丁胺卡那霉素地塞米松复方脂质体在兔眼玻璃体内的药代动力学研究

目的 应用丁胺卡那霉素地塞米松(丁卡地塞)复方脂质体玻璃体内注射以延长两种药物的半衰期.方法 大白兔随机分4组,正常眼2组和眼内炎眼2组均分别注射复方脂质体和游离药物.结果 丁卡在正常眼复方脂质体的半衰期较游离药物延长1.8倍,在眼内炎眼延长3.4倍.地塞在正常眼复方脂质体半衰期较游离药物延长22.5倍,在眼内炎眼延长46.2倍.结论 丁卡地塞复方脂质体玻璃体内注射使丁卡和地塞两种药物的半衰期有明显延长.     

增生性视网膜前膜中单核细胞趋化蛋白-1的表达

近年研究表明,某些生长因子具有促进增生性玻璃体视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｖｉｔｒｅｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＶＲ）和增生性糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＤＲ）形成的作用。单核细胞趋...     

shRNA抑制人RPE细胞HIF-1 α基因表达对VEGF及PEDF表达的影响

目的利用小发卡环RNA（shRNA）使缺氧培养条件下的人视网膜色素上皮（RPE）细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）基因沉默，观察对血管内皮生长因子（VEGF）及色素上皮衍生因子（PEDF）的影响。方法体外转录法合成对HIF-1αmRNA序列的两个靶点的shRNA，对缺氧（150μmol／LCoCl2模拟）培养条件下人RPE细胞的HIF-1α进行干扰，使用RT—PCR检测HIF-1α、VEGF和PEDFmRNA的表达及Western印迹分析检测HIF-1α、VEGF和PEDF蛋白水平。结果HIF-1αmRNA的两种shRNA均能有效地抑制RPE细胞在缺氧条件下HIF-1α的表达，同时也有效地抑制VEGFmRNA和蛋白表达，并促进PEDF蛋白表达，但对PEDFmRNA的表达无影响。结论HIF-1αmRNA的shRNA能有效地使缺氧条件下RPE细胞HIF-1α基因沉默，进而有效地抑制缺氧对VEGF的上调作用，同时也促进PEDF表达。揭示了HIF-1与缺氧条件下PEDF翻译后的下调机制有关，是促进视网膜新生血管形成最为关键的细胞因子之一。     

全视野镜下玻璃体手术治疗巨大裂孔性视网膜脱离

目的探讨全视野镜下玻璃体手术治疗巨大裂孔性视网膜脱离的手术方法及效果。方法对2002-08～2004-12行玻璃体手术的34例巨大裂孔性视网膜脱离患者34只眼作回顾性分析。其中90°-180°裂孔12例,180°以上裂孔者22例。手术方法包括经平坦部玻璃体切除,剥除增生膜,松解牵引,全氟化碳液体展平视网膜,眼内激光光凝,全氟化碳液体-硅油置换。所有手术操作均在130°全视野镜下进行。结果34例巨大裂孔性视网膜脱离在术中均完全解剖复位,2例术后1-2个月复发增生性玻璃体视网膜病变,所有病例术后36个月取出硅油,32例视网膜完全复位,2例在取油时行增生膜剥除,1例再次填充硅油,1例填充惰性气体C3F8。随访6-12个月,复位的32例中有1例复发视网膜脱离,再次手术后填充硅油。结论全视野镜能简化手术操作,减少并发症的产生,有效提高巨大裂孔性视网膜脱离的手术复位率。     

缺氧条件下视网膜微血管内皮细胞中缺氧诱导因子1和血管内皮生长因子m RNA表达的研究

目的 探讨视网膜微血管细胞在缺氧过程中缺氧诱导因子1(HIF1）和血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA水平表达的变化。方法视网膜微血管细胞(RECs)分别在正常氧、缺氧3h不同条件下培养后，应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量测定HIF1a和VEGF基因的mRNA水平的表达。结果缺氧组RECs HIF1基因的mRNA水平表达为对照组的4．6倍。同时缺氧组RECs细胞的VEGF基因的mRNA水平表达为对照组的3倍。结论缺氧能引起视网膜微血管细胞的HIF-1及VEGF基因mRNA水平高表达，提示缺氧可能通过HIF1基因的转录途径来诱发VEGF基因的高表达导致视网膜新生血管形成。     

