抑制星形胶质细胞Cx43可保护LPS诱导的多巴胺神经元损伤

目的探讨星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx43在脂多糖(LPS)诱导的多巴胺神经元退变中的作用。方法体外培养SD大鼠原代中脑神经元-胶质细胞和原代混合胶质细胞,随机分为对照组、LPS(10 ng/ml)组、Cx43抑制剂~(43)Gap27(200μg/ml)组、LPS+~(43)Gap27组、半通道阻滞剂18β-GA(10μmol/L)组和LPS+18β-GA组。通过免疫组化检测络氨酸羟化酶(TH)阳性细胞的数目与形态;检测细胞外液中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)、谷氨酸浓度表征胶质细胞的半通道功能,检测一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量以及活性氧簇(ROS)表征神经免疫反应的强度。RT-qPCR、Western blot与免疫荧光检测星形胶质细胞Cx43的mRNA和蛋白表达。结果 LPS处理导致多巴胺神经元渐进性死亡;在此过程中,细胞外液中的ATP与谷氨酸水平升高,差异有统计学意义(P0.05),此升高与胶质细胞半通道活性紧密联系;同时发现星形胶质细胞上的Cx43在LPS诱导的神经免疫中表达下降,且变化有统计学意义(P0.05);而预处理Cx43抑制剂~(43)Gap27或者半通道阻滞剂18β-GA后,LPS引发的胶质细胞外的ATP和谷氨酸释放明显减少,该变化有统计学意义(P0.05);同时,LPS引发的多巴胺神经元的损伤也几乎被完全抑制,多巴胺神经元数目从对照组的49%上升为114%与117%,该变化有统计学意义(P0.05);同时LPS引起的免疫反应也部分被抑制,细胞上清中的TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx43在LPS引发的多巴胺神经元退变中扮演重要角色,其半通道的开放可能是促进神经免疫反应、诱发神经毒性的重要原因,表明Cx43可能是帕金森病(PD)的一个潜在病理靶点。     

雾霾和沙尘暴天气细颗粒物对人角质细胞促炎症作用和过敏反应的影响北大核心CSCD

目的观察细颗粒物PM_(2.5)对人角质细胞HaCaT的促炎症作用和过敏反应的影响。方法在雾霾天气和沙尘暴天气下分别收集PM_(2.5),用多次超声水浴法提取PM_(2.5)全颗粒,雾霾天气和沙尘暴天气下收集制备的PM_(2.5)分别记为PM_(2.5)non-dust即PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)dust即PM_(2.5)(D)。实验组分为PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)及PM_(2.5)+2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzol,DNCB)联合作用组,采用MTT实验、实时荧光定量PCR实验、ELISA检测测定各处理组作用后细胞存活率、相关促炎症因子IL-18、IL-1α、TNF-α表达变化。结果与对照组相比HaCaT细胞经各组处理后的细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。HaCaT细胞经PM_(2.5)(N)处理后,IL-1α、TNFα的胞内mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);而经PM_(2.5)(D)处理后IL-1α、TNFα的表达明显增加,变化倍数分别上调为2.65倍(P<0.01)、1.69倍(P<0.05);HaCaT细胞经PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)处理后IL-18的胞外释放量与对照相比均有显著增加(P<0.01),而胞内表达水平存在差异;且PM_(2.5)预处理可明显拮抗化学致敏剂DNCB导致的IL-18细胞外蛋白含量增加(P<0.05)。颗粒物组分分析显示,TNF-α的产生与PAHs(r=0.929)、WSOC(r=0.905)成正相关;而IL-18和IL-1α的产生与PAHs(r=-0.901,r=-0.864)、WSOC(r=-0.847,r=-0.919)成负相关。结论本研究表明了不同组分PM_(2.5)引发皮肤角质细胞免疫反应的异同;沙尘天气比雾霾天气的PM_(2.5)可能具有更强的促炎症效应;而雾霾天气的PM_(2.5)的致敏反应可能更为持久,颗粒物的致敏反应可能通过TLR2/4等促免疫通路导致。     

