N5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与原发性高血压病的关系研究

目的 探讨N^5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因（MTHFR）C677T多态性与原发性高血压病（EH）的关系.方法 收集两家省级住院的原发性高血压病患者（EH）252例,健康体检正常血压者（NT）195例,抽外周静脉血提取DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度（PCR-RFLP）多态性分析,检测MTHFR基因型.结果 两组CC、CT和TT三种基因型构成比总的卡方检验示分布差异显著（χ^2=12.731,P＜0.005）,EH组T等位基因高于NT组,差异有统计学意义（χ^2=13.456,P＜0.005）;经进一步卡方分割检验显示CT/TT基因型在EH组构成比高于NT组,差异显著（χ^2=11.367,P＜0.005）,调整年龄、性别、血糖、肌酐、尿素氮、体重指数和血清尿酸水平后CT/TT基因型人群患EH危险性是CC基因型的1.964倍（OR=1.964,95%CI：1.302～2.961,P=0.001）.结论 MTHFR基因CT/TT基因型可能是南方高血压病住院人群的发病危险因素之一.     

噻嗪类利尿剂、氯沙坦及其复方制剂对高血压患者的血清尿酸水平的影响

目的 观察原发性高血压病(EH)患者高尿酸血症的流行情况,以及噻嗪类利尿剂、血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦和氯沙坦+氢氯噻嗪6周降压治疗后EH患者血清尿酸(SUA)和电解质的变化.方法 收集福州4家医院近3年连续的EH患者共1080例,其中男女之比662:418,平均年龄(60.9±12.3)岁,治疗前后血压记录完整者1000例,肾功能和电解质完整者600例.结果 EH患者合并高尿酸血症的发生率为25.83%(279/1080),与EH组比较,EH合并高尿酸血症组患者体质指数、肌酐升高,内生肌酐清除率降低(P分别<0.05和0.01).降压治疗6周末69.40%(694/1000)患者收缩压<140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),85.30%(853/1000)患者舒张压<90 mm Hg.不同降压药物治疗后SUA和血钾的变化:低剂量利尿剂组SUA平均升高(43.81±71.79)μmol/L(P<0.0001),氯沙坦组平均下降(44.96±90.63)μmol/L(P<0.01,100 mg组优于50 mg组),氯沙坦+氢氯噻嗪组平均下降(7.46±84.72)μmol/L,三组药物治疗后SUA之间的差异有统计学意义;低剂量利尿剂组血钾平均下降(0.30±0.44)mmol/L(P<0.01),与氯沙坦组[(0.06±0.43)mmol/L]和氯沙坦+氢氯噻嗪组[(-0.04±0.44)mmol/L]比较,差异也有统计学意义.结论 EH患者25.83%合并高尿酸血症;高血压合并高尿酸血症者有体质指数增加和肾功能损害趋势;低剂量噻嗪类利尿剂会加重SUA增高和低血钾,氯沙坦可剂量依赖性的降低SUA,而氯沙坦+氢氯噻嗪介于两者之间.     

CYP2C9 1061 A/C与VKORC1-1639 G/A基因多态性对华法林应用剂量的影响

目的探讨维生素K环氧化物还原酶复合物1基因(VKORC1)-1639G/A与细胞色素P450酶2C9基因(CYP2C9)1061A/C多态性对中国汉族人华法林应用剂量的影响。方法应用PCR-RFLP方法检测129例长期口服华法林的患者VKORC1-1639G/A及CYP2C91061A/C多态性,并按基因型分组,分别比较VKORC1和CYP2C9不同基因型间平均华法林剂量。结果病例组检出VKORC1-1639AA、AG、GG型分别有96例(74.4%)、30例(23.3%)、3例(2.3%),等位基因A和G频率分别为86%、14%,CYP2C91061AA、AC、CC型分别有117例(90.7%)、11例(8.5%)、1例(0.8%),等位基因A和C频率分别为95%、5%;病例组与正常人组VKORC1-1639、CYP2C91061各基因型分布差异无统计学意义;VKORC1-1639不同基因型间患者所需华法林平均剂量AA型低于AG型,后者又要低于GG型;携带CYP2C91061C等位基因的患者(AC和CC型)华法林平均剂量要低于AA型。结论华法林应用剂量偏低可能与VKORC1-1639G→A和CYP2C91061A→C转变有关,VKORC1-1639AA型占多数可能是中国汉族人群所需华法林剂量普遍较低的重要原因。     

