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1.
2.
3.
目的 构建小鼠Ufm1基因RNA干扰慢病毒载体,并实现该基因在小鼠单核巨噬细胞系(RAW264.7)中的稳定表达抑制.方法 根据小鼠Ufm1基因设计两条RNA干扰序列,合成靶序列双链DNA,与pFU-GW-RNAi载体连接,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.pFU-GW-RNAi载体、pHelper 1.0载体及pHelper 2.0载体共转染293T细胞包装产生慢病毒颗粒,并测定其滴度,随后感染RAW264.7细胞,建立稳定转染细胞株.将RAW264.7细胞分为空白组、阴性对照组及RNA干扰慢病毒感染组,用Real-time PCR检测Ufm1基因mRNA的表达量.结果 PCR扩增检测阳性菌落和测序证实,shRNA片段完全正确插入慢病毒载体pFU-GW-RNAi中.在荧光显微镜下观察可见,293T细胞呈绿色荧光,并测得病毒滴度为9×105 TU/μl.重组慢病毒感染RAW264.7后,用Real-time PCR检测到Ufm1基因mRNA的表达受到抑制.结论 成功构建了小鼠RNA干扰慢病毒载体,并能够在RAW264.7细胞中有效沉默靶基因. 相似文献
4.
目的 构建含新的生长激素异形体 (GHv)基因全长编码区的pGEM TEasy质粒和GHv 谷胱甘肽转硫酶 (GST)融合蛋白的表达质粒并在大肠杆菌表达出其融合蛋白。方法 采用克隆和亚克隆技术构建GHv GST融合基因的表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1并用异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导其表达GHv GST融合蛋白 ,谷胱甘肽 Sepharose 4B纯化试剂盒纯化融合蛋白。 结果 含GHv GST融合基因表达质粒的大肠杆菌表达出相对分子质量约 43 0 0 0的GHv GST融合蛋白 ,SDS PAGE结果显示纯化的融合蛋白为单一条带。结论 成功构建成GHv GST融合基因的表达质粒并且GHv GST融合蛋白在大肠杆菌BL2 1中有高表达。上述工作为制备多抗 ,深入研究GHv基因的功能奠定了基础。 相似文献
5.
6.
7.
目的探讨阿司匹林对维持性血液透析患者血小板活化的影响。方法将研究对象分3组(A组和B组各10 人,均为维持性血液透析患者,其自身动静脉内瘘反复失败;C组10人,为健康志愿者,做为对照组),A组病人口服阿司匹林75mg/d,B组不服用阿司匹林,观察3个月内血透病人自身动静脉内瘘的存活情况,并采用流式细胞仪测定其治疗前后血小板活化指标(CD62P,CD63,PAC-1)的表达,并进行组间比较。结果阿司匹林治疗后,A组活化血小板百分率明显低于B组,但仍高于C组(CD62P:A组2.63±1.08,B组5.21±1.90,C组1.31±0.88,PA-B<0. 002,PA-C<0.01;CD63:A组1.34±0.53;B组1.92±0.88,C组0.77±0.47,PA-B>0.05,PA-C<0.05;PAC-1:A组1. 35±0.68,B组2.13±0.87,C组0.81±0.41,PA-B<0.05,PA-C<0.05)。结论阿司匹林能部分抑制血小板活化。 相似文献
8.
目的:探讨健康体检中超声诊断小肝癌的临床价值。方法:对受检人员尤其是高危人群(结节性肝硬化、慢性乙型肝炎、丙型肝炎患者),采用多方位,多角度检查,以清晰显示肝内小肝癌的声像图特征及血流情况。结果:健康体检中经腹部超声检查发现无临床症状的小肝癌发病率逐年增多。结论:健康体检超声检查可发现无临床症状的早期小肝癌,为临床治疗提供最佳时机, 相似文献
9.
目的探讨需主动筛查免疫缺陷病毒(HIV)的肺部感染人群。方法收集我院2008年5月至2010年3月收治的54例肺部感染HIV阳性者临床资料,分别对年龄段、职业构成比例、临床症状特点、体征以及辅助检查特点进行分析。结果 54例患者最大81岁,最小26岁,平均51.91岁;其中男48例,平均年龄53.77岁,女6例,平均37.53岁;职业分布农民占72.22%,退休人员16.67%;症状表现:咳嗽75.93%,发热62.96%,气促或呼吸困难59.26%,咯痰33.33%,消瘦14.81%,心悸12.97%,乏力11.11%,纳差3.70%;辅助检查特点:间质性肺炎改变30例,肺炎变12例,支气管炎4例,肺结核或肺外结核9例,有胸腔积液的11例,肺部淋巴增大的11例,胸膜增厚8例,伴霉菌者5例。结论对呼吸道症状重,体征轻者;间质性肺炎者;伴结核、霉菌感染、带状疱疹者;肺部淋巴增大、胸膜增厚、胸腔积液者;症状较重且文化较低的30~40岁青壮年男女、50~70老年男性等人群要主动筛查HIV,防止误诊误治。 相似文献
10.
目的探讨经阴道超声对子宫内膜息肉的诊断价值及图像特征。方法经阴道超声诊断为子宫内膜息肉151例声图像分析。结果子宫内膜息肉超声图像具有一定的特征性,诊断符合率达96%,经阴道超声诊断子宫内膜息肉具有重要的应用价值。结论子宫内膜息肉超声图像具有一定的特征性,经阴道超声诊断子宫内膜息肉具有重要的应用价值:二维图像呈颗粒状或滴水状高回声团块。 相似文献