狭叶半夏和普通半夏总生物碱含量比较

目的　比较狭叶半夏和普通半夏总生物碱含量。方法　重量法和酸性染料比色法。结果　重量法和酸性染料比色法均测得狭叶半夏总生物碱含量高于普通半夏。结论　总生物碱含量上的差异反应了二者品质上的优劣 ,这从一个方面说明狭叶半夏品质优于普通半夏     

半夏基因组DNA的提取及鉴定

目的探讨不同DNA提取方法对半夏DNA质量及RAPD-PCR标记结果的影响。方法对用不同方法提取的DNA进行电泳、紫外吸收A260/A280和RAPD-PCR分析。结果不同方法提取的DNA质量和产率差异不显著,对RAPD结果无影响。结论半夏在DNA提取前加入氯仿对材料预处理,可获得较高质量的DNA进行PCR扩增。     

半夏种内各变异类型主要形态学性状比较研究

目的为半夏各变异类型提供形态学的鉴别和分类依据。方法系统观察并测量各变异类型主要形态学性状,采用多角形图比较其相似性和差异性程度。结果生殖器官中,各变异类型间各性状的差异性较小,但有一个变异趋势,即阔叶类型的雌雄花序长和宽,雌雄间隔,管部长和宽与其它类型相比,数值略小。营养器官中,以叶片长宽比值即叶形的变化最为明显,其它性状在各变异类型间相似。结论叶片长宽比值在各变异类型间差异显著,可作为各变异类型鉴别和分类的依据。     

半夏与其伪品掌叶半夏的RAPD鉴别

目的建立半夏及其伪品掌叶半夏的快速简单的分子鉴定方法。方法 SDS法提取半夏和掌叶半夏的基因组DNA,20个10碱基随机引物(S1-S20,上海生工)用于RAPD-PCR分析。结果 20个引物中有7个有效稳定的引物在半夏和掌叶半夏之间能显示出多态性指纹图谱,其中S10和S17在半夏和掌叶半夏之间显示较大差异。结论利用引物S10和S17进行RAPD-PCR能有效鉴别半夏和掌叶半夏。     

半夏块茎不同粒径总生物碱含量的研究

目的测定半夏块茎不同粒径总生物碱的含量,为半夏质量标准控制提供理论依据。方法采用氯仿提取,依据酸性染料比色法的原理,在417 nm波长下测定,并作方差分析。结果获得良好的线性关系（r=0.998 9）和回收率（100.1%）,RSD为2.3%。不同粒径总生物碱含量的差异显著（F=79.23,P〈0.01）。结论测定方法简单快速;不同粒径总生物碱含量和产量以直径为2 cm的块茎最高,在半夏收购过程中应将块茎粒径控制在2.0 cm左右为宜。     

半夏凝集素基因的克隆、生物信息学分析及其蛋白的亚细胞定位

目的 克隆半夏凝集素基因,并对其进行生物信息学分析和亚细胞定位。方法 以半夏Pinellia ternata新鲜叶片的DNA为模板,根据Genbank上的半夏凝集素的基因序列（GU593718.1）设计引物,克隆了半夏凝集素（PTA）基因,并构建植物表达载体pI1300-CaMV35S-PTA-GFP,在农杆菌GV3101中进行表达且观察了其在烟草中瞬时表达。结果 所克隆的PTA的开放阅读框为810 bp,其编码269个氨基酸;具有1条信号肽、2个B-lectin保守区域和3个甘露糖结合基序;PTA氨基酸序列与NCBI中所报道的半夏、掌叶半夏P. pedatisecta、滴水珠P. cordata凝集素的氨基酸序列的同源性分别达到97%、85%和83%;初步推测其定位于膜上,现已在NCBI中登记（登录号KF154979）。结论 本实验通过对半夏凝集素的生物信息学分析和亚细胞定位分析,为进一步研究半夏凝集素的抗病虫害机制奠定了基础。     

