发育期补充DHA对大鼠海马突触可塑性的影响

目的探讨鱼油DHA对海马突触可塑性的影响,为DHA对学习记忆的作用提供电生理依据。方法将大鼠分为灌胃鱼油组和对照组,每天分别灌以5×103ml·g-1体重的鱼油和生理盐水,90d后运用在位电生理实验方法,刺激大鼠海马穿通纤维—齿状回通路,在同一动物上记录海马DG区的LTP和LTD。结果与对照组相比,鱼油组明显增强了PS诱导的LTP,对EPSP诱导的LTP无影响;对PS和EPSP诱导的LTD均有明显的减弱作用。结论补充鱼油对海马突触可塑性有一定影响,这种影响可能是鱼油提高学习记忆能力的生理依据之一。     

RSV感染小胶质细胞活化Toll样受体3、7介导炎性反应的初步研究

目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应.方法 ①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白.②分别于感染4、8、12、16、24和36 h收集细胞,以未感染细胞作为...     

呼吸道合胞病毒诱导一氧化氮产生的机制

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染时一氧化氮(NO)的水平变化及其产生的调控机制,为临床治疗RSV疾病提供有益的思路。方法以RSV感染人肺上皮细胞A549细胞,并设立不同的感染时间(4h、8h、16h和24h),同时分别给予PDTC(核转录因子NF-κB的特异性抑制剂)或AG(诱导型一氧化氮合酶i NOS的特异性抑制剂)处理。收集各组细胞和细胞培养上清,用Western blot法检测细胞核内活性NF-κBp65蛋白的表达,半定量RT-PCR和免疫细胞化学法检测i NOS mR-NA和蛋白表达,硝酸还原酶法检测细胞培养上清中NO含量。结果RSV感染4h后,核内活性NF-κBp65蛋白、i NOS mR-NA和蛋白、细胞培养上清中NO含量均升高,各指标的变化与正常对照相比,差异均有显著性,并且与RSV感染存在时间依赖关系。加入PDTC后可明显抑制NF-κB活化,同时下调i NOS mRNA和蛋白表达。加入AG后,则明显降低细胞培养上清中NO含量。结论RSV感染可诱导产生大量的NO,其主要受i NOS的调节。NF-κB活化对i NOS基因表达具有重要的正调控作用。提示RSV诱导NO生成可能通过活化NF-κB所致。     

热毒清口服液抑制呼吸道合胞病毒的体外实验研究

目的:评价热毒清口服液体外抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的效果.方法:采用MTT法及细胞病变抑制实验,以病毒唑为阳性对照,测定热毒清口服液在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用.结果:热毒清口服液的半数中毒浓度(TC50)为9182.4 mg/L,抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为559.8 mg/L,治疗指数(TI)为16.4.结论:热毒清口服液在体外实验中对呼吸道合胞病毒有显著抑制作用.     

碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌β-内酰胺类耐药基因研究

目的 探讨碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌β-内酰胺类耐药基因携带情况.方法 收集242株临床分离的粘质沙雷菌,采用Vitek-2 Compact全自动微生物系统对其鉴定并进行药敏试验,筛选出对亚胺培南耐药18株、中介1株;再用K-B法检测19株细菌对厄他培南和美罗培南的药物敏感性,确认均为耐药;采用改良Hodge试验及EDTA协同试验检测碳青霉烯酶;PCR检测碳青霉烯酶基因blakpc、blanmc、blaimp、blagim、blavim、blaoxa-23及超广谱β-内酰胺酶基因blaveb、blaper、blatem、blashv、blactx-m-1、blactx-m-2、blactx-m-9,阳性结果进行DNA测序,BLAST比对确定基因型.结果 药敏结果显示,19株细菌对美罗培南、厄他培南、氨曲南、环丙沙星、头孢唑林、头孢曲松、头孢噻肟全部耐药,对亚胺培南18株耐药、1株中介;对阿米卡星全部敏感;对庆大霉素敏感率为57.9%;妥布霉素敏感率不到30%;对头孢替坦、头孢他啶、头孢吡肟敏感率均不足20%;左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦敏感率均不足10%;改良Hodge试验阳性18株,阴性1株;EDTA协同试验全部阴性;PCR扩增和DNA测序显示,7株含blakpc-2、6株含blactx-m-14、3株含blashv-11、2株含blashv-12、1株含blaoxa-23基因;19株细菌均未检出blanmc、blaimp、blagim、blavim碳青霉烯酶基因及blaveb、blaper、blatem、blactx-m-1、blactx-m-2超广谱β-内酰胺酶基因.结论 分离的碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌,耐药现象较为严重,主要携带blakpc-2型、blactx-m-14型耐药基因.     