福州高血压病患者ACE基因多态性的分布及其意义

目的:探讨高血压病(EH)患者血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性是否存在种族、民族和地区差别,观察不同ACE基因型EH患者输入生理盐水后的血压反应。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测688例EH患者ACE基因多态性,同时观察110例住院患者静脉应用生理盐水的输液量,输液前、后的血压。结果:(1)福州患者ACE-II基因型构成比(35.3%)高于法国(14.8%)、低于日本(40.0%)和中国北方(39.7%)患者(P<0.005),但I等位基因分布频率随地区的接近差异逐渐缩小,到中国福州与河北地区差异已无统计学意义;(2)ACE-II基因型患者输入生理盐水5 d后收缩压升高明显高于ACE-ID型和ACE-DD型患者(P分别<0.001和<0.01),而且24%(26/110)的患者在每天输入600 ml以上的生理盐水5 d后,平均压比输液前升高超过5 mmHg,其中绝大部分为ACE-II型。结论:福州地区EH患者ACE基因多态性的检测结果在一定程度上反应了国人EH患者ACE基因多态性的分布情况。ACE-II基因型的测定可简单易行地为国人盐敏感性EH患者的诊断和治疗提供参考。     

血小板膜受体P2Y12基因多态性与原发性高血压血瘀证的相关性研究

目的探讨血小板膜受体P2Y12基因G52T、-T744C多态性与原发性高血压（EH）血瘀证易感性的关系。方法选择福建省汉族人群EH血瘀证患者216例,EH非血瘀证患者220例,血压正常对照者193例。抽取受试者外周静脉血,提取DNA,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP）检测P2Y12基因G52T、-T744C多态性类型。结果3组间G52T的GG、GT和TT基因型分布频率差异无统计学意义（x2=2．041,P=0．728）,-T744C的TT、TC和CC基因型分布频率差异有统计学意义（x2=10．500,P=0．033）;经进一步誓分割检验显示,EH血瘀证组TC／CC基因型分布频率（43．1％）高于EH非血瘀证组（30．9％）和健康对照组（33．2％）,差异有统计学意义（X2=7．598,P=0．006）。多因素Logistic回归分析显示,以健康对照组为参照系,TC／CC基因型人群是患EH血瘀证的独立危险因素;调整相关混杂因素后,TC／CC基因型人群患EH血瘀证的相对危险度是1．518,95％可信区间（95％CI）为1．011～3．025,P=0．042。结论P2Y12基因TC／CC型可能是汉族人群EH血瘀证发病的易感危险因素之一。     

重组人组织激肽释放酶基因转染人脐静脉内皮细胞

目的探讨重组人组织型激肽释放酶(HK)基因腺相关病毒载体(rAVV/HK)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作用.方法将HK基因定向克隆入腺相关病毒质粒pAAV-MCS中,形成重组腺相关病毒(rAAV-HK)质粒,经聚合酶链反应(PCR)检测和DNA测序后,将rAAV-HK、pAAV-Helper和pAAV-RC 3种质粒通过脂质体共转染293细胞,包装成带有HK目的基因的重组rAVV/HK,采用β半乳糖苷酶原位染色法测定报告基因rAVV/LacZ在HT1080中的表达,间接计算病毒滴度,并观察转染基因在传代细胞中的表达.在相同的条件下体外分别培养HUVECs(对照组)和rAVV/HK转染的HUVEC(HK转染组)48 h,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测两组HUVECs HK mRAN的表达,并利用硝酸还原酶法和分光光度法分别检测两组HUVECs一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性.结果 rAVV/HK病毒滴度为6.2×107个/mL,LacZ基因能够在第一传代和第六代HT1080细胞内稳定持续表达.与对照组比,HK转染组HUVECs HK mRNA表达增加(P<0.001);而且HK转染组HUVECs细胞培养液中NO的含量和NOS活性明显增高,P值分别<0.01和<0.05.结论 HK基因通过重组腺相关病毒载体可成功转染体外培养的HUVECs,使其HK mRNA表达增加,NOS活性和NO含量升高,此结果为基因治疗人类血管内皮细胞异常提供客观依据.     

