针刺加隔姜灸治疗难治性面神经麻痹临床研究

目的观察针刺加隔姜灸治疗难治性面瘫的疗效。方法选取周围性面瘫超过3个月的患者,经头颅CT检查,排除脑出血及中枢神经系统损害,确诊为难治性患者20例。采用辨证施治加隔姜灸的方法进行治疗。结果 20例患者治愈10例,显效7例,好转3例,总有效率100%。结论临床运用择期针刺加隔姜灸的方法治疗难治性面神经麻痹疗效显著,安全实用,值得临床推广使用。     

无花果果实及乳浆对人黑色素瘤A375 细胞的抑制作用及其作用机制研究

目的考察无花果实及乳浆不同极性部位的体外抗黑色素瘤活性,并探讨其作用机制。方法采用溶剂 提取法制得无花果提取物,系统溶剂萃取法得乳浆不同极性部位和醇沉纯化部位供试品;采用MTT 法、划痕 实验、Transwell 侵袭实验和流式细胞仪凋亡检测考察供试品对人恶性黑色素瘤细胞A375 的增殖、迁移、侵袭 和凋亡影响;构建A375 细胞和人脐静脉内皮细胞HUVEC 的共培养体系,通过侵袭实验、成管实验体外模拟 肿瘤细胞对内皮血管形成;ELISA 法测定相关细胞因子水平。结果无花果提取物和乳浆乙酸乙酯部位抑制肿 瘤细胞A375 的迁移和侵袭（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）,降低A375 细胞的超氧化物歧化酶（SOD）及乳酸脱 氢酶（LDH）含量（P＜0.001）,提高一氧化氮（NO）含量（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）;乳浆醇沉部位抑制 A375 细胞迁移和侵袭（P＜0.01,P＜0.001）,对A375 细胞的直接抑杀和促凋亡效果较好;共培养后HUVEC 细胞侵袭能力提升,血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮素1（ET-1）、内皮型一氧化氮合酶（eNOs）分泌增多 （P＜0.001）,且供试品（200～400 μg·mL-1）给药后可明显逆转（P＜0.05,P＜0.001）。结论无花果提取物及乳 浆乙酸乙酯、醇沉部位具有抑制A375 细胞增殖、迁移和侵袭作用,从能量代谢方面抑制黑色素瘤生长,并可 能通过eNOs/VEGF/ET-1 途径抑制肿瘤的新生血管形成。     

基于网络药理学和实验验证探索荆防合剂治疗甲型H1N1流感的作用机制

目的 预测荆防合剂治疗甲型H1N1流感的潜在靶点及作用机制，以期为荆防合剂临床应用提供参考依据。方法 通过中药系统药理学分析平台数据库（TCMSP）、SwissTargetPrediction、TargetNet数据库筛选荆防合剂抗甲型H1N1流感的活性成分及作用靶点，通过GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、DisGeNet数据库获取甲型H1N1流感靶点并统一使用UniProt KB数据库进行标准化，借助Venny 2.1.0在线平台获取两者交集靶点；采用Cytoscape 3.2.1软件建立“药物-成分-靶点”网络图并进行拓扑学属性分析；将交集靶点上传至STRING 11.5数据库获得蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）关系网络，并在Metascape平台中进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析。最后通过Autodock vina软件将度值靠前的活性成分和关键核心靶点进行对接验证，并用PyMOL软件进行可视化分析。采用BALB/C雌鼠进行实验验证，苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病变情况，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-17（IL-17）因子水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组动物肺组织mRNA和蛋白表达水平。结果 荆防合剂中共有活性成分144个，获得靶点基因421个，甲型H1N1流感靶点2 956个，两者交集靶点199个，拓扑学分析显示，荆防合剂治疗甲型流感的核心成分为槲皮素、木犀草素和山柰酚，核心靶点为人前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）、雌激素受体1（ESR1）、诱导型一氧化氮合酶2（iNOS2）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARG）、环氧合酶-1（PTGS1）等。GO富集分析中生物学过程（BP）得到697个条目（P<0.01），分子功能（MF）得到59个条目（P<0.01），细胞组成（CC）得到21个条目（P<0.01）。KEGG富集分析中共得到132条信号通路（P<0.01）如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路等，大多与调节免疫性炎症有关。分子对接结果显示，荆防合剂的活性成分与核心靶点的结合能均<-5.0 kcal·mol^-1，证明其具有较好的结合活性。HE染色显示给药组动物肺组织明显改善，Real-time PCR和Western blot显示荆防合剂可降低肺组织中PI3K和Akt的表达水平。结论 荆防合剂可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗甲型流感病毒的作用，其中的活性成分槲皮素、木犀草素和山柰酚可能通过作用于PTGS2、ESR1、iNOS2、PPARG、PTGS1等靶点，进而对PI3K/Akt、MAPK等信号通路产生炎性控制及免疫调节作用。     

