破壁、未破壁雨生红球藻粉体外抗氧化活性及体内抗衰老作用及比较研究

目的:探究破壁、未破壁雨生红球藻粉的体外抗氧化活性及体内抗衰老作用,量化并比较两者活性及作用差异,为应用雨生红球藻提供选择依据。方法:以ABTS、DPPH及羟自由基清除率及IC50值为指标,评价破壁、未破壁雨生红球藻粉的体外抗氧化活性。采用2月龄SD大鼠作为青年正常对照,12月龄SD大鼠作为中老年模型对照,灌胃给予破壁、未破壁雨生红球藻粉(90mg/kg),7周后测定大鼠血清及脑组织抗氧化指标、皮肤相关指标、血脂水平及肝功能指标。结果:体外抗氧化实验结果显示,破壁、未破壁雨生红球藻粉对ABTS、DPPH及羟自由基的清除率随浓度增加而升高,而在总计88.9%的浓度检测点,破壁雨生红球藻粉的体外自由基清除率高于未破壁雨生红球藻,破壁雨生红球藻粉的体外自由基清除率IC50值更低。体内抗氧化指标显示,破壁、未破壁雨生红球藻粉均能升高中老年大鼠血清T-OAC水平、GSH-Px及CAT活力,而破壁雨生红球藻粉还能降低血清及脑组织MDA含量,升高血清GSH、脑组织GSH水平及SOD活力;皮肤相关指标显示破壁、未破壁雨生红球藻粉均能降低皮肤组织Tyr活性,而破壁雨生红球藻粉还能升高Hyp水平;血脂水平指标显示破壁雨生红球藻粉能降低血清TG含量;肝功能指标显示未破壁雨生红球藻粉能降低血清AST活性。结论:破壁、未破壁雨生红球藻粉均具有较好的体外抗氧化活性及体内抗衰老作用;破壁雨生红球藻粉具有潜在的降血脂功效,未破壁雨生红球藻粉具有潜在的肝保护作用;破壁雨生红球藻粉较未破壁的体外抗氧化活性及体内抗衰老作用更显著、全面,结合市场价格在两者中显示出更优的性价比,为应用雨生红球藻提供了选择依据,值得进一步研究与开发。     

孕康口服液对化学损伤联合米非司酮致气血两虚型流产模型大鼠的保胎作用研究

目的 探究孕康口服液对限饲联合乙酰苯肼、环磷酰胺及米非司酮致气血两虚型流产模型大鼠的保胎作用。方法 将妊娠大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、黄体酮组及孕康口服液低、中、高剂量组(4,6,9 mL·kg^–1),每组12只。前9 d,一边造模一边给药。第10,11天,除正常对照组外,其余各组均灌胃米非司酮。给药期间检测自主活动、肛温、体质量,血液分析仪检测红细胞数(red blood cells,RBC)、血红蛋白数(hemoglobin,HGB)、白细胞数(white blood cells,WBC)。第12天处死大鼠后解剖计算胚胎丢失率、子宫、卵巢、胸腺和肝脏系数,酶联免疫法检测血清中激素β-人绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin,β-HCG)、孕酮(progesterone,P)、雌二醇(estradiol,E₂)水平及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)、γ干扰素(γ levels of interferon,IFN-γ)、白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)的水平,免疫组化法检测子宫组织中孕激素受体(progesterone receptor,PR)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达。结果 与模型对照组比较,不同剂量孕康口服液组大鼠体质量、肛温、自主活动次数显著增加,血液中RBC、HGB和WBC数目增多,子宫、卵巢、胸腺和肝脏系数显著升高,血清中P、E₂、IL-4、IL-10水平显著增加(P<0.05或P<0.01),胚胎丢失率明显下降,血清中TNF-α、IFN-γ水平降低(P <0.05或P<0.01),子宫内膜的病变程度减轻,子宫组织PR和VEGF蛋白表达明显上调。结论 孕康口服液对乙酰苯肼+环磷酰胺+限饲联合米非司酮造成气血两虚型流产模型大鼠具有明显的保胎作用。     