射干内生真菌SRAP-PCR反应条件的优化

以从射干中分离纯化出的96株内生真菌DNA为研究对象,采用单因素试验设计,对影响SRAP-PCR反应的DNA模板、Mg2+、d NTPs、Taq DNA聚合酶和引物对浓度进行了优化,以确定适合射干内生真菌的SRAP-PCR反应最佳反应体系。结果表明,建立的射干内生真菌最佳反应体系为20μL,反应体系中含10×PCR buffer(不含Mg2+)2.0μL,DNA模板50 ng,Mg2+浓度为2.5mmol·L-1,d NTPs为0.5 mmol·L-1,引物1.0μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5U。利用该反应体系从90对引物中筛选出可扩增清晰、稳定性好条带的引物38对。该体系为今后利用SRAP分子标记技术开展射干内生真菌的分子遗传学研究奠定基础。     

半夏组织培养物中生物碱含量的研究

目的 探讨不同激素种类和配比的培养基对半夏培养物生物碱合成的影响,为提高半夏有效成分在植物体内的富集提供理论依据.方法 采用氯仿提取,依据酸性染料比色法的原理,在417 nm波长下测定,并作方差分析.结果 获得良好的线性关系(r=0.998 9)和回收率(100.1%),RSD为2.3%.MS + 2.0 mg/ml NAA + 0.5mg/ml KT培养基最适合半夏培养物生物碱的积累,平均高达0.980 2%,不含 2,4-D的培养基所诱导的愈伤组织和分化出的不定芽、不定根、再生块茎所产生的生物碱明显高于含有2,4-D的培养基所诱导的愈伤组织和分化出的不定芽、不定根、再生块茎所产生的生物碱.结论 激素种类和配比对半夏组织培养物中生物碱含量的影响较大.     

半夏快速繁殖体系的研究进展

目的 :从组织培养的角度出发 ,对传统的快速繁殖体系作一些改进。方法 :查阅国内外的相关文献。结果 :总结了半夏组织培养的条件和研究成果。讨论 :组织培养中需进一步研究愈伤组织和小块茎的结构。另外 ,可从以下几个方面进行改进 :选择最佳激素配比、分化能力最强的外植体、一次性成苗方式和合理的移栽时间。     

射干内生真菌Fusarium proliferatum的ISSR和SRAP位点遗传多样性分析

目的为了解射干内生真菌Fusarium proliferatum的遗传多样性。方法选用了52条ISSR引物和90条SRAP引物对17株射干内生真菌F. proliferatum进行了遗传多样性分析。筛选出了27条ISSR引物和38条SRAP引物可用于遗传多样性分析。结果结果,27条ISSR引物共扩增出了178个条带,其中131条(63%)具有多态性;38条SRAP引物能够扩增出357条稳定性较好的条带,其中323条(91%)具有稳定性差异。27条ISSR引物PCR扩增产物的多态性信息量(PIC)介于0.19～0.91,平均为0.70;38条SRAP引物PCR扩增产物的多态性信息量PIC介于0～0.93,平均为0.73。聚类分析结果表明,根据27个ISSR、38个SRAP及ISSR+SRAP遗传位点分析得出遗传相似系数变化范围分别为0.73～0.99、0.72～0.95和0.73～0.95,平均分别为0.84、0.85和0.85。根据材料间的遗传相似系数聚类,三者之间的聚类有较小的差异,但总体上,17株内生真菌被聚为3大类,分离自根的内生真菌F. proliferatum聚为一类,分离自茎和叶的F. proliferatum聚集于另外两类。研究表明,内生真菌F. proliferatum遗传相似性较大,其亲缘关系较近,与传统方法鉴定出的结果一致。结论采用分子标记技术比传统的方法鉴定更为有效,同时,ISSR和SRAP标记可更真实地反映射干内生真菌F. proliferatum的遗传多样性,为该内生真菌在分子生物技术方面的研究等提供一定参考。