高血压病并心力衰竭与ACE基因、SLC6A2基因多态性的关联研究

目的：探讨去甲肾上腺素转运基因[溶质载体家族6,成员2（SLC6A2）]启动子3、血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与高血压病合并心力衰竭（EH＋HF）的相关性。方法：收集176例心功能Ⅲ－Ⅳ级的EH＋HF汉族患者,及与之按性别、年龄±4、居住地相匹配的心功能Ⅰ－Ⅱ级的高血压病患者（EH组）及健康体检者（正常对照组）各176例,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测SLC6A2启动子3的A/G多态性及血管紧张素转换酶[ACE（I/D）]多态性基因型。结果：卡方分割显示EH＋HF组SLC6A2-P3-AG/GG基因型频率（41.48%）显著高于EH组（26.70%）和正常对照组（22.16%）,x2=7.937,P=0.005;EH＋HF组ACE-DD基因型频率（26.14%）显著高于EH组（12.50%）和正常对照组（10.80%）,x2=17.897,P〈0.001。Logistic回归以EH组为参照系,调整混杂因素后,SLC6A2-AG/GG,ACE-DD型,DD＋AG/GG的OR值分别为1.905（95%CI：1.138－3.188,P=0.014）,1.908（95%CI：1.009－3.609,P=0.047）,3.356（95%CI：1.188－9.475,P=0.022）。结论：携带有ACE-DD型、SLC6A2-AG/GG型可能是高血压病合并心力衰竭独立危险因素,DD＋AG/GG的危险性和预测作用最大。     

高血压血瘀证血管紧张素转换酶基因插入或缺失的多态性分析

【目的】探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因插入或缺失(I/D)的多态性与原发性高血压血瘀证的关系。【方法】选择原发性高血压(EH)血瘀证组100例、非血瘀证组120例和正常对照组100例,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测ACE基因I/D多态性。【结果】高血压血瘀证组的DD基因型及D等位基因频率(分别为0.410和0.590)高于高血压非血瘀证组(分别为0.250和0.467)和正常对照组(分别为0.220和0.455)(P<0.05或P<0.01),高血压非血瘀证组与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】ACE基因插入或缺失(I/D)多态性与血瘀证具有相关性,D等位基因可能是血瘀证的易感基因之一。     

VKORC1-1639G／A基因多态性与华法林应用剂量关系的研究

目的探讨维生素K环氧化物还原酶复合物1基因（VKORC1）-1639G／A多态性对中国汉族人华法林应用剂量的影响。方法应用PCR—RFLP法检测129例长期口服华法林的患者和198例健康对照者VKORC1-1639G／A多态性，比较VKORC1不同基因型间平均华法林剂量。结果病例组VKORC1-1639AA、AG、GG基因型频率分别为74．4％（96／129）、23．3％（30／129）、2．3％（3／129），等位基因A和G频率分别为86％和14％。病例组与健康对照者VKORC1-1639G／A多态性分布差异无统计学意义（P〉0．05）。VKORC1-1639不同基因型患者所需华法林平均剂量差异有显著统计学意义（P〈0．（301），AA型剂量[（1．444±0．282）mg／INR]显著低于AG型[（1．629±0．258）mg／INR，P=0．002]和GG型患者[（2．031±0．087）mg／INR，P=0．017]。结论中国人华法林应用剂量偏低可能与VKORC1-1639AA型占多数有关。     

ACE、CYP11B2、α-adducin基因多态性与高血压患者血压昼夜节律变化

目的研究血管紧张素转换酶（ACE）、醛固酮合成酶（CYP11B2）,α-内收蛋白（（α-adducin）基因多态性与高血压患者血压昼夜节律变化的关系。方法根据动态血压昼夜节律变化,将238例高血压患者分为杓型与非杓型两组,分析ACE、CYP11B2、α-adducin基因不同基因型在杓型血压组和非杓型血压组的分布;统计学处理用卡方检验和方差分析。结果杓型组与非杓型组ACE基因多态性的分布存在显著差异,P〈0.05;杓型组以II型的分布频率为主,而卡方分割表明非杓型组ID＋DD基因型的分布高于杓型组（P〈0.01）;而CYP11B2、α-adducin基因多态性与高血压患者血压节律变化无关联。结论ACE（I/D）基因多态性与高血压患者昼夜血压节律变化有关,携带D等位基因的患者可能更易发生夜间血压升高。