基于线粒体能量代谢途径探讨资癸益冲方改善早发性卵巢功能不全小鼠卵巢功能的作用机制

目的：探讨资癸益冲方通过线粒体能量代谢途径改善早发性卵巢功能不全(POI)模型小鼠卵巢功能的作用与机制。方法：80只SPF级雌性C57BL/6N小鼠随机分为正常组、模型组、西药(辅酶Q10)组和中药(资癸益冲方)组,每组20只。除正常组外,腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立POI模型小鼠,造模成功后,各组灌胃给予相应药物。HE染色观察卵巢组织形态学,放射免疫法检测血清雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,透射电镜观察卵巢颗粒细胞线粒体结构,比色法测定颗粒细胞三磷酸腺苷(ATP)含量,免疫组化法和Western Blot法检测与线粒体能量相关的过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子1(NRF1)和线粒体转录因子A(TFAM)蛋白表达水平。结果：与正常组比较,模型组小鼠卵巢各级卵泡颗粒细胞层数减少,闭锁卵泡增多,E₂水平下降(P<0.05),FSH、LH水平升高(P<0.01),颗粒细胞线粒体数量减少,出现嵴断裂及空泡化改变,外膜不完整,ATP含量下降(P<0.05),PGC-...     

雄激素致无排卵大鼠卵巢nNOS、eNOS、ET-1的表达

目的 观察雄激素致无排卵大鼠(ASR)血浆及卵巢血管舒张因子一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(nNOS、eNOS)、环磷酸鸟苷(cGMP)、血管收缩因子内皮素1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)的变化,探讨卵巢血管舒-缩因子在无排卵发病机制中的作用.方法 建立雄激素致无排卵大鼠模型,分为模型组和正常组.采用放射免疫法测定模型组、正常组大鼠血浆NO、cGMP、ET-1、ATⅡ以及血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)含量;采用免疫组化法检测大鼠卵巢nNOS、eNOS、ET-1表达;采用HE染色观察大鼠卵巢组织形态学变化.结果 与正常组比较,模型组大鼠血浆NO、cGMP含量降低(P<0.01),血浆ET-1、ATⅡ含量升高(P<0.01).血清E2、T含量及E2/P显著升高(P<0.01),血清P含量无统计学差异(P>0.05);与正常组比较,模型组大鼠卵巢颗粒细胞以及髓质nNOS、eNOS表达减弱(P<0.01),ET-1表达增强(P<0.01);正常组大鼠卵巢皮质可见发育期各级卵泡及黄体;模型组大鼠卵巢皮质卵泡囊状扩张,颗粒细胞层极薄.结论 雄激素致无排卵大鼠血浆及卵巢血管舒张因子降低、收缩因子增高,可能使卵巢血液供应障碍、颗粒细胞凋亡,导致卵泡在排卵前闭锁,无排卵的发生.     

乳腺增生大鼠模型血清和乳腺VEGF、bFGF的变化

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生成因子(bFGF)在大鼠乳腺增生中的作用。方法:通过制作乳腺增生的大鼠模型,采用酶联免疫法测定血清VEGF和bFGF含量及其在乳腺组织中的表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清中VEGF和bFGF含量明显升高,在乳腺组织中表达增强。结论:模型组大鼠体内存在的某些血管因子被激活后,直接或间接促进了局部乳腺组织血管的增生。     

中西医结合妇产科学案例教学调查分析

中西医结合妇产科学是一门新兴的实践性很强的临床学科.我国于20世纪80年代末开始创办全日制中西医结合三年制专科教育,90年代初开始五年制本科教育.     

中医妇科学教学体会

1 抓住重点突出特点.中医妇科学属中医临床课,如何在有限的时间内,把这一门课讲得更好,我们教研室进行了多次、广泛、深入的讨论.认为：在整个教学过程中,要实行“抓住重点、突出特点、归纳概括、避免重复”的十六字方针.在抓重点的同时,突出特点,了解一般.比如在女性生殖脏器章节,重点讲述胞宫,一般了解其它生殖脏器.在特殊生理章节中,重点讲述女性经带胎产的生理现象及产生机理,对生理基础从简.在病因病机中,突出妇科病机特点（冲任损伤）.     

补肾调经方、逍遥丸对促性腺激素预处理小鼠组织蛋白酶-L mRNA的影响

目的 探讨补肾调经方、逍遥丸对小鼠组织蛋白酶-L（cathepsin-L,Cat L） mRNA的影响。     

雄激素致不孕大鼠子宫一氧化氮含量的变化

目的：研究雄激素致不孕大鼠（ASR）子宫一氧化氮（NO）含量的变化.方法：给出生9日龄SD雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立ASR模型.130日龄处死,观察血清睾酮（T）、子宫NO含量及组织形态学的变化.结果：ASR模型血清T水平明显高于正常对照组（P＜0.01）;子宫NO含量明显低于正常对照组（P＜0.05）.与正常对照组比较,子宫肌层变薄、内膜萎缩、腺体减少.结论：ASR模型血清T水平增高,子宫NO含量明显降低,子宫内膜的分泌功能受损伤.ASR模型子宫的变化是引起不孕的原因之一.     

