雷公藤甲素对局灶节段性肾小球硬化足细胞损伤的调控机制

目的:通过观察雷公藤甲素(TP)对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠及PAN致小鼠足细胞损伤模型中uPAR和TRPC6的表达影响,探讨TP对足细胞的保护作用。方法:将48只大鼠随机分为6组,Control组、Model组、TP-LD组、TP-MD组、TP-HD组和CSA组。除Control组外,其余各组均通过单侧肾切除联合尾静脉重复注射阿霉素方法建立FSGS大鼠模型,药物组给予不同浓度TP或CSA进行治疗,干预8周后处死。检测大鼠24h尿蛋白、血肌酐、尿素氮。HE染色观察肾组织病理变化,电镜观察肾小球足细胞病变。Western Blot检测肾组织中uPAR和TRPC6蛋白表达。培养小鼠肾足细胞MPC5,分为正常组(Control组)、PAN组(Model组)、PAN+TP组(TP组)、PAN+CSA组(CSA组)。CCK-8法检测TP对于PAN诱导的足细胞活力的影响,Western Blot检测足细胞uPAR、TRPC6蛋白水平的表达。结果:Model组大鼠尿蛋白、血肌酐及尿素氮水平较Control组显著升高(P<0.01),肾脏病理检查可见小球局灶节段性硬化,小管扩张及足突融合。Western Blot发现,与Control组比较,Model组Podocin表达下降,TRPC6及uPAR表达显著升高(P<0.01)。经TP干预后,大鼠尿蛋白、血肌酐、尿素氮及肾脏病理显著改善,肾组织Podocin表达升高,TRPC6、uPAR表达下降。随着TP浓度升高,足细胞保护作用逐步增强,高浓度TP的作用效果与CSA基本相似。细胞实验进一步证实MPC5经PAN作用48h后,Podocin表达显著下降,TRPC6及uPAR表达明显上升,TP治疗可有效逆转上述改变。结论:TP可通过下调TRPC6及uPAR起到保护足细胞,改善FSGS的作用。