自动化系统在水痘疫苗半成品配制中的应用

目的 应用自动化系统进行水痘疫苗的半成品配制,以降低劳动强度,提高产品均一性.方法 采用自动化系统完成水痘疫苗的原液稀释和半成品分装,并与人工操作方法进行比较,比较两种方法的清洁、灭菌和保温效果以及疫苗半成品、成品的检定结果.结果 自动化操作可使工作人员减少60％,工时缩短80％.两种方法对容器或罐体的清洗和灭菌效果均达到工艺要求.采用自动化方法保温时温度可控.用自动化操作系统制备的半成品疫苗,其滴度差异小于人工操作方法,变异系数分别为0.00％和2.17％.两种方法生产的成品疫苗的稳定性试验结果均达到标准[病毒滴度不低于3.3 lg蚀斑形成单位(plaque-forming unit,PFU)/0.5 ml].自动化和人工方法生产的成品疫苗于37℃放置7d,病毒滴度分别为3.7和3.6 lgPFU/0.5 ml;于2～8℃放置18个月分别为3.5和3.4 lgPFU/0.5 ml.结论 将自动化系统应用于水痘疫苗的原液稀释、半成品分装,可降低劳动强度,提高产品的均一性.     

用于Hib结合疫苗生产的新型候选菌株的评价

目的 观察b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)760705株在连续传代过程中的稳定性.方法 将Hib 760705株工作种子批菌种连续传代,对第5、第8、第10代Hib培养物进行全面检测,包括培养特性(细菌培养、卫星试验)、染色镜检、生化反应,以检测第5、第8、第10代Hib的生物学特性.同时采用血清凝集试验和聚合酶链反应荚膜分型方法进行b型荚膜多糖稳定性检测.结果 Hib 760705株工作种子批培养物在连续传代过程中具有典型的细菌学特性,能够稳定地产生b型荚膜多糖.结论 Hib 760705株有明确的来源和背景,可以稳定传代,具备作为Hib结合疫苗生产用候选菌株的条件.     

生物制品GMP厂房设计确认的探讨和建立

目的  研究建立符合《药品生产质量管理规范（2010年修订）》要求的生物制品生产厂房的设计确认（design qualification,DQ）文件。 方法   将生产厂房的DQ文件分为DQ方案和DQ报告。对工艺布局、生产厂房、净化空调系统、洁净暖房、洁净冷库DQ进行探讨。 结果   通过设计与确认,以文件和记录证明生物制品厂房的设计符合预定用途和药品生产质量管理规范。 结论   建立了符合药品生产质量管理规范的生物制品生产厂房的设计确认文件,为生产安全有效的生物制品奠定了基础。     

应用Stainer培养基与TFF系统制备白喉类毒素

目的 验证WHO推荐的Stainer培养基与切向流过滤(TFF)系统能否制备符合我国现行规程要求的精制白喉类毒素。方法 用PW8菌株、Stainer培养基进行了三批白喉杆菌产毒培养，用TFF微孔过滤和超滤系统分别进行了澄清与浓缩。毒素经甲醛脱毒后，用TFF超滤系统对类毒素进行了超滤精制，得到三批精制白喉类毒素，按我国现行规程主要技术指标进行评价。结果 产毒效价分别为180Lf／ml、210Lf／ml和155Lf／ml。精制类毒素纯度分别为1900Lf／mgPN、1860Lf／mgPN、1760Lf／mgPN。毒性试验和毒性逆转试验全部合格。结论 应用Stainer培养基与TFF系统可获得符合我国现行规程要求的精制白喉类毒素。     

应用Stainer培养基与TFF系统制备白喉类毒素

目的  验证WHO推荐的Stainer培养基与切向流过滤(TFF)系统能否制备符合我国现行规程要求的精制白喉类毒素.方法   用PW8菌株、Stainer培养基进行了三批白喉杆菌产毒培养,用TFF微孔过滤和超滤系统分别进行了澄清与浓缩.毒素经甲醛脱毒后,用TFF超滤系统对类毒素进行了超滤精制,得到三批精制白喉类毒素,按我国现行规程主要技术指标进行评价  .结果   产毒效价分别为180Lf/ml、210Lf/ml和155Lf/ml.精制类毒素纯度分别为1900Lf/mgPN、1860Lf/mgPN、1760Lf/mgPN.毒性试验和毒性逆转试验全部合格.结论   应用Stainer培养基与TFF系统可获得符合我国现行规程要求的精制白喉类毒素.     

