不同工艺制备的静注人免疫球蛋白产品质量对比研究

目的 对比用低温乙醇蛋白分离工艺制备的静注人免疫球蛋白（pH4）和两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白（10%）产品质量指标,分析制备工艺对产品质量的影响。方法 对2种工艺的产品进行IgA含量、分子大小分布、抗-HBs效价、蛋白空间结构、Fc片段活性、抗体谱和IgG亚型分布等指标的检测和对比分析。结果 两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白的IgA含量（5.30 μg/ml）明显低于低温乙醇分离制备的（281.95 μg/ml）,而分子大小分布、抗-HBs效价、蛋白空间结构、Fc片段活性、抗体谱、亚型分布指标没有明显差别。结论 两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白（10%）具有更高的安全性。     

胰腺浆液性囊腺瘤15例影像学分析

目的提高胰腺浆液性囊腺瘤的诊断水平。方法回顾性分析经手术病理证实的15例浆液性囊腺瘤的CT(10例)和MRI(5例)特点。结果肿瘤最大径2.1～7.2 cm,平均4.6 cm;微囊型10例,由大量微囊(直径<2 cm)组成伴纤维间隔,呈蜂窝状或海绵状外观;寡囊型2例,由少数(个数<6)和大囊(直径>2 cm)构成,伴少许纤维间隔;混合型3例,内部表现同微囊型,伴周围大囊(直径>2 cm)。15例肿瘤均呈分叶状,边界清楚,5例中央见星芒状瘢痕组织,1例伴钙化。肿瘤囊壁薄(厚度<2 mm),囊内纤维间隔(厚度<3 mm)及中央瘢痕呈延迟强化。结论胰腺浆液性囊腺瘤CT和MRI表现具有一定特征性。分叶状、边界清楚的分房状肿物伴间隔延迟强化为其影像学特征性表现。     

离子交换层析分离纯化人结合珠蛋白的研究

目的：探索应用离子交换层析从Cohn组分Ⅳ分离纯化人结合珠蛋白（haptoglobin,Hp）的方法,并对纯化产物进行初步鉴定及活性分析。方法 Cohn组分Ⅳ溶解液稀释后经利凡诺络合,收集上清并用50％硫酸铵进行沉淀,沉淀重溶后用Q Sepharose Fast Flow 层析分离纯化得到目的蛋白。然后利用SDS-PAGE及免疫印迹对目的蛋白进行鉴定,并利用Native-PAGE方法测定纯化产物的活性。结果 Cohn组分Ⅳ经过利凡诺络合及盐析处理后能有效去除部分杂蛋白,并使目的蛋白富集。利用离子交换层析方法从Cohn组分Ⅳ中纯化得到的主要产物为Hp2-2,SDS-PAGE显示Hp纯度较好,免疫印迹分析进一步证明,利用该法成功分离得到目的蛋白Hp,且利用Native-PAGE方法测得目的蛋白活性为2．8 U／ml。结论利用该法从Cohn组分Ⅳ中成功分离得到人Hp,方法简单,易于放大生产,具有较好应用前景。     

离子交换层析法对人血管性血友病因子中人纤维连接蛋白去除效果的研究

目的 通过层析工艺处理人凝血因子Ⅷ层析洗涤制品,采用离子交换层析法对人血管性血友病因子(vWF)中人纤维连接蛋白(Fn)去除效果进行研究,以期在不改变活性收率条件下,选择1种能够有效降低Fn的方法。方法 在多批次的工艺开发实验中,采用德国默克公司生产的Fractogel^?EMD TMAE(M)强阴离子填料进行层析,考察了vWF瑞斯托霉素效价(vWF:RCof)、vWF回收率、蛋白质含量和Fn含量。结果 在vWF小试纯化工艺开发过程中,经过离子交换层析工艺能有效降低样品中Fn含量,去除率达到87%以上,vWF效价回收率达到80%以上,其他质量指标未发生明显变化。结论 使用离子交换层析纯化vWF,能够有效降低Fn含量,对于开发新产品工艺和提高血液制品生产企业产品质量具有积极意义。     

