同位素稀释-超高效液相色谱串联质谱法检测血浆中的皮质醇

目的:建立一种同位素稀释-超高效液相色谱串联质谱法检测血浆中的皮质醇。方法:使用C18固相抽提小柱纯化、富集人体血浆中的总皮质醇。采用LC/MS/MS-ESI法分析血浆中的皮质醇含量。梯度流动相为0 min,50%甲醇;3 min,90%甲醇;3.5 min 90%甲醇;3.6min 50%甲醇;5 min 50%甲醇。水相含0.2%甲酸。MRM检测模式选择性监测cortisol(m/z363.2/121.4)、内标cortisol-d4(m/z367.4/121.4)。结果 :血浆中加入梯度标准品的加标回收率分别为102.5%,101.1%,103.3%。检测冻存血浆中皮质醇的实验里,组内变异为0.54%~2.47%,组间变异为0.96%~1.69%,线性相关系数为R2≥0.999。LC/MS/MS信噪比为10时检出限为12pg。结论:该方法具有良好的特异性、灵敏度、精密度,能够准确的检测血浆中总皮质醇含量,为实现皮质醇溯源打下基础。     

HBx突变体特异性抗血清的制备及临床研究

目的探讨HBx突变体特异性抗血清的制备及临床效果。方法通过多肽合成的方法制备HBxd431、HBx-d382缺失型突变体特异性多肽抗原,免疫动物制备相应抗血清。产生的抗体经纯化、酶标后,建立检测HBx-d431、HBx-d382特异性多肽抗原及其抗体的ELISA方法。通过对肝细胞癌患者和非肝细胞癌患者临床标本的检测,研究HBx-d431、HBx-d382缺失型突变体多肽抗原及其抗体的临床意义。结果 ELISA法研制的兔抗体HBx-d431、HBx-d382多克隆抗体均能与相应的抗原发生反应,并随着兔抗血清稀释的增加,A值会逐渐下降,肝细胞癌组HBxAg-w、HBxAg-m、HBxAb-w和HBxAb-m明显高于正常健康组,差异有统计学意义。结论建立的ELISA方法将可用于HBV相关肝细胞癌的早期诊断、HBV携带者及慢性乙肝患者的监测。     

不同厂家MH琼脂干粉和MH培养基的比较分析

目的 对市场上几个常见厂家的MH琼脂干粉和MH琼脂培养基进行性能分析.方法 遵循CLSI文件要求对不同厂家MH琼脂进行K-B纸片扩散法抗生素敏感试验操作及结果判读.结果 目前市面上厂家MH干粉和MH培养基质量参差不齐,都存在药敏结果失控现象.通过自行另外调整pH及Ca2＋、Mg2＋浓度可使相应药敏结果在控,但会使另一些药敏结果失控.结论 各临床微生物实验室应加强MH培养基的质量控制,以保证药敏试验结果更标准,而培养基厂家更应该严把质量关,给用户放心的好产品.     

儿童肺炎支原体抗生素敏感性研究

目的:考察本地区肺炎支原体儿童人群中的感染情况及对常用抗生素的敏感性。方法:用肺炎支原体培养药敏试剂盒对疑似支原体性肺炎的儿童进行培养和药敏检测。结果:肺炎支原体检出率为20.78%,抗生素敏感性由高到低依次为美满霉素(92.4%),强力霉素(91%),莫西沙星(84.8%),左氧氟沙星(84.1%),加替沙星(83%),阿奇霉素(75.2%),交沙霉素(72.4%),乙酰螺旋霉素(69%),克林霉素(69%),克拉霉素(66.2%),环丙沙星(64.8%),依托红霉素(59.3%),罗红霉素(59.3%),红霉素(55.9%)。结论:肺炎支原体对临床常用抗生素表现出不同情况的耐药性,药敏检测对肺炎支原体感染的治疗及耐药性的预防具有重要意义。     

两种商品化单纯疱疹病毒2型IgG抗体检测试剂盒比较研究

目的比较国产和进口两种商品化单纯疱疹病毒2型IgG抗体检测试剂盒的灵敏度和特异性。方法用两种试剂盒同时对比检测了5个人群的血清样本:性病门诊样本386份,孕妇样本339份,正常体检样本482份,12岁以下儿童样本140份,40岁以上中老年人样本398份,共计1745份。结果两试剂盒对性病门诊人群的阳性符合率为99.03%(102/103),阴性符合率为99.65%(282/283),孕妇人群的阳性符合率为92.86%(26/28),阴性符合率为100%(311/311),正常体检人群的阳性符合率为94.4%(17/18),阴性符合率为100%(464/464),40岁以上中老年人群的阳性符合率为91.7%(22/24),阴性符合率为100%(372/372),12岁以下儿童人群检测均为阴性,符合率为100%。结论国产试剂盒与进口试剂盒的总体阳性符合率为96.53%(167/173),阴性符合率为99.94%(1571/1572),具有较高的灵敏度和特异性,可以满足临床需求。     

商品化试剂盒检测乙肝表面抗体检测结果差异性分析

目的分析不同厂家试剂检测人乙肝表面抗体之间的差异以及表面抗原和表面抗体同时阳性几率。方法三水区人民医院收集150份表面抗原阳性标本和当天新鲜标本164份共314份实验标本,分别用A、B、C、D四个国内主流酶免试剂检测系统和郑州安图生物化学发光和酶免试剂来检测人乙肝表面抗体和表面抗原,以金标准来对各厂家的结果进行差异性分析。结果几种厂家乙肝表面抗体试剂的灵敏度和特异性都达到了98%以上,差别不大。其中,安图酶免试剂的跃登指数(灵敏度+特异性-100%)最高,为99.49%。国内各厂家的不同试剂表面抗原和表面抗体同时阳性的几率几乎没有差别,均为2%左右。结论在标准规范的操作方法下,7种国产表面抗体试剂均存在一定的假阳性或假阴性,但是比例都比较小,按照正常的检验标准来说,均在可接受范围内。     

EB病毒三项检测试剂盒(VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA)联合检测在鼻咽癌诊断中的临床意义

目的评价VCA-IgA,NA1-IgA,EA-IgG三种标志物单独及联合检测对鼻咽癌诊断的价值。方法采用ELISA法检测病理组织学诊断确认的169份鼻咽癌患者血清样本和86份健康人血清样本,对比单独及联合检测的灵敏度和特异性。结果单独检测一种标志物时,灵敏度分别为81.1%(NA1-IgA),79.5%(EA-IgG),64.4%(VCA-IgA);特异性则分别为89.8%(NA1-IgA),98.9%(EA-IgG),86.0%(VCA-IgA)。进行EA-IgG、NA1-IgA两种标志物联合检测时,灵敏度可以达到95.3%,特异性为98.9%。EA-IgG、VCA-IgA、NA1-IgA三种标志物联合检测,灵敏度提高至98.6%,特异性98.9%。结论VCA-IgA,NA1-IgA和EA-IgG联合检测用于鼻咽癌诊断优于任何单一或者两项联合检测,具有较高的临床应用价值。     

直接免疫荧光法在儿童呼吸道感染病毒病原学分析中的应用

<正>呼吸道病毒感染是儿科常见的疾病,引起的症状多变,给临床诊断和治疗造成很大的困难。近年来,分子生物学技术的发展使得越来越多的新病毒被发现,使得呼吸道病毒的检测对于儿童呼吸道感染的诊疗越发重要[1-2]。一般实验室常用的病毒检测方法包括免疫学方法和核酸扩增技术[3]。核酸扩增检测技术有聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)等,其中