Up-regulation of HIF-1α and VEGF Expression by Elevated Glucose Concentration and Hypoxia in Cultured Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Summary： In order to explore the effect of high glucose concentration and high glucose concentration with hypoxia on the production of hypoxia-inducible factor-1α （HIF-1α） and vascular endothelial growth factor （VEGF）, human RPE cells were cultured in 5,56 mmol/L glucose （control group）, 5.56 mmol/L glucose with 150 !a mol/L COCl2 （hypoxic group）, 25 mmol/L glucose （high glucose group） and 25 mmol/L glucose with 150 μmol/L COCl2 （combination group）. RT-PCR was used to detect the expression of HIF-1α and VEGF mRNAs. Western blot analysis was used to measure the levels of HIF-1α and VEGF proteins. Although the small amount of HIF-1α protein was able to be detected in high glucose group but not in control group, there was no significant difference between the expression of HIF-1α mRNA of RPE cells in high glucose group and that of RPE cells in control group. As compared with RPE cells in control group, the mRNA expression and the protein synthesis of VEGF in high glucose group were up-regulated. As compared with RPE cells in hypoxic group, the expression of HIF-1α mRNA of RPE cells in combination group was not different, but the protein synthesis of HIF-1α, the mRNA expression and the protein synthesis of VEGF were more obviously up-regulated. In conclusion, high concentration glucose mainly influence the protein synthesis of HIF-1α of RPE cell, and HIF-1α protein is able to be accumulated in high concentration glucose. Under hypoxia, the HIF-1α protein induced by high concentration glucose is more stable, and the expression of VEGF is obviously increased. It is suggested that high concentration glucose may play a role in retinal neovascularization, especially at ischemia stage of diabetic retinopathy.     

眼用脂质体

脂质体是由一系列呈同心圆排列的脂质双层膜组成的囊泡,可包裹水溶性或脂溶性药物。脂质体具有缓慢释放药物、增强疗效、减低毒性、靶向释放药物和增加药物的角膜通透性等突出优点。本文从脂质体的结构、制备、特点、在眼内的代谢和质量监测(包括包裹率、大小、形态、体外释放度、稳定性)等方面复习了有关文献,认为脂质体是一种具有重大研究开发价值的新型眼用药物载体。     

急性玻璃体积血的保守疗法

本法的要点是采用双眼包扎和头部抬高。是否适用这种疗法完全取决于裂隙灯检查的结果。如果积血位于玻璃体境界膜之后,那么积血有希望通过这种措施在几小时内下沉,使眼底可以见到。反之,如果血细胞已进入玻璃体中,而且严重至看不清玻璃体后境界膜,这种疗法就不易收效。如果血细胞虽已进入玻璃体,但玻璃体后境介膜还能辨别,此法仍值得试用。     

手术显微镜下摘出角膜深层细小异物

角膜异物是一种最常见的眼外伤,较易处理,有时也甚感困难。裂隙灯可明显提高异物挑出成功率,很多医院已列为常规方法,但遇情况特殊时,裂隙灯也无能为力,而在手术显微镜下摘出更为安全可靠,国内有关报道尚少,现介绍如下。     

增生细胞核抗原在视网膜色素上皮细胞表达及其反义寡核苷酸的抑制作用

目的 研究视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞中增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达及其反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,AS ODN)对其表达和细胞增生的抑制作用，为增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)治疗探索基因治疗新途径。 方法 (1)体外培养兔眼RPE细胞，在不同时间采用链霉亲合素-生物素化过氧化物酶复合物(streptoavidin-biotin enzyme complex,SABC)免疫组织化学法检测PCNA的表达;(2)脂质体介导下不同浓度的PCNA AS-ODN和正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,S-ODN)分别作用于体外培养的RPE细胞，采用免疫组织化学方法检测PCNA的表达;(3)四唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测在不同浓度的PCNA AS-ODN和S-ODN作用下RPE细胞生长活性及其生长抑制率。 结果 (1)体外培养兔眼RPE细胞表达PCNA，表达高峰为培养后48 h ;(2)在0.28、1.12 μmol/L AS-ODN 作用下，PCNA的表达明显受抑制;(3)0.28、1.12 μmol/L的PCNA AS-ODN 能明显抑制RPE细胞增生活性，并呈剂量依赖性，其生长抑制率分别达53%、81%。 结论 一定浓度PCNA AS-ODN能序列特异性地抑制RPE细胞PCNA表达和增生活性，有望进一步用于PVR的治疗实验研究。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 231-233)