人参RAPD指纹鉴定的毛细管PCR方法

本实验建立并优化了用毛细管PCR扩增人参RAPD指纹的反应体系，讨论了用毛细管PCR方法扩增RAPD指纹在中药材鉴别上的应用前景。     

野山参与栽培参rDNA内转录间隔区(ITS)序列比较 x

目的 :比较野山参和栽培参的遗传差异性。方法 :用银染DNA测序法测定了 4个山参的ITS1和 2个山参的ITS2 。结果和结论 :人参属的ITS1有 220～ 221个碱基 ,ITS₂ 有222～224个碱基 ,其中ITS₁ 在人参种内非常稳定 ,吉林省抚松县 (87号、110号 )、吉林省集安市 (79号 )、河北省青龙县 (80号)的 4个野山参样品在ITS₁ 转录间隔区的序列与GeneBank中栽培参无任何碱基发生变异。但ITS₂ 有部分变异 ,抚松野山参 (87,110号 )与黑龙江栽培参 (GenebankU41680号 )和朝鲜栽培参 (GenebankU41682号 )比较完全一致 ,但有 3个碱基与湖北栽培参(GenebankU41681号 )不同。这说明黑龙江和朝鲜栽培参的种源与抚松的野山参较近 ,而湖北栽培参 (U41681)可能从引自其它野山参居群。ITS₂ 的遗传信息有助于人参种质资源分析 ,能为栽培参起源提供一定证据。     

人参RAPD指纹鉴定的毛细管PCR方法

本实验建立并优化了用毛细管PCR扩增人参RAPD指纹的反应体系，讨论了用毛细管PCR方法扩增RAPD指纹在中药材鉴别上的应用前景。     

国产人参种质资源研究进展

 目的：总结和评论人参种质资源研究的成就和问题,进一步推动种质资源研究。方法：采用手检和机检相结合的方法,查阅近20年国内外文献。结果与结论：时山参的生态环境研究有不少进展,但种质资源研究鲜见报道,资源破坏异常严重。栽培参中已发现十几个变异类型,主要农家类型大马牙,二马牙,长脖,圆膀圆芦和黄果中,大马牙产量最高,黄果总皂苷含量最高。较详尽的遗传学比较为品种选育提供了依据,近年DNA指纹等分析结果为人参生产和育种提供丰富的资料。     

野山参微量DNA提取方法的研究

目的：为了从珍贵药材野山参的少量根须提取ＤＮＡ,同时尽量保持野山参形态的完整,特研究本方法。方法：我们改进了ＣＴＡＢ提取法,设计了一种简捷的ＤＮＡ制备方案。结果：从０．００１ｇ人参根须提取ＤＮＡ,得率达２２５０μｇ／ｇ。结论：ＲＡＰＤ扩增效果良好,可作其他药材微量组织提取ＤＮＡ的参考方法。     

野生人参RAPD指纹的研究

目的：分析山参遗传多样性及其遗传特性。方法：用随机扩增多态DNA(RAPD)标记方法对7个来源地不同的山参和1个园参样品进行遗传多样性检测和遗传分析。结果和结论：用14个10-mer寡聚核苷酸引物共检测111个位点,其中多态位点76个,占67.6%,远大于园参内的遗传变异,因此山参在人参育种上有很大利用价值。聚类分析表明,山参之间及其与园参之间的遗传变异,没有超出与近缘种西洋参之间的遗传差异;遗传因素在人参形态变异上的作用小于环境因素,这一结果为“山参”的培育提供了理论依据。     

人参RAPD产物的限制性内切酶消化

为了鉴定随机扩增产物的同源性以及更有效地利用DNA分子标记研究人参种质资源，我们首次将毛细管PCR扩增的RAPD反应产物进行限制性内切酶消化并有效的进行了酶切位点分析，结果证明PCR-RFLP是筛选人参特异DNA分子标记的一种简单易行的新方法，可为药用植物种质资源研究提供另一有用的工具。     

人参农家类型的AFLP指纹研究

目的：为了获得更多人参DNA指纹信息,寻找鉴定5个农家类型DNA特征指纹的线索,更有效的比较农家类型之间的遗传差异。方法：采用扩增酶切片段多态性(AFLP)方法研究5种农家类型。结果和结论：5种人参农家类型多态位点仅4.6%,说明各农家类型之间的遗传差异性很小,但长脖的AFLP有相对较高的多态性,说明长脖类型内部有更多的杂合态个体,更接近野生人参。     

人参RAPD产物的限制性内切酶消化

为了鉴定随机扩增产物的同源性以及更有效地利用DNA分子标记研究人参种质资源，我们首次将毛细管PCR扩增的RAPD反应产物进行限制性内切酶消化并有效的进行了酶切位点分析，结果证明PCR-RFLP是筛选人参特异DNA分子标记的一种简单易行的新方法，可为药用植物种质资源研究提供另一有用的工具。