药学研究：施普善体外对HSV-1感染新生乳鼠脑神经细胞保护作用研究

单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染人体后可侵犯中枢神经系统，危及生命；幸存多数会留下严重的中枢神经系统后遗症。施普善是动物脑蛋白质经人工控制的酶解而产生的器官特异性氨基酸、肽类复合物。由于其85％为氨基酸，且其氨基酸比例与正常脑组织中含量相近，故仍保持其器官特异的“氨基酸型”。已有许多献报道，施普善具有对中毒、缺O2、迷走刺激的保护作用、低血糖昏迷时的唤醒作用和对脑细胞成熟的促进作用。     

抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的制备及其鉴定

目的制备抗呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的单克隆抗体，并对其特性进行系统地鉴定。方法以活的ＲＳＶＬｏｎｇ株滴鼻（ＴＣＩＤ５０为１×１０－６，取１００ＴＣＩＤ５００１２５ｍｌ进行）加ＲＳＶ感染Ｈｅｐ２细胞（ＣＰＥ达～）腹腔注射免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，用细胞融合技术制备能稳定分泌抗ＲＳＶ的单克隆抗体细胞株。结果细胞融合一次成功，融合率为９６％，抗ＲＳＶ抗体阳性孔率为６５％。鉴定１株杂交瘤细胞Ｆ３株，染色体数为９８条，抗体亚类属ＩｇＧ１，对ＲＳＶ抗原特异；在无补体存在的情况下其腹水抗体中和效价为１∶１２８，且具融合抑制活性，腹水融合抑制效价为１∶６４。结论Ｆ３株单克隆抗体为抗ＲＳＶＦ蛋白的ＭｃＡｂ。     

人肺上皮细胞感染呼吸道合胞病毒后核内活性因子κB与诱导型一氧化氮合酶的表达

目的:呼吸道合胞病毒感染呼吸道上皮细胞后,诱导细胞过度表达活性递质.实验拟观察呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞A549后核内活件核因子κB,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白、一氧化氮和丙二醛表达的变化.方法:实验于2006-12/2007-05在安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验中心完成.①实验过程:将冻存的病毒株复苏后经Hep-2细胞增殖.用呼吸道合胞病毒感染体外培养的A549细胞,分别于感染4,8,16,24h后收集细胞和细胞培养上清.以未感染病毒的细胞为正常对照组.②实验评估:反转录聚合酶链反应检测诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的变化:免疫印迹法(Western-Blot)分别检测核内活性核因子κB、诱导型一氧化氮合酶蛋白的变化:用硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸法分别检测细胞培养上清一氧化氮和丙二醛的表达.结果:①A549细胞中核内活性核因子κB有基础表达,经由呼吸道合胞病毒感染后,核内活性核因子κB表达升高.且随着感染时间的延长而增加.②呼吸道合胞病毒感染A549细胞后,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白的表达均升高且有时间依赖性,24 h的诱导犁一氧化氮合酶mRNA表达量是基础表达量的近12倍,诱导型一氧化氮合酶蛋白的表达亦显著高于正常对照组.核内活性核因子κB与诱导型一氧化氮合酶的mRNA和蛋白升高表达呈正相关.③呼吸道合胞病毒感染能促进A549细胞培养上清中一氧化氮和丙二醛的表达升高,24 h内细胞上清中的一氧化氮呈缓慢升高变化.结论:在呼吸道合胞病毒感染A549细胞的炎性反应中核内活性核因子κB升高,与诱导型一氧化氮合酶基因和蛋白的上升表达呈正相关.     

天然植物黄蜀葵提取物对变形链球菌生长及产酸的抑制作用

目的 研究黄蜀葵花总黄酮(TFA)对变形链球菌(MS)生长及产酸的影响,为临床龋病预防提供实验基础.方法 采用二倍稀释法观察不同浓度的TFA对MS生长的影响,测定该药物的最小抑菌浓度(MIC);以低于MIC的4个浓度梯度配置含TFA的TPY液体培养基,接种MS,厌氧培养48 h,测定在不同培养时间段各浓度TFA溶液实验前后的pH值.结果 一定浓度的TFA能够抑制MS的生长,最小抑菌浓度(MIC)为2.5 g/L;在低于MIC的4个浓度梯度条件下,随着TFA浓度的升高,各浓度组在不同培养时间段pH值逐渐增高,各个浓度组与对照组的pH变化值差异均有显著性 (P<0.01),各浓度组在各个时问段与对照组之间差异均有显著性 (P<0.01).结论 TFA影响变形链球菌的生长代谢,使MS产酸减少.     

接种高滴度麻疹疫苗后死亡率增高

本文回顾了应用麻疹活疫苗的历史，应用于９月龄婴儿的标准麻疹疫苗是安全有效的。为克服４－６月龄婴儿体内存在的母体抗体的干扰，世界卫生组织曾于１９８９年建议，在麻疹是主要９月龄以内婴儿死亡原因之一的地区，可以常规接种高滴度疫苗，然而，３年来的实践发现，接受高滴度疫苗儿童的死亡率高于标准滴度疫苗接种者，并有性别差异，１９９１年ＷＨＯ规定应对接种高滴度疫苗的人群进行长期随访，１９９２年规定停止使用高滴度麻