补肾调经方和逍遥丸对体外培养小鼠卵泡中ADAM8 及 ADAMTS-1 影响的比较

目的?探讨补肾调经方和逍遥丸对体外培养小鼠卵泡中去整合素-金属蛋白酶8（ADAM8）和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）表达的影响。方法?机械法分离昆明乳鼠窦前卵泡，随机分为空白组、正常组、补肾组、疏肝组，空白组不加血清，正常组加入正常大鼠血清，体外培养12天；补肾组加入补肾调经Ⅱ号方高剂量大鼠含药血清，疏肝组加入逍遥丸高剂量大鼠含药血清体外培养11天。11天时补肾组和疏肝组分别改为补肾调经Ⅲ号方高剂量和逍遥丸低剂量大鼠含药血清体外培养1天。培养12天加入人绒毛膜促性腺激素（hCG）后0、8、12、16 h采用RT-PCR法检测各组卵泡和卵丘卵母细胞复合体（COCs）中ADAM8、ADAMTS-1 mRNA表达，细胞免疫荧光染色法比较各组ADAM8、ADAMTS-1蛋白表达。结果?加入hCG后0、8、12、16 h，各组ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白的表达逐渐升高，各时间点空白组与正常组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。与本组0、8 h比较，补肾组12、16 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05）。与本组0 h比较，疏肝组8 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05）。与空白组和正常组比较，补肾组与疏肝组8、12、16 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高，8 h疏肝组高于补肾组，12 h补肾组高于疏肝组（均P<0.05）。补肾组ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白的表达高峰高于疏肝组（P<0.05）。结论?补肾调经方和逍遥丸均可通过增强ADAM8和ADAMTS-1的蛋白溶解作用，使卵泡壁破裂而诱发排卵，补肾法诱发排卵的作用优于疏肝法。     

雄激素致不孕大鼠子宫转化生长因子β1及其受体的变化

目的：研究雄激素致不孕大鼠（ASR）子宫转化生长因子β1（TGF-β1）及其受体（TGF-βRⅠ）表达量的变化。方法：出生9日龄SD雌性大鼠随机分为ASR模型组(n=12)及对照组(n=10)。模型组大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮(T)1.25 mg,建立ASR模型。正常组注射等量中性茶油。采用放射免疫分析法测定血清T水平,采用免疫组织化学方法检测子宫TGF-β1和 TGF-βRⅠ的表达量,采用HE染色观察子宫组织形态学变化。结果：与正常组比较,ASR模型组大鼠血清T水平明显增高（P<0.01);子宫内膜、肌层TGF-β1表达量明显降低（P<0.01）;肌层TGF-βRⅠ表达量明显降低（P<0.05）,而内膜TGF-βRⅠ表达量却明显升高（P<0.05）;与正常组比较,ASR模型组大鼠子宫肌层变薄,内膜萎缩,腺体减少。结论：ASR模型子宫内膜及肌层TGF-β1和TGF-βRⅠ表达量异常,损伤子宫内膜的分化和肌层的发育,影响胚胎的植入。这些变化可能是导致不孕的原因之一。     

补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠模型卵巢血管舒-缩因子的影响

目的:观察补肾调经方(熟地、枸杞、覆盆子、淫羊藿、紫河车、当归、白芍、香附、红花、川芎、桃仁)对雄激素致无排卵大鼠模型血浆及卵巢血管舒张因子一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)、神经型一氧化氮合酶(nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管收缩因子内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)的影响,探讨其治疗无排卵性疾病的作用及机理。方法:建立雄激素致无排卵大鼠模型。40只大鼠分为正常组、模型组和中药治疗组。采用放射免疫法测定大鼠血浆NO、cGMP、ET-1、ATⅡ以及血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)含量;采用免疫组化法检测大鼠卵巢nNOS、eNOS、ET-1表达;采用HE染色观察大鼠卵巢组织形态学变化。结果:与模型组比较,中药治疗组大鼠血浆NO、cGMP含量升高(P0.01),血浆ET-1、ATⅡ含量降低(P0.01),血清E2、T、E2/P降低(P0.01);卵巢颗粒细胞、髓质nNOS、eNOS表达增加(P0.01),ET-1表达降低(P0.01);卵巢结构有一定改善,卵泡发育并有黄体形成。结论:补肾调经方具有一定的调节无排卵大鼠模型血浆及卵巢血管舒-缩因子、改善无排卵大鼠模型卵巢血液供应、抑制颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁的作用,揭示其可能促进卵泡发育、成熟、排卵的作用机制。