骨痹通消颗粒对激素型股骨头坏死人骨髓间充质干细胞成骨与成脂分化的影响

目的 探究骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死人骨髓间充质干细胞（hBMMSC）成骨与成脂分化的影响。方法 取激素性股骨头坏死患者骨髓,体外进行hBMMSC的培养,通过细胞形态学观察、成骨及成脂分化潜能来鉴定hBMMSC。以完培组（基础培养基+10%的胎牛血清）作为对照,采用CCK-8法测定1%、2%、5%、8%、10%体积分数的骨痹通消含药血清A组作用24 h后对细胞增殖的影响。细胞在96孔板的培养过程中,每孔加入地塞米松溶液0.52 μl,以完培组（基础培养基+10%的胎牛血清）和损伤组（基础培养组+10%的胎牛血清+0.52 μl地塞米松溶液）作为对照,采用CCK-8法测定2%、5%、8%体积分数的骨痹通消含药血清B组对激素环境中细胞活力的影响。以无激素诱导细胞作为对照组（基础培养基+10%的胎牛血清）,将体外激素诱导的hBMMSC细胞分为模型组（基础培养基+10%的胎牛血清+10-5 mol/L地塞米松溶液）、实验组（基础培养基+5%的骨痹通消含药血清+ 10-5 mol/L地塞米松溶液）。茜素红染色试剂盒测定各组成骨分化后矿化结节的形成;油红O染色试剂盒测定各组成脂分化后脂滴的形成;RT-qPCR测定成脂相关标志基因PPARγ、C/EBP-α与Fabp4中mRNA的表达,Western blot检测成骨相关蛋白BMP-2、Runx2及β-catenin的蛋白表达含量。 结果 原代细胞培养7 d后,可见梭形、纺锤形或多角形的贴壁细胞。第三代细胞生长均匀,平行排列,透光率好。成骨诱导21 d,细胞发生改变,局部细胞聚集,并有矿化结节产生,茜素红染色呈阳性;成脂诱导21 d,脂滴与油红O染液结合变为红色,油红O染色呈阳性。与完培组比较,10%体积分数的含药血清A组细胞活力下降（P＜0.05）。与完培组比较,损伤组细胞活力下降（P＜0.05）;与损伤组比较,2%、5%、8%体积分数的含药血清B组细胞活力升高（P＜0.05）。与对照组比较,模型组染色面积降低（P＜0.05）;与模型组比较,实验组中矿化结节与沉积升高,染色范围也更广（P＜0.05）。与对照组比较,模型组细胞内脂质积累增多（P＜0.05）;与模型组比较,实验组较细胞内脂质积累降低（P＜0.05）。与对照组比较,模型组PPARγ、C/EBP-α和Fabp4的表达量升高（P＜0.01）,与模型组比较,实验组PPARγ、C/EBP-α和Fabp4的表达量降低（P＜0.05）。与对照组比较,模型组BMP-2、Runx2及β-catenin蛋白表达含量升高（P＜0.01）,与模型组比较,实验组BMP-2、Runx2及β-catenin蛋白表达含量降低（P＜0.05）。 结论 骨痹通消颗粒能够促进激素性股骨头坏死hBMMSC的增殖及其向成骨分化的能力,抑制成脂分化,为临床上防治激素性股骨头坏死提供了理论基础。     

石楠藤等7种活血化瘀中药对老年痴呆模型小鼠记忆力影响的比较研究

目的:探讨石楠藤等7种活血化瘀中药的抗老年痴呆作用。方法:建立侧脑室注射Aβ_(25-35)制备小鼠痴呆(AD)模型,以Morris水迷宫逃避潜伏期和寻找平台游泳距离为观察指标,观察石楠藤等7种活血化瘀中药对AD模型小鼠学习记忆能力的影响。结果:石南藤提取物组小鼠的逃避潜伏期以及寻找平台游泳距离均出现明显地缩短(P0.05),其他各中药提取物(郁金、鸡血藤、生蒲黄、赤芍、益母草、穿山甲)灌胃后,AD模型小鼠逃避潜伏期和寻找平台游泳距离在测试中无明显的差异。结论:石南藤提取物可以明显提高AD模型小鼠的学习记忆能力,拮抗或修复Aβ_(25-35)对小鼠学习能力的损伤。