值下降至失血前的4．7倍。此外，给SOD NaHCO3后再给多巴胺的升压效应最为显，是对照组的1．9倍，且在回输血液后动物血压稳定在13.33kPa以上；治疗2h后，微动脉血流量是对照组的2．54倍，动物存活时间比对照组延长2．9倍。结论 SOD和NaHCO3对重症失血性休克大鼠的血管低反应性有恢复作用；先给SOD NaHCO3再给升压药物(多巴胺)可明显稳定提升动物血压，并提高动物存活率，提示SOD 碱可能是治疗重症失血性休克低血管反应性的一种新的治疗方法。     

N—甲基—D—天门冬氨酸和非N—甲基—D—天门冬氨酸类受体在新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电中的作用

目的：探讨N-甲基-D-天门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA)和非NMDA类受体在基本呼吸节律发生和调节中的作用。方法：在新生SD大鼠离体延髓脑片上记录舌下神经的呼吸节律性放电活动,在改良的Krebs液中加入兴奋性氨基酸类递质及相应的拮抗剂,观察其RRDA的影响。结果：使用非NMDA受体激动剂海人酸（Kainic acid,KA)后,可见呼吸周期及呼气时间有所延长,NMDA受体激动剂对呼吸活动则没有明显影响（P＞0.1);相应的拮抗剂6-氰基-7-硝基喹恶啉土卫四（6,7-dinitroquinoxaline-2,3-dione,DNQX)和2-氨基磷酸戊酸（D-2-amino-5-phosphonopentanoic,AP5)均可使放电频率和积分幅值明显降低吸气时间显著缩短（P＜0.01),DNQX同时可致呼吸周期和呼气时间明显缩短（P＜0.05)。结论：在哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节中,NMDA类受体主要对呼吸活动的强度产生调节作用;而非NMDA类受体不仅可以影响呼吸的强度,同时对呼吸的频率也发挥调节作用。     

KCNE2对Kv4.3通道功能的调节作用

目的研究KCNE2对人类心肌细胞瞬间外向钾电流的主要α亚基-Kv4.3功能的调节。方法通过基因转染技术将Kv4.3或Kv4.3与KCNE2cDNA转入COS-7细胞株,采用膜片钳全细胞记录方式记录通道电流。结果KCNE2对Kv4.3功能有明显调控作用:减小Kv4.3通道电流密度;Kv4.3单独表达组通道电流密度为375.13±112.87pA/pF(n=11),KCNE2与Kv4.3共表达组电流密度为152.96±33.71pA/pF(n=16);减慢Kv4.3通道激活和衰减,在 60mV电压刺激下通道激活达峰值的时间由4.82±0.32ms(n=11)延长至20.41±2.13ms(n=16),P<0.05;通道电压依赖性失活发生正向移位,半数失活电压由-53.62±1.24mV(n=8)移至-46.58±1.6mV(n=10);通道从失活中恢复的速度加快,恢复时间常数由193.43±17.98ms缩短137.71±18.29ms,(n=7,P<0.05)。结论KCNE2可能作为人类心肌细胞膜Kv4.3钾离子通道一个重要的辅助亚基-β亚基参与Ito通道功能的调节。     

新生大鼠延髓脑片吸气神经元的分类和分布

目的 探讨新生大鼠延髓脑片上吸气神经元的类别及相应的分布情况。方法 制作新生大鼠离体延髓脑片，以舌下神经根放电活动作为呼吸活动的指标，同步记录吸气神经元单位的放电活动，并对照舌下神经放电的时相关系进行分类。结果 在延髓腹外侧区，共记录到吸气神经元245个，根据它们的放电特征可分为前吸气神经元、早吸气和晚吸气神经元3种亚型；它们在面神经核尾端和侧网状核之间沿疑核呈混杂分布，各亚型之间无明显的分布优势。结论 新生大鼠延髓脑片上存在多种具有不同放电形式的吸气神经元，它们在延髓内呈混杂分布，其中前吸气神经元总是在舌下神经吸气性放电之前发放并持续到吸气活动结束，可能在基本呼吸节律发生中起重要作用。     

平滑肌大电导钙激活钾通道在重症失血性休克细胞膜超极化中的作用

目的 探讨失血性休克后大鼠肠系膜细动脉血管平滑肌细胞膜电位和大电导钙激活钾通道(BKCa)的变化。方法 (1)将Wistar大鼠分为假手术组和休克组。复制失血性休克模型，假手术组只做手术，不放血；(2)急性分离大鼠肠系膜A2、A3动脉，链霉蛋白酶法急性分离血管平滑肌细胞；(3)用膜片钳的细胞贴附式和内面向外式记录法记录假手术组和休克组细胞膜电位和通道的变化。结果 (1)失血性休克2h后血管平滑肌细胞膜电位由正常的-41mV变化为-65mV；(2)休克后BKCa开放概率增加，反转电位明显改变，而单通道电导没有变化。结论 失血性休克后血管平滑肌细胞膜超极化，BKCa活动增加可能是导致膜超极化的主要原因。     

呼气神经元在新生大鼠延髓脑片的分类和分布

目的: 探讨新生大鼠延髓脑片上呼气神经元的类别及相应的分布情况.方法: 制作新生大鼠离体延髓脑片,以舌下神经根放电活动作为呼吸活动的指标,同步记录呼气神经元单位的放电活动,并对照舌下神经放电的时相关系对神经元进行分类.结果: 在延髓腹外侧区,共记录到呼气神经元81个,根据它们的放电特征可分为双相呼气神经元(22个)、全呼气(24个)和晚呼气神经元(35个)3种亚型;它们在面神经核尾端和侧网状核之间沿疑核呈混杂分布,各亚型之间无明显的分布优势.结论: 新生大鼠延髓脑片上存在3种具有不同放电形式的呼气神经元,它们在延髓内成混杂分布,其中双相呼气神经元总是在舌下神经吸气性放电,与成年动物延髓内的前吸气神经元活动比较类似,可能在基本呼吸节律发生中起重要作用.     

