稳定同位素示踪法用于Caco-2细胞葡萄糖吸收模型的研究

目的 建立Caco-2细胞葡萄糖吸收模型,为考察药物对葡萄糖吸收的影响提供方法。方法 Caco-2细胞培养7,14,21 d后,分别加入25,50,75,100 mmol·L-1的葡萄糖溶液孵育5,10,15,20 min,采用高效液相色谱-质谱联用技术,以稳定同位素示踪法比较培养时间、葡萄糖浓度以及孵育时间对葡萄糖吸收的影响。结果 Caco-2细胞培养21 d后葡萄糖的吸收优于培养7 d和14 d的吸收,吸收量大,趋势稳定。此时用75 mmol·L-1的葡萄糖溶液孵育细胞10 min,葡萄糖吸收量与100 mmol·L-1比较差异无统计学意义,但高于25,50 mmol·L-1时的葡萄糖吸收量。结论 本实验条件下建立的Caco-2细胞模型可作为研究葡萄糖吸收的模型。     

夹竹桃叶多糖的层析分离纯化工艺研究及光谱分析

目的:对夹竹桃叶多糖的分离纯化工艺及光谱分析进行研究。方法:通过乙醇沉淀,除蛋白,脱色,柱层析分离及光谱分析等方法对夹竹桃叶多糖进行分析。结果:醇沉、除蛋白、脱色的最佳工艺条件为,4倍无水乙醇沉淀8 h,TCA法除蛋白,大孔树脂AB-8脱色。透析后的多糖经DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-200柱层析分离表明该多糖为单一组分多糖。结论:夹竹桃叶多糖经分离纯化后的精多糖中几乎不含游离蛋白和核酸类物质,夹竹桃叶多糖以β-糖苷型吡喃糖为主。     

四君子汤对脾气虚证模型大鼠小肠葡萄糖吸收功能作用的影响

目的 观察四君子汤对脾气虚证模型大鼠小肠葡萄糖吸收功能的影响。方法 通过颈部皮下注射利血平建立脾气虚证大鼠模型,观察大鼠体重及尿D-木糖排泄率变化,通过在体空肠灌流收集并检测葡萄糖吸收量,收集小肠黏膜,检测葡萄糖运载蛋白2（GLUT2）蛋白及mRNA表达变化。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠体重及尿D-木糖排泄率均降低,同时伴有葡萄糖吸收的下降以及GLUT2蛋白及mRNA表达的降低,通过给予四君子汤治疗,四君子汤组在各指标恢复上均优于自然恢复组。结论 四君子汤能够促进利血平致脾气虚证模型大鼠小肠吸收葡萄糖功能恢复。     

红参水提物人参总皂苷的大孔吸附树脂纯化研究

目的 研究D101大孔吸附树脂纯化人参总皂苷的工艺条件,为人参总皂苷的工业化生产提供参考.方法 以人参总皂苷的吸附率、纯化率为指标,考察D101大孔吸附树脂对人参总皂苷的吸附和洗脱条件.结果 浓度为0.8 g生药/ml的红参供试品溶液最大上样体积12.5 ml,上样流速1 ml/min;用6倍柱体积的蒸馏水进行平衡、3倍柱体积 70%乙醇洗脱树脂柱,洗脱速度1 ml/min,纯化效果较好.结论 D101大孔吸附树脂能有效富集并纯化人参总皂苷.     

经典名方当归四逆汤的历史沿革与关键信息考证

当归四逆汤出自汉代张仲景《伤寒论》，由当归、桂枝、白芍、细辛、甘草、木通和大枣7味组成，是治疗血虚寒厥证的经典名方。该研究系统整理历代中医古籍中有关当归四逆汤的文献记载，并结合现代临床应用现状，对其组成、药物基原、炮制、剂量、煎服法、主治疾病等关键信息进行考证与分析，以期为经典名方当归四逆汤复方制剂的研发与临床应用提供参考与借鉴。通过系统考证和梳理当归四逆汤的历代文献记载可知，当归四逆汤在组成上存在较多同名异方，但仍以《伤寒论》中所载处方组成对后世影响较大，为历代医家沿用；剂量上虽明清时部分药物剂量减少，但基本沿用原方所载；炮制上，当归、白芍、通草、甘草虽略有变化，亦基本遵循炮制方法；功效主治上，当归四逆汤为治疗血虚寒厥、痢疾而设，至明清代扩展至治疗头痛、痉证、小儿惊风、缩阴证等，现代多用于糖尿病周围神经病变、类风湿性关节炎、痛经、雷诺氏病等疾病中。注意事项上，古代医家认为妊娠之人勿服，且只适用于血虚寒凝之四肢厥冷，其他原因的四肢厥冷不可漫投使用，现代文献则均无严重不良反应报道。当归四逆汤疗效确切，在后续研发中，建议在保证其安全性的基础上，建立质量控制标准，进一步开展其复方制剂的开发与...     