抗人T淋巴细胞猪免疫球蛋白急性毒性实验研究

目的观察拟生产药物抗人T淋巴细胞猪免疫球蛋白（ALG）对小鼠的急性毒性作用。方法 ICR小鼠,体质量18～22g,雌雄各半,分别采用腹腔注射限度试验和尾静脉注射最大受试药量试验法,连续观察14d后处死全部小鼠,并进行尸体解剖、大体肉眼观察,发现异常的组织或器官进行病理切片送检。结果两种试验方法结果均显示：所有试验动物存活,供试品的LD50〉5g/kg,但尾静脉注射最大给药量试验时,发现给药2d内动物的一般情况较差,处死并解剖后发现用药组有少数小鼠出现肝、肾的感染性侵害。结论 ALG的LD50值大于5g/kg,约相当于临床用量的250～333倍,提示该药物比较安全,但在过量静脉注射后短期内对小鼠仍有一定毒性。     

磁珠法结合定量PCR检测肠道病毒71型灭活疫苗中宿主细胞DNA残留量的验证及应用

目的  对磁珠法结合定量PCR（quantitative PCR,qPCR）检测肠道病毒71型灭活疫苗〔非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）〕（EV71疫苗）中宿主DNA残留量进行适用性验证及应用。方法  利用微磁珠与蛋白溶液中DNA的特异性结合,来提取样品中残留的Vero细胞DNA。将已知浓度Vero细胞DNA对照系列稀释后,作为标准品DNA与提取的DNA同时进行qPCR扩增。根据标准品DNA的循环阈值与浓度之间的线性关系,对未知样品中残留DNA进行定量分析。结果  标准品检测范围在0.03～3 000.00 pg/反应。该方法的标准曲线决定系数≥0.98,扩增效率在90%～110%。质控样品回收率在50%～150%,相对标准偏差均小于30%。实验结果的各项参数均在要求范围内。结论  磁珠法可解决残留DNA检测中样品前处理的技术难点,qPCR能够简便、快速、准确地对生产过程样品的EV71疫苗中DNA残留量进行定量测定。适用于EV71疫苗中DNA残留量的检测及疫苗生产过程和其成品的质量控制,对其他以Vero细胞为基质的病毒性疫苗质量控制具有借鉴意义。     

外科用冻干人纤维蛋白胶的开发研究

纤维蛋白胶(也称纤维蛋白粘合剂,fibrin sealant,FS)是从人血浆中提取的一种天然的人源性产品,无组织毒性,通常是由纤维蛋白原/ⅩⅢ因子和凝血酶/CaCl2 2个主要成分构成的粘合剂,可供外科用于控制出血、粘合组织和处置难度大的创伤[1～3].笔者参照文献[4]方法,经实验室研究、开发,批量生产了3批FS,经中国药品生物制品检定所检定符合企业所报质量标准,目前已完成临床观察. 1 材料与方法 1.1 材料组份Ⅰ及组份Ⅲ(Nitschmann法,本公司制备);磷酸三丁脂(TNBP,上海化学试剂厂,分析纯);Tween-80(香港FARCO厂,化学纯);牛抑肽酶(丽珠集团丽宝生物化学制品有限公司,注射级)配制成3000kIU/ml,用于配制冻干人纤维蛋白原溶解液;DEAE-Sephadex A-50和SP-Sepharose FF(Amersham Pharmacin Biotech公司). 1.2 制备①纤维蛋白原(简称纤原)分离[4]:称取组份Ⅰ沉淀,加入一定量的溶解液,过滤除去变性蛋白,然后加0.3%TNBP和1%Tween-80,24℃～26℃6h保温灭活病毒,再经2次低温乙醇法分离去除残余的TNBP及Tween-80而得到纯化并经病毒灭活的纤原,加适量保护剂澄清和除菌过滤,分装、冰冻干燥.②凝血酶的分离:称取组分Ⅲ沉淀,加溶解液溶解,用一定分子量的PEG沉淀去除脂类及杂蛋白成分,其上清液加0.3%TNBP和1%Tween-80于24℃～26℃6h保温灭活病毒,用DEAE-Sephadex A-50凝胶吸附,其洗脱液加入特定的无机离子在适当的温度条件下使之激活[5];再经SP-Sepharose FF凝胶纯化,其洗脱液经澄清和除菌过滤分装冻干制成.     