N-甲基-D-天门冬氨酸和非N-甲基-D-天门冬氨酸类受体在新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电中的作用

目的 探讨Ｎ－基－Ｄ－天门冬氨酸（Ｎ-methyl-Ｄ-aspartate,ＮＭＤＡ）和非ＮＭＤＡ类受体在基本呼吸节律发生和调 节中的作用。方法 在新生ＳＤ大鼠离休延髓脑片上记录舌下神经的呼吸节律性放电活动,在改良的Krebs液中加入兴 奋性氨基酸类递质及相应的拮抗剂,观察其ＲＲＤＡ的影响。结果 使用非ＮＭＤＡ受体激动剂海人酸（Kainic acid.ＫＡ） 后,可见呼吸周期及呼气时间有所延长, ＮＭＤＡ受体激动剂对呼吸活动则没有明显影响（Ｐ＞０．１）;相应的拮抗剂６－氰基 －７－硝基喹恶啉土卫四（６,７-dinitroquinoxaline-2,3-dione,ＤＮＱＸ）和２－氨基磷酸戊酸（D-２-amino-5-phosphonopentanoic, ＡＰ5）均可使放电频率和积分幅值明显降低吸气时间显著缩短（Ｐ＜０.０１）,ＤＮＱＸ同时可致呼吸周期和呼气时间明显缩短 （Ｐ＜０．０５）。结论 在哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节中,ＮＭＤＡ类受体主要对呼吸活动的强度产生调节作用;而非 ＮＭＤＡ类受体不仅可以影响呼吸的强度,同时对呼吸的频率也发挥调节作用。     

过氧亚硝酸阴离子（ONOO^—）引起小动脉反应性下降

目的探讨过氧亚硝酸阴离子(ONOO-)在调节小动脉反应性中的可能作用以及相关机制。方法用180～220g雄性SD大鼠分成20μm、50μm、100μmONOO-滴流组 ,对照组分别使用50μmONOO -分解体以及Kreb's液滴流。用Kreb's液在灌流前将ONOO-稀释成所需的终浓度并观察ONOO-对A3 级小动脉反应性的影响 ,以能够引起A 3 级动脉血流停滞的去甲肾上脉素(NE)溶液的最低浓度(取负对数)表示血管的反应性(数值的大小与血管反应性的高低成正相关)。结果20μm组ONOO-滴流10、20min时与Kreb's液比较有显著差异(P<0.05) ,滴流40min时有非常显著差异(P<0.01)。50μm和100μmONOO-滴流10、20、40min与Kreb's液比较均有非常显著差异(P<0.01)。结论ONOO-能够明显降低小动脉对NE的反应性 ,而且这种效应具有明显的浓度和时间的依赖性     

钙激活钾通道在重症失血性休克血管反应性下降中的作用

目的探讨大电导钙激活钾通道(largeconductancecalci um_activatedpotassiumchannel,BKCa)在重症失血性休克中的变化及其特异性阻断剂charybodotoxin(CTX)对休克血管反应性的恢复作用。方法1.复制大鼠重症失血性休克模型 ,分离一侧股静脉用以测量血压和放血 ;2.酶法分离出单个肠系膜A2、A3血管平滑肌细胞 ;3.应用膜片钳的细胞贴附式记录法记录休克组及假手术组大电导钙激活钾通道电流变化 ,并用 pClamp7.0软件对所记录通道的相关数据进行分析和处理 ;4.整体动物静脉给药比较观察生理盐水和CTX对休克动物平均动脉压(MAP)的影响及对去甲肾上腺素(NE)升压作用的影响 ,并计算对比休克动物24h存活率和平均存活时间的变化。结果大鼠重症失血性休克后BKCa 异常激活 ,在高钾细胞外液中 ,单通道电导由对照组的(131±4)pS(n=52)增加为休克时的(172±6)pS(n=38,P<0.01) ;通道的开放概率(Po)在膜电位为20、40和60mV时 ,比正常组增加 ,但没有显著意义(P>0.05) ,而随着膜电位的增加 ,休克组开放概率的增加速率明显大于对照组(使Po增加e倍的电压增幅由14mV降为11mV) ,当膜电位去极化为80和100mV时 ,Po分别由对照组的(15.5±2.8) %和(19.6±3.8) %增加为休克组的(21.2±2.6) %(P<0.05)和(30.3±3.4) %(P<0.01)。休克120m     

钙激活钾通道参与重症失血性休克大鼠肠系膜细动脉平滑肌细胞膜的超极化

目的血压降低、血管反应性低下是导致创伤、脓毒性等休克病人死亡的重要原因之一.我室曾提出了致血管反应性降低的细胞膜超极化理论,并报道了ATP敏感钾通道在血管反应性低下中的作用认为随着休克的发展,组织细胞缺血、缺氧加重,ATP耗竭,细胞内乳酸堆积,从而激活了ATP敏感钾通道,使细胞膜超极化,血管舒张.除ATP敏感钾通道外,在微动脉平滑肌细胞中还有两种钾通道,即内向整流钾通道(Kir)和钙激活钾通道(KCa). 其中钙激活钾通道(KCa)在血管平滑肌细胞上尤其丰富,而且在血管平滑肌细胞的肌源性调节中起着重要的作用.本文目的在于进一步阐明钙激活钾通道在休克大鼠肠系膜细动脉平滑肌细胞膜超极化中的作用,从而为临床治疗提供理论基础.