腹腔镜超声波技术临床应用初探

超声影像术已广泛地应用于临床，在普通外科的应用中，它采用腹腔外和腹腔内技术。腹腔内技术中超声影像术(IOU)从70年代开始至今，经历了15年的发展过程，已被成功地运用于胆道、肝脏、胰腺等多种外科手术中，并肯定了其自身在开放性手术中的作用。而腹腔镜术中超声影像术（LIOU)经历了从1958年到现在的漫长的37年的发展历程，到1992年，由于超声波对结石的特征性信号和无创伤特性而取代了术中胆道造影术在腹腔镜胆囊切除术中的位置。日前腹腔镜超声影像术尚处于进一步的临床实践，以发现其发挥最大作用的领域。     

胆道梗阻时肝血循环的变化及调节

胆道阻对机体的影响是多方面的，在肝脏方面可以引起血循环及血流量的改变，而肝血循环的变化对肝脏乃至整个胆道均产生重要影响。已有研究证实，肝血流是影响胆道流体力学的重要因素，而胆道流体力学变化与胆道的病理生理改变密切相关。     

PTEN和mTOR信号转导通路在胆管癌发展中作用的研究

目的: 研究PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中mTOR和PTEN蛋白在胆管癌中的表达及其在胆管癌发生、发展中的作用。方法:用免疫组织化学方法和RT-PCR法，检测胆管癌中mTOR 和PTEN 的表达。结果:与正常组织相比，免疫组化法和RT-PCR两种方法结果均显示，胆管癌中的mTOR表达明显增加，而PTEN的表达明显下降;两者呈负相关（r=-0.862,P<0.01）。结论:PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中重要的调节位点和节点PTEN在胆管癌中的表达明显降低，而mTOR的表达明显增高。〖KG(*8〗提示该信号转导通路在介导胆管癌的发生、发展的过程中起重要作用。     

The relationship of CyclinD1 and estrogen receptor expression in the process of proliferation and metastasis in breast neoplasm

Cylin D1 play a very importantrole in the prolifi-ration of tumor cells.The purpose of this study wasto investigate the role of Cylin D1 and estrogen recep-tor ( ER) expression in breast carcinomas and theirrelationship.1　MATERIALSAND METHODS1 .1　 Clinical DataAll the 1 46cases of breast neoplasm were fe-males with age ranging from 1 8to 65 years ( average45 .34± 1 0 .39) .The enrolled in this study were5 6cases of benign breast mass including 44cases ofbreastfibroadenoma,1 2 case…     

Celecoxib对胆囊癌细胞GBC-SD增殖的抑制作用

目的研究Celecoxib对人胆囊癌细胞GBC-SD生长和凋亡的影响及其作用机制.方法采用免疫细胞化学SABC法检测GBC-SD环氧合酶-2(Cox-2)蛋白表达,采用四唑氮蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,酶联免疫吸附试验(LISA)检测前列腺素E2(PGE2)含量.结果 Celecoxib可下调GBC-SD细胞Cox-2蛋白表达.Celecoxib抑制GBC-SD细胞增殖作用呈时间依赖性,作用2天后就有轻度抑制,第3、第4和第5天抑制作用已相当明显(P<0.05,与对照组相比),并且这种增殖抑制作用能被200 g/ml GE2拮抗.Celecoxib诱导GBC-SD细胞G1-S期阻滞,40 μmol/L(P<0.05)和20 μmol/L(P<0.05)Celecoxib组G0-G1 期细胞含量比对照组( μmol/L)明显增高,而S期和G2/M期细胞含量比对照组明显降低(P<0.05).40 μmol/L(P<0.05)和20 μmol/L(P<0.05)Celecoxib处理48 后GBC-SD细胞凋亡率明显上升.结论 Celecoxib通过Cox-2和PGE2途径抑制GBC-SD细胞生长和诱导凋亡.     

胆囊腺瘤-腺癌中的DNA含量和基因表达

目的 研究胆囊腺瘤从增殖到恶变中腺上皮细胞的增殖变化和基因表达。方法PCR-RFLP法测定APC、ras基因突变,ABC免疫化学组织染色法测定p53蛋白表达。用TJTY-300全自动图像分析仪测定胆囊上皮细胞核异型性和DNA含量。结果 上皮细胞核异型性和DNA含量在胆囊腺瘤-腺癌过程中逐渐增加。胆囊腺瘤中异倍体比例与腺瘤的大小有明显的关系,直径≥1cm异倍体显著增加(P<0.05)。在胆囊腺瘤-腺癌过程中可检测到APC基因和RAS基因突变。P53蛋白在这一过程中不表达。结论 胆囊腺瘤-腺癌的过程是胆囊癌发生中一条重要的途径。当胆囊腺瘤直径≥1cm时具有明显的癌变潜能。其分子改变机制与胆囊上皮不典型增生-原位癌途径不同。     

反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体联合转染对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞株QBC-939的增殖能力和细胞凋亡的影响。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将二者先后转染入QBC-939,经G418筛选和荧光细胞克隆挑选得到稳定转染细胞株,并用Western blot检测转染前后的蛋白表达变化;用MTT法和软琼脂克隆形成试验观察各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞生长周期及凋亡率的变化。结果Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,并以前者为甚;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因的细胞克隆形成率分别为(6.78±0.89)%和(14.86±2.13)%,明显低于未转染组;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,细胞凋亡率从(1.63±0.27)%分别增加到(18.47±1.46)%和(6.19±0.78)%;在上述效应检测中,单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,能抑制胆管癌细胞的生长和增殖,并促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DNMT1反义基因;在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,二者通过甲基化途径对胆管癌的发生发挥作用。     

p27kip1基因在人胆管癌细胞化疗增敏效应中的作用

目的 探讨外源性p27^kip1在人胆管癌细胞系QBC939中高表达对胆管癌细胞化疗敏感性的影响。方法 通过携带人p27^kip1基因的重组腺病毒载体Ad-p27mt转染人胆管癌细胞系QBC939。经逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot检测p27^kip1在胆管癌细胞中的表达；经MTT比色法及流式细胞术检测5-氟尿嘧啶（5-FU）、丝裂霉素（MMC）、环磷酰胺（CTX）对转染p27^kip1前后的QBC939细胞生长抑制及凋亡的影响。结果 Ad-p27mt转染后5-FU、MMC和CTX对QBC939细胞生长抑制率，分别由转染前的41．89％、45．59％和38．91％显著增加为56．15％、55．65％和51．69％；凋亡率也由13．76％、11．76％和10．46％，明显升高为41．39％、35．94％、34．46％，差异均有显著性意义（均P〈0．05）。结论 p27^kip1在QBC939细胞中高表达，能显著增强胆管癌细胞对化疗药物的敏感性，为基因联合化疗药物治疗胆管癌提供了参考依据。