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目的:观察不同氧浓度环境对结肠癌细胞增殖、自噬的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路探讨养阴化瘀解毒方在低氧环境下对结肠癌细胞自噬及凋亡的影响。方法:HCT-116细胞分为常氧组、1%低氧组、5%低氧组,通过细胞增殖与毒性检测(MTS)法检测细胞存活率,单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察不同氧浓度下细胞自噬荧光表达情况;在5%低氧微环境下用养阴化瘀解毒方干预HCT-116细胞,分为正常组、空白血清组、养阴化瘀解毒方组(养阴化瘀解毒方含药血清5%、15%、25%);通过MTS法计算各组细胞的抑制率;单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测各组自噬细胞率的变化;利用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同组自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ/Ⅰ)、酵母Atg6同源物(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)和凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP-3)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、活化的胱天蛋...  相似文献   
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