鸡内金酶解产物氨基酸分析研究

目的:研究鸡内金在不同的酶作用下的水解程度以及酶解产物的氨基酸含量分析。方法:在胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及中性蛋白酶作用下鸡内金水解,用氨基酸自动分析仪分析酶解产物的氨基酸含量。结果:在3种酶作用下鸡内金水解率平均值分别为36.77%,23.34%,25.44%;酶解产物中均有的16种水解氨基酸,但胰蛋白酶水解产物中氨基酸总量高于木瓜蛋白酶及中性蛋白酶,为146.52mg.(100mL)-1。结论:在3种酶的作用下鸡内金均能水解,但水解程度有差别,胰蛋白酶水解产物中水解氨基酸含量较高。     

三黄泻心汤两种汤剂体外抗菌实验研究

目的:比较研究三黄泻心汤传统饮片汤剂与现代单味浓缩颗粒配方汤剂体外抗菌作用.方法:采用液体1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5试管稀释法,测定各稀释液的抗菌作用.结果:试验菌株共30株,其中二药液具相同最低杀菌浓度(MBC)共7株;单味浓缩颗粒配方的汤剂体外抗菌作用优于传统饮片汤剂共6株;传统饮片汤剂体外抗菌作用优于单味浓缩颗粒配方的汤剂共10株;二药液均表现无抗菌作用的共7株.比较无显著差异.结论:三黄泻心汤现代单味浓缩颗粒配方的汤剂与传统饮片汤剂体外抗菌作用大致相似,前者取代后者具一定的可行性.     

紫红獐牙菜高效液相色谱指纹图谱的研究

目的建立紫红獐牙菜药材甲醇溶解部分的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱.方法HPLC色谱法,色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6mm,5μL),流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸)-乙腈,梯度洗脱,流速为0.8 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃.结果初步建立紫红獐牙菜药材的HPLC指纹图谱,标定了13个共有特征峰,并利用对照品对4个特征峰进行了鉴定.结论该方法简便、可靠,进一步完善了紫红獐牙菜药材的质量标准.     

紫红獐牙菜中3种苷类成分RP-HPLC含量测定

目的：建立反相高效液相色谱法测定紫红獐牙菜药材中3种苷类成分含量的方法。方法：色谱柱为Alltimal C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温30 ℃。结果：龙胆苦苷(gentiopicroside),芒果苷(mangiferin),8-O-β-D-吡喃葡萄糖基-1,5-二羟基-3-甲氧基酮(swertrianolin)分别在31.3～281.7,0.31～2.78,0.55～4.91 μg内线性关系良好,相关系数分别为0.999 6,0.999 3,0.999 5；平均回收率分别为103.36%,101.42%,97.39%,RSD均小于 3%(n=5)。结论：该方法操作简便,分离度好,为完善紫红獐牙菜药材的质量标准提供了依据。     

马钱子总生物碱对实验性关节炎的影响

目的:观察马钱子总生物碱及士的宁对实验性关节炎的影响.方法:从马钱子中提取生物碱并进一步分离出番木鳖碱(士的宁)、总生物碱(除去部分士的宁)、非生物碱3个部分,观察各部分对角叉菜胶引起的大鼠足肿胀及棉球致肉芽组织增生的影响.结果:总生物碱部分能明显抑制大鼠足肿胀,第4,5,6小时抑制率分别为19.76%,30.02%,36.89%;明显抑制大鼠肉芽组织增生,抑制率37.60%,士的宁及非生物碱部分对上述炎症无明显影响.结论:总生物碱具有抗炎作用,强毒性成分士的宁为无效成分.     

霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因克隆及生物信息学分析

目的克隆霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因,并进行生物信息学、密码子偏性分析。方法根据霍山石斛转录组数据获得的IRX9基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR技术得到IRX9基因cDNA的全长序列,并进行生物信息学分析。结果霍山石斛IRX9基因全长1 553 bp,包含一个长度为1 047 bp的开放阅读框,编码348个氨基酸,理论相对分子质量为39 350,等电点为7.26,为不含信号肽的亲水性稳定蛋白,定位于质膜,具有多个磷酸化位点和糖基化位点。系统进化树表明,该序列与同科植物铁皮石斛的同源性最高,且具有GT-A超家族的保守区域"DXD"。密码子偏性分析表明,该基因偏好使用以A/T结尾的密码子,具有27个偏性密码子,烟草为该基因最适合的外源表达宿主。结论成功克隆IRX9基因,为从分子水平调控霍山石斛的生长发育和改善药材产量和品质提供理论基础。     

不同产地大叶蛇葡萄多糖含量测定及抗氧化活性的研究

目的比较不同产地大叶蛇葡萄的多糖含量以及体外抗氧化活性,为大叶蛇葡萄品质评价及资源开发提供科学依据。方法采用回流法提取不同产地的大叶蛇葡萄多糖,蒽酮法测定多糖含量,DPPH·、ABTS+·法进行多糖体外抗氧化活性检测。结果来凤县格勒乡小何村1组多糖的含糖量最高,为2.22%;土家寨村2组多糖含量最低,为1.05%。此外,小何村1组多糖对DPPH·和ABTS+·的清除效果最好。结论不同产地间大叶蛇葡萄多糖含量与自由基清除能力差异较大。     

大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色谱法测定

目的 建立高效液相色谱法测定大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的方法.方法 色谱条件:Angilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85,V/V),检测波长为290 nm.结果 蛇葡萄素的回归方程为Y=24 061X+40.07(r=0.999 9,n=6),线性范围为0.101～1.101 μg;平均回收率为99.65%,RSD为1.49%.结论 该方法简单、结果可靠,为大叶蛇葡萄药材的质量控制提供了快速准确的测定方法.     

大叶蛇葡萄乙醇提取物对2215细胞HBsAg、HBeAg表达抑制作用的实验研究

目的：研究大叶蛇葡萄乙醇提取物的抗乙肝病毒（HBV）作用。方法：将大叶蛇葡萄乙醇提取物作用于乙肝病毒DNA转染人肝癌细胞系2215细胞,以细胞病变（CPE）观察药物对2215细胞的毒性,用酶联免疫测定法（ELISA）检测药物对培养8天的2215细胞分泌的表面抗原（HBsAg）和e抗原（HBeAg）表达的抑制作用。结果：大叶蛇葡萄乙醇提取物的半数毒性浓度（TC50）为250μg/ml,最大无毒浓度（TC0）为125μg/ml;乙醇提取物对培养8天的2215细胞HBsAg、HBeAg表达抑制作用的半数有效浓度（IC50）分别为43.1μg/ml、54.8μg/ml,治疗指数（TI）值分别为5.8、4.7。结论：大叶蛇葡萄乙醇提取物具一定的体外抗乙肝病毒的作用,为有效物质部位。     

大叶蛇葡萄提取物对SMMC-7721细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究大叶蛇葡萄叶及嫩茎提取物对SMMC-7721细胞增殖的影响,筛选其有效抗肿瘤活性物质。方法:采用MTT法检测不同质量浓度的大叶蛇葡萄石油醚萃取物部位、乙酸乙酯萃取物部位及水溶性物部位,以及该植物中含有的蛇葡萄素、杨梅素、杨梅苷、大黄素及槲皮素分别作用24、48、72 h后对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用。结果:乙酸乙酯萃取物部位和大黄素均能不同程度地抑制SMMC-7721细胞增殖,乙酸乙酯萃取物部位对细胞的抑制作用在100μg·mL~(-1)时具有一定的时效关系,大黄素对细胞的抑制作用在40、80、160μmol·L~(-1)时也具有一定的时效关系,乙酸乙酯萃取物部位和大黄素作用SMMC-7721细胞72 h的IC_(50)分别为110.81μg·mL~(-1)和53.20μmol·L~(-1)。结论:大叶蛇葡萄提取物具有较好的体外抗肿瘤活性。