参苓白术散加减治疗儿童反复呼吸道感染疗效观察

目的：探讨参苓白术散加减对反复呼吸道感染患儿的疗效。方法选取1年内8次以上反复发作上呼吸道感染、支气管炎、肺炎的患儿20例,在缓解期以参苓白术散为主方,化裁加减进行治疗。结果治愈11例,显效7例,好转2例,总有效率100%。结论临床运用参苓白术散加减治疗儿童反复呼吸道感染可明显缩短病程,疗效显著。     

芒柄花素诱导肺癌细胞焦亡并抑制PD-L1介导的免疫逃逸

目的 探究芒柄花素抑制非小细胞肺癌(NSCLC) A549细胞的作用机制。方法 MTT法、细胞划痕和克隆形成实验考察芒柄花素(20~100 μmol·L^-1)对A549细胞增殖、迁移和克隆形成的抑制作用;A549细胞预孵育芒柄花素24 h后,使用Hoechst 33342细胞核染色定位,加入经过Dil标记的Jurkat细胞(人T淋巴细胞白血病细胞)共培养30 min,使用激光共聚焦拍摄2种细胞的共定位图像;建立A549-Jurkat细胞共培养模型,MTT和结晶紫染色法检测芒柄花素对A549细胞活性的影响;试剂盒法检测A549细胞线粒体膜电位(JC-1染色)和谷胱甘肽(GSH)水平探究芒柄花素对线粒体应激的诱导作用;Western blotting法考察芒柄花素对A549细胞线粒体应激后非经典焦亡相关蛋白和PD-L1蛋白表达的影响。结果 与对照组比较,芒柄花素显著抑制A549细胞的增殖、迁移和克隆形成能力(P<0.01、0.001),增强细胞共培养模型中T细胞的募集和杀伤作用(P<0.01、0.001);芒柄花素可诱导A549细胞线粒体应激,诱导线粒体膜电位下降,显著降低细胞GSH水平(P<0.05、0.01),显著上调bcl-2相关x蛋白(BAX)、裂解的半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、穿孔素蛋白E (Gasdermin E)-N蛋白表达诱导细胞焦亡(P<0.01、0.001),同时显著下调p-磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B (Akt)、核因子κB (NF-κB)、细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)蛋白表达抑制免疫逃逸(P<0.05、0.001)。结论 芒柄花素具有诱导NSCLC细胞焦亡并阻断免疫逃逸的作用,其机制为一方面可通过诱导A549细胞线粒体应激,促进细胞焦亡招募T细胞,增强肿瘤免疫;另一方面抑制p-PI3K/Akt/NF-κB信号轴,进而降低PD-L1蛋白表达,抑制A549细胞免疫逃逸。     

岩黄连的化学成分及生物活性研究进展

岩黄连Corydalis saxicola是我国西南地区的民间传统药物,临床上用于乙型肝炎、肝硬化、肝癌等肝病的治疗,极具开发价值。研究表明岩黄连中含丰富的生物碱、甾体、三萜、黄酮与核苷等类化合物,生物碱类为主要成分,多数化合物具有显著的生物活性,如抗病毒、抗炎、抗肿瘤、保肝、抑菌、抑制乙酰胆碱酯酶、镇痛等活性,特别是对乙肝、肝癌以及肝硬化等疾病的缓解作用比较显著。对岩黄连化学成分及生物活性的研究进展进行综述,以期为岩黄连的后续研究和深入开发提供参考。