苯并[a]芘暴露引起小鼠脑内β淀粉样蛋白相关分泌酶及降解酶表达变化

目的探讨苯并[a]芘(benzo[a]pyrene, BaP)暴露后小鼠脑组织中β淀粉样蛋白(βamyloid, Aβ)生成相关分泌酶及降解酶的表达变化。方法 30只C57BL/6小鼠随机分为对照组和低、高剂量BaP染毒组,经腹腔注射分别给予溶剂玉米油和1.0和5.0 mg/kg·bw的BaP,1次/d,连续60 d。采用实时定量PCR法检测淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、Aβ分泌酶和降解酶mRNA的表达;通过Western blot观察Aβ蛋白、Aβ分泌酶和降解酶的蛋白表达。本研究中涉及的Aβ分泌酶包括两个β分泌酶(β位点分泌酶1和2,Bace1/2)和γ分泌酶的4个亚基(Psen1、Nct、Aph1a和Pen2);Aβ降解酶包括胰岛素降解酶(IDE)和脑啡肽酶(NEP)。结果高剂量BaP染毒后APP的mRNA和Aβ蛋白水平明显增加,分别为对照组的1.61倍(P0.01)和1.33倍(P0.01)。Aβ分泌酶中的Bace1、Bace2和Nct的mRNA表达量明显上升,与对照组相比,低、高剂量组Bace1为1.57倍(P0.01)和1.50倍(P0.01);Bace2为1.39倍(P0.05)和2.32倍(P0.01);Nct为1.97倍(P0.05)和2.77倍(P0.01),两剂量组间差异有统计学意义(P0.05)。BaP暴露后Bace1和Psen1的蛋白表达都呈增加趋势,在BaP低、高剂量组中Bace1蛋白表达上调到对照组的1.82倍(P0.05)和2.09倍(P0.01);Psen1在低、高剂量BaP暴露后的表达量是对照组的1.64倍(P0.05)和1.24倍(P0.01)。Aβ降解酶IDE的mRNA和蛋白水平均没有明显变化;NEP的mRNA表达呈剂量依赖性的下降趋势,低和高剂量组中的表达量分别为对照组的57%(P0.01)和29%(P0.01),其蛋白水平也明显下调,低和高剂量组下降到对照组的43%(P0.01)和25%(P0.01),且两组间差异有统计学意义(P0.01)。结论 BaP暴露后小鼠脑内的Aβ及其分泌酶表达增加,同时Aβ降解酶表达水平下调,提示BaP暴露可能会干扰Aβ的生成和降解,从而可能对相关疾病如阿尔茨海默症的发生起促进作用。     

中药薤白抗癌防癌作用研究概述

常用中药薤白具有良好的抗癌防癌作用,是一种有效的临床抗癌辅助性药物,广泛用于一些恶性肿瘤的治疗。该研究就国内外对薤白的抗肿瘤、抗氧化、清除亚硝酸盐、阻断亚硝胺合成、免疫增强等抗癌防癌的药效药理实验结果进行系统综述,为这味中药的进一步开发利用提供参考。     

超声雾化石棉纤维悬液致大鼠肺损伤的观察

目的探讨用超声雾化石棉悬液建立大鼠石棉肺模型的可行性。方法选取体重在180-200 g的雄性健康SD大鼠40只,随机分为正常对照组5只和实验组35只（实验组分为7个亚组,分别为1、3天和1、2、4、8、10周亚组,每亚组5只）。将石棉纤维制成石棉纤维悬液,超声雾化让动物吸入,每天雾化吸入2 h,每周吸入7 d,最长染尘10周。以肺组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、组织羟脯氨酸（Hyp）、肺脏指数、肺组织病理改变为观察指标。结果实验组肺脏指数实验初2周内较正常对照组高,而2周以后体重变化增长较正常对照组慢;MDA与SOD变化规律相似,均为先增高后减低,MDA 2周达峰值,而SOD 1周达峰值;Hyp于1周以后逐渐升高。肺组织早期以充血为主,中后期则以慢性炎症为主,随时间延长,纤维化逐渐加重,纤维化呈弥散性,但以血管周围及细支气管周围最为严重。结论采用超声雾化染尘方法可以方便地建立大鼠石棉肺模型。     

