探针药物法评价厚朴酚、和厚朴酚对大鼠肝微粒体中CYP450酶的抑制作用

目的 研究厚朴中的主要成分厚朴酚、和厚朴酚对CYP450酶的7种亚型酶活性的影响,预测可能的药物间相互作用,为中药的临床应用提供理论依据。方法 采用Cocktail探针方法,将厚朴酚、和厚朴酚和CYP450酶7种亚型的特异性探针底物：甲苯磺丁脲（CYP2C）、香豆素（CYP2A6）、右美沙芬（CYP2D6）、氯唑沙宗（CYP2E1）、睾酮（CYP3A）、非那西丁（CYP1A2）、安非他酮（CYP 2B6）与大鼠肝微粒体进行孵化反应,结合UPLC-MS/MS的多反应监测技术,测定对应的7种代谢产物（4-羟基甲苯磺丁脲、7-羟基香豆素、右啡烷、6-羟基氯唑沙宗、6β-羟基睾酮、对乙酰氨基酚和羟基丙酮）的峰面积,通过与对照组比较,确定厚朴酚、和厚朴酚对以上7种酶活性的影响,计算相应的IC₅₀,评价是否有抑制作用。结果 厚朴酚、和厚朴酚对大鼠肝微粒体中的4种亚型酶（CYP2C、CYP2D6、CYP2E1和CYP2B6）活性均有抑制作用,且随化合物浓度和预温育时间增加而增加机械抑制;另外3种亚型酶（CYP2A6、CYP3A4和CYP1A2）则不呈现此抑制规律。结论 厚朴在与以上4种酶（CYP2C、CYP2D6、CYP2E1、CYP2B6）代谢的药物联合用药时,易产生药物相互作用,抑制药物代谢。本研究也为中药厚朴的临床应用以及新药研发提供重要的数据支持。     

鹰嘴豆中超氧化物歧化酶抑制剂的分离与鉴定

目的 以超氧化物歧化酶为作用靶点,快速筛选、分离纯化和鉴定超氧化物歧化酶抑制剂。方法 首先,利用超滤-质谱技术(UF-MS)对鹰嘴豆中具有超氧化物歧化酶抑制作用的活性成分进行筛选。然后,在活性指导下,应用半制备型液相色谱(Semi-preparative HPLC)结合高速逆流色谱(HSCCC)技术从鹰嘴豆中分离超氧化物歧化酶抑制剂,最后,运用质谱和核磁共振波谱数据对分离所得化学成分进行结构解析和鉴定。结果 从鹰嘴豆中成功分离纯化并鉴定出五个超氧化物歧化酶抑制剂(分别为大豆苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、后莫紫檀素、鹰嘴豆芽素A),其纯度均>90%。结论 采用超高分辨质谱-半制备液相色谱-高速逆流色谱联用技术可以快速筛选、分离纯化和鉴定鹰嘴豆中超氧化物歧化酶抑制剂,为鹰嘴豆抗炎活性研究及天然产物的开发和利用提供一定的理论支持。