口炎清颗粒对阴虚型口腔溃疡模型大鼠的作用机制北大核心CSCD

目的观察口炎清颗粒对阴虚型口腔溃疡模型大鼠溃疡愈合的作用,初步探讨口炎清颗粒养阴功效的作用机制。方法大鼠随机分为正常组、模型组、知柏地黄丸组(1.08 g·kg^(-1))及口炎清高、中、低剂量组(8,4,2 g·kg^(-1))。通过联合使用灌胃甲状腺素和Na OH烧灼法建立大鼠阴虚型口腔溃疡复合模型;观察大鼠的体质量、饮水量、体温等一般状况;采用ELISA法检测血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)含量,计算c AMP/c GMP比值,检测红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性等指标;观察大鼠口腔溃疡的愈合情况;采用ELISA法检测模型大鼠口腔黏膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;采用Western Blot法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量减轻、饮水量增多、体温升高(P<0.05,P<0.01),大鼠溃疡修复评分显著降低(P<0.01),血浆c AMP水平、c AMP/c GMP比值及红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性均明显升高(P<0.01),c GMP水平降低(P<0.05),口腔黏膜组织中TNF-α、IL-6含量明显升高(P<0.05),IL-10、EGF、TGF-β1含量明显降低(P<0.05,P<0.01),p38MAPK蛋白表达显著上升(P<0.05)。与模型组比较,口炎清中、高剂量组大鼠体质量明显增加(P<0.05,P<0.01);各给药组大鼠的饮水量均有所减少、体温下降(P<0.05,P<0.01),溃疡修复评分明显升高(P<0.05,P<0.01);口炎清高、中剂量组大鼠血浆c AMP水平、c AMP/c GMP比值及红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性均明显降低(P<0.05,P<0.01),口炎清中剂量组大鼠血浆c GMP水平明显升高(P<0.05);口炎清高剂量组大鼠口腔黏膜TNF-α、IL-6含量均明显降低(P<0.05,P<0.01),口炎清高、中剂量组大鼠口腔黏膜IL-10、EGF、TGF-β1含量亦明显升高(P<0.01,P<0.05);口炎清各剂量组大鼠口腔黏膜组织匀浆中p38MAPK蛋白表达明显降低(P<0.05),且呈剂量相关性。结论口炎清颗粒能通过其"养阴"作用促进阴虚型口腔溃疡愈合;介导p38MAPK蛋白表达,抑制炎症反应,调节生长因子水平可能是口炎清颗粒发挥养阴功效的作用机制。     

口炎清颗粒对阴虚型口腔溃疡模型大鼠的作用机制

目的观察口炎清颗粒对阴虚型口腔溃疡模型大鼠溃疡愈合的作用,初步探讨口炎清颗粒养阴功效的作用机制。方法大鼠随机分为正常组、模型组、知柏地黄丸组(1.08 g·kg~(-1))及口炎清高、中、低剂量组(8,4,2 g·kg~(-1))。通过联合使用灌胃甲状腺素和Na OH烧灼法建立大鼠阴虚型口腔溃疡复合模型;观察大鼠的体质量、饮水量、体温等一般状况;采用ELISA法检测血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)含量,计算c AMP/c GMP比值,检测红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性等指标;观察大鼠口腔溃疡的愈合情况;采用ELISA法检测模型大鼠口腔黏膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;采用Western Blot法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量减轻、饮水量增多、体温升高(P0.05,P0.01),大鼠溃疡修复评分显著降低(P0.01),血浆c AMP水平、c AMP/c GMP比值及红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性均明显升高(P0.01),c GMP水平降低(P0.05),口腔黏膜组织中TNF-α、IL-6含量明显升高(P0.05),IL-10、EGF、TGF-β1含量明显降低(P0.05,P0.01),p38MAPK蛋白表达显著上升(P0.05)。与模型组比较,口炎清中、高剂量组大鼠体质量明显增加(P0.05,P0.01);各给药组大鼠的饮水量均有所减少、体温下降(P0.05,P0.01),溃疡修复评分明显升高(P0.05,P0.01);口炎清高、中剂量组大鼠血浆c AMP水平、c AMP/c GMP比值及红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性均明显降低(P0.05,P0.01),口炎清中剂量组大鼠血浆c GMP水平明显升高(P0.05);口炎清高剂量组大鼠口腔黏膜TNF-α、IL-6含量均明显降低(P0.05,P0.01),口炎清高、中剂量组大鼠口腔黏膜IL-10、EGF、TGF-β1含量亦明显升高(P0.01,P0.05);口炎清各剂量组大鼠口腔黏膜组织匀浆中p38MAPK蛋白表达明显降低(P0.05),且呈剂量相关性。结论口炎清颗粒能通过其"养阴"作用促进阴虚型口腔溃疡愈合;介导p38MAPK蛋白表达,抑制炎症反应,调节生长因子水平可能是口炎清颗粒发挥养阴功效的作用机制。