细胞工厂在水痘疫苗生产中的应用

目的:提高水痘疫苗产量和厂房的利用率。方法:采用细胞工厂培养MRC-5细胞,以Roux瓶培养作对照,比较两种工艺的细胞生产情况、原液收获量等,并进行各项检定。结果:在同样细胞复苏量的条件下,采用细胞工厂比Roux瓶工艺生产的水痘疫苗产量要高,且各项检测指标均合格。结论:利用细胞工厂制备水痘疫苗,不仅提高了疫苗产量,而且节省了培养空间,降低了污染率,可用于水痘疫苗的大规模生产。     

病毒性疫苗渗透压摩尔浓度的质量控制

目的  通过检测6种病毒性疫苗成品的渗透压摩尔浓度,比较不同疫苗检测均值的差异,并观察同种疫苗检测值的批间稳定性,为增加病毒性疫苗质量控制手段提供依据。方法  采用冰点下降法检测麻疹减毒活疫苗、风疹减毒活疫苗、麻疹腮腺炎联合减毒活疫苗、麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗、水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗的渗透压摩尔浓度,对检测值进行统计学处理,计算变异系数。以麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗的渗透压摩尔浓度检测均值作为对照,进行方差齐性检验及假设检验,比较各疫苗检测均值的差异。结果  麻疹腮腺炎联合减毒活疫苗与对照相比,均值差异无统计学意义（t=1.66,P>0.05）;麻疹减毒活疫苗、风疹减毒活疫苗、水痘减毒活疫苗及流感病毒裂解疫苗与对照相比,均值差异均有统计学意义（Z>1.96,P<0.001）。同种疫苗批间渗透压摩尔浓度较为稳定,变异系数均<3%,变化幅度能控制在90%~110%均值范围内。结论  6种病毒性疫苗渗透压摩尔浓度存在一定差异,但同种疫苗检测值批间稳定性较好,因此,应根据不同疫苗的渗透压摩尔浓度,分别制定质量控制标准。     

水痘减毒活疫苗无明胶稳定剂的筛选和应用

 目的   研制不含明胶的新型稳定剂,以提高水痘减毒活疫苗的安全性。方法   以现行水痘减毒活疫苗稳定剂配方为基础,去除明胶,配制4种不同的新型稳定剂（B、C、D、E配方）。用无明胶稳定剂制备水痘减毒活疫苗,并将制备的无明胶稳定剂疫苗（B、C、D、E疫苗）与现行的含明胶稳定剂疫苗（作为对照的A疫苗）进行比较,确定最佳稳定剂配方。结果   疫苗成品于37 ℃放置7 d后,A、B、C、D、E疫苗的相关质量指标均符合《水痘减毒活疫苗注册标准》的要求,病毒滴度分别为3.6、3.5、3.3、3.3、3.3 lg PFU/0.5 ml,但C、D、E疫苗的病毒滴度已降至临界值。疫苗成品于2~8 ℃放置24个月后,A、B、C、D、E疫苗的病毒滴度分别为3.4、3.4、3.2、3.0、2.8 lg PFU/0.5 ml,其中C、D、E疫苗的病毒滴度已低于规定的标准（3.3 lg PFU/0.5 ml）,仅B疫苗的相关质量标准符合规定的要求,且与A疫苗（对照）没有差异。 结论   去除明胶的B配方稳定剂对水痘病毒有较好的保护作用。     

用于Hib结合疫苗生产的新型候选菌株的评价

目的 观察b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)760705株在连续传代过程中的稳定性.方法 将Hib 760705株工作种子批菌种连续传代,对第5、第8、第10代Hib培养物进行全面检测,包括培养特性(细菌培养、卫星试验)、染色镜检、生化反应,以检测第5、第8、第10代...     

水痘减毒活疫苗的无菌生产工艺验证

 目的  通过培养基模拟灌装试验,验证水痘减毒活疫苗（水痘疫苗）无菌生产工艺的有效性。方法  模拟水痘疫苗的无菌灌装工艺,对胰酪胨大豆肉汤培养基（TSB）按0.6 ml/瓶进行模拟灌装,对灌装后小瓶进行培养,根据小瓶内培养基的污染情况,评估现行水痘疫苗无菌生产工艺的有效性。结果  3次TSB模拟灌装试验的灌装批量分别为10 160、10 181和10 175瓶,经20～25 ℃和30～35 ℃先后培养后,均未出现TSB污染。在水痘疫苗生产区域的各监测点,≥0.5 μm悬浮粒子均≤70粒/m3,≥5.0 μm悬浮粒子均为0;沉降菌和表面微生物的菌落计数均为0;培养基灵敏度检查和微生物挑战试验均合格。结论  水痘疫苗的无菌生产工艺符合药品生产质量管理规范的要求,可确保产品的无菌性。