玻璃体切除联合超声乳化术治疗复杂性玻璃体视网膜疾病的远期疗效

目的：评价玻璃体切除联合白内障手术治疗复杂性视网膜脱离的疗效和安全性。 方法：回顾性病例系列研究。复杂性玻璃体视网膜疾病患者143例162眼接受玻璃体切除联合白内障手术治疗。主要结果包括术后视力和并发症。 结果：术后随访时间平均26.2 mo。主要病因包括视网膜脱离、增生性糖尿病视网膜病变、黄斑疾病等。术后1,6,12,18,24mo 与术前比较视力提高≥2行分别为86眼（53.1%）、89眼（54.9%）、87眼（53.7%）、93眼（57.2%）和101眼（62.3%）。 结论：玻璃体切除联合白内障手术治疗复杂性玻璃体视网膜疾病是一种有效、安全的手术。     

不同时期施肥量对盾叶薯蓣产量影响的研究

目的探索提高盾叶薯蓣产量的科学施肥技术。方法各处理间施用的肥料种类和总数量相同,而不同时期的施肥量不相同,找出处理间的产量差异。结果每667m2一次性施用高浓度硫酸钾复合肥(N13P17K15≥45%)50.0kg,作促根肥或底肥的产量最高,其他处理次之,最差是不施肥的。结论以一次性施促根肥和底肥为好,既能大幅度提高经济产量,又能减少生产费用投入,该技术可推广使用。     

苯并[a]芘对神经胶质细胞中胰岛素降解酶与脑啡肽酶表达的影响

目的：探讨苯并［a］芘［benzo(a)pyrene,BaP］对神经胶质细胞中具有β-淀粉体（β-amyloid,Aβ）清除作用的胰岛素降解酶（insulin-degrading enzyme,IDE）及脑啡肽酶（neprilysin,NEP）表达的影响。方法：制备新生SD大鼠原代神经胶质细胞混合培养体系,接受不同浓度的BaP、Aβ1-42寡聚体、Aβ1-42纤维体单独或联合处理24 h后,采用细胞增殖 毒性检测试剂盒测定细胞存活率。随机分为对照组、BaP（2.00 μmol/L）组、Aβ1-42（20.00 mg/L）寡聚体组、BaP+Aβ1-42寡聚体组、Aβ1-42（20.00 mg/L）纤维体组、BaP+Aβ1-42纤维体组,其中BaP均为预处理12 h后再与不同聚集状态的Aβ1-42共同作用。进一步采用实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹技术检测体系中IDE、NEP的mRNA和蛋白表达水平。结果：20.00 μmol/L及以下浓度的BaP处理,20.00、40.00 mg/L的Aβ1-42寡聚体或Aβ1-42纤维体单独处理,BaP与Aβ1-42寡聚体或BaP与Aβ1-42纤维体联合处理对神经胶质细胞的存活率均无明显影响。与对照组相比,BaP单独处理组中IDE、NEP的mRNA和蛋白水平均未明显改变;而Aβ1-42寡聚体单独作用可明显上调IDE的mRNA及蛋白水平（P<0.05）,同时BaP预处理可显著抑制Aβ1-42寡聚体作用引起的IDE表达水平上调（P<0.05）;另一方面,Aβ1-42纤维体在单独处理或有BaP预处理情况下,IDE、NEP的mRNA和蛋白水平均未发生明显改变。结论：在对细胞存活率无明显影响的前提下,BaP预处理显著抑制了Aβ寡聚体作用后的IDE表达水平上调,提示苯并［a］芘可能干扰Aβ寡聚体降解途径导致Aβ增多聚集,进而可能促进认知功能降低及阿尔兹海默病的形成。