多层螺旋CT及MRI在乳腺癌良恶性病变中的评估价值分析

目的 探究多层螺旋CT及MRI在乳腺癌良恶性病变中的评估价值。方法 选择我院治疗的180例(198个病灶)疑似乳腺癌患者为研究对象，分别对其实施多层螺旋CT及MRI检测，以乳腺病理组织检测为金标准，评估两种检测方式对乳腺癌良恶性病变的鉴别价值，并对比恶性乳腺癌病灶与良性乳腺癌病灶多层螺旋CT及MRI检测结果的差异性。结果 多层螺旋CT、MRI、联合检测对比显示，联合检测对乳腺癌良恶性鉴别的一致性、灵敏度及特异度均高于单独检测(P<0.05);乳腺癌恶性病变患者多层螺旋CT检测血流量(BF)、血容量(BV)、血管表面通透性(PS)均高于良性病变组患者(P<0.05);乳腺癌恶性病变患者MRI检测容量转移常数(Ktrans)、速率常数(Kep)均高于良性病变患者(P<0.05)。结论 多层螺旋CT及MRI对乳腺癌的良恶性病变具有较好的区分鉴别价值，尤其是联合检测准确率更高。     

MSCT 诊断多原发肺癌的临床应用价值

多原发肺癌(multiple primary lung cancer,MPLC)是指在同一患者肺内同时或先后发生2个或2个以上原发性肺癌。根据癌灶发现时间可将 MPLC 分为发生时间间隔<6个月的同时性 MPLC(synchronous MPLC,sMPLC)和间隔在6个月或以上的异时性 MPLC(metachronous MPLC,mMPLC)[1]。随着检查技术快速发展,近年来 MPLC 的检出也越来越多。笔者通过总结 MPLC 的 MSCT 征象、临床诊断及治疗,评价 MSCT诊断 MPLC 的临床应用价值。     

SAPHO综合征累及骨及关节99Tcm-MDP SPECT/CT显像表现

目的 观察⁹⁹Tc^m-MDP SPECT/CT显像所示滑膜炎、痤疮、脓疱病、骨肥厚及骨炎(SAPHO)综合征累及骨与关节表现。方法 回顾性分析69例SAPHO综合征患者⁹⁹Tc^m-MDP SPECT/CT资料,以聚类分析法评估SAPHO综合征累及骨、关节模式。结果 根据聚类分析,SAPHO所致骨与关节病变可分为肋骨型(n=19)、脊柱型(n=32)和胸锁关节型(n=18)。共于19例肋骨型检出145处病灶,包括60处肋骨病灶及95处其他病灶,半数以上呈低、中度摄取;半数呈溶骨性骨质破坏、边缘呈低度摄取;少数肋骨密度无明显改变。脊柱型多累及中轴骨 (27/32,84.38%);椎体病变多累及一侧肋椎关节、呈连续性分布及低、中度摄取。胸锁关节型均累及胸锁关节,半数以上病灶位于胸锁关节并呈高度摄取,以"牛头征"和"半牛头征" 为典型表现,多见骨质增生硬化、骨皮质肥厚。结论 SAPHO综合征累及骨关节可分为肋骨型、脊柱型及胸锁关节型。全身骨显像缺乏"牛头征"或"半牛头征"等典型表现时,结合临床表现及SPECT/CT